Name: Caenorhabditis elegans의 배아 치명률 정량화 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T15:15:00.000+00:00
Duration: 11 min 35 s
Description: 배우세요 Caenorhabditis elegans의 배아 치명률을 정량화하는 저비용 분석법을 통해 유전적 및 환경적 요인이 발달에 미치는 영향을 평가하는 방법을 익히세요. 이 프로토콜은 전문 장비 없이도 정확한 결과를 제공합니다.

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	<li>Corsi A. K., Wightman B., Chalfie M. A Transparent window into biology: A primer on Caenorhabditis elegans. WormBook Online Rev C Elegans. Biol. 2015; doi/10.1895/wormbook.1.177.1.</li>
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	<li>Bai X. et al. Loss of the seipin gene perturbs eggshell formation in Caenorhabditis elegans. Development. 2020;147(20):dev192997.</li>
	<li>Green R. A. et al. Automated profiling of gene function during embryonic development. Cell. 2024;187(12):3141-3160.e23.</li>
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<table><tbody><tr><td>암피실린 나트륨 염</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A9518</td><td></td></tr><tr><td>박테리올로지 펩톤</td><td>Fischer Scientific</td><td>DF0118-17-0</td><td></td></tr><tr><td>C. elegans N2</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>N2</td><td>야생형</td></tr><tr><td>C. elegans NL2099</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td>NL2099</td><td>rrf-3(pk1426) II. RNAi 과민성</td></tr><tr><td>무수 염화 칼슘</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>746495</td><td></td></tr><tr><td>콜레스테롤</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C3045</td><td></td></tr><tr><td>15mL 원추형 튜브</td><td>VWR</td><td>60818-725</td><td></td></tr><tr><td>14mL 배양 튜브</td><td>VWR</td><td>470150-966</td><td></td></tr><tr><td>다이어프램 진공 펌프</td><td>Amazon</td><td>TC-100</td><td></td></tr><tr><td>해부 현미경</td><td>AmScope&nbsp;</td><td>SM-2</td><td></td></tr><tr><td>Escherichia coli HT115</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td>RNAse III 결핍, RNAi 먹이 실험에 사용</td></tr><tr><td>Escherichia coli OP50</td><td>Caenorhabditis Genetics Center</td><td></td><td></td></tr><tr><td>과립 형 아가르</td><td>Fischer Scientific</td><td>BP97445</td><td></td></tr><tr><td>핸드헬드 탈리 카운터</td><td>LabDepot</td><td>HTCP01</td><td></td></tr><tr><td>IPTG, 디옥산 프리(아이소프로필-β-D-티오갈락토사이드)</td><td>US Biological</td><td>I8500</td><td></td></tr><tr><td>LB 브로스(밀러)</td><td>US Biological</td><td>L1520</td><td>LB 매체를 만들기 위해 25g의 LB 분말을 1L의 증류수에 용해합니다. 121.1 &deg;C에서 20분 동안 오토클레이브합니다.</td></tr><tr><td>Luer Lok 일회용 주사기</td><td>BH Supplies</td><td>BH20LL</td><td></td></tr><tr><td>황산 마그네슘</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>현미경 슬라이드</td><td>Sail Brand</td><td>7101</td><td></td></tr><tr><td>100mm 페트리 접시</td><td>Tritech Research</td><td>T3371</td><td></td></tr><tr><td>35mm 페트리 접시</td><td>Tritech Research</td><td>T3501</td><td></td></tr><tr><td>인산 칼륨 버퍼(PPB)</td><td></td><td></td><td>인산 칼륨 버퍼(1M)를 만들기 위해 인산 칼륨 모노 베이식 98g과 인산 칼륨 다이 베이식 48g을 1L의 증류수에 용해합니다. pH를 6으로 조정합니다. 121 &deg;C에서 20분 동안 오토클레이브합니다.</td></tr><tr><td>인산 칼륨 다이 베이식</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>795496</td><td></td></tr><tr><td>인산 칼륨 모노 베이식</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>529568</td><td></td></tr><tr><td>로커(진동 믹서)</td><td>Corning LSE</td><td>6720</td><td></td></tr><tr><td>세럴로지컬 피펫, 25mL&nbsp;</td><td>Corning</td><td>4489</td><td></td></tr><tr><td>세럴로지컬 피펫, 5mL&nbsp;</td><td>Celltreat</td><td>229235</td><td></td></tr><tr><td>Infors Multitron 셰이킹 인큐베이터</td><td>INFORS HT</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>염화 나트륨</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9888</td><td></td></tr><tr><td>5N 염수 용액</td><td>Fisher Scientific</td><td>&nbsp;SS256-500</td><td></td></tr><tr><td>5% 염소 화 나트륨</td><td>LabDepot</td><td>LC246302</td><td></td></tr><tr><td>인산 나트륨 다이 베이식</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>S9763</td><td></td></tr><tr><td>Sorvall ST1 Plus 원심분리기</td><td>Thermo Scientific</td><td>75016030</td><td></td></tr><tr><td>교반 플레이트</td><td>&nbsp;ONilab</td><td>ONi28-S</td><td></td></tr><tr><td>주사기 필터</td><td>Semmerfeld</td><td>JQP033022QE1</td><td></td></tr><tr><td>수조</td><td>FOUR E's Scientific</td><td>WB401</td><td></td></tr></tbody></table>

caenorhabditis elegans의 배아 치명률 정량화

Quantifying Embryonic Lethality Rate in Caenorhabditis elegans

Caenorhabditis elegans의 배아 치명률 정량화

Embryonic lethality is a cornerstone phenotype used in Caenorhabditis elegans research to characterize developmental defects arising from factors such as ...

Our research focuses on measuring embryonic lethality in Caenorhabditis elegans and determining how strongly a perturbation affects development. This protocol can be applied to assess embryonic lethality caused by genetic mutations, RNAi knockdowns, drug treatment, nutritional supplementation, or environmental perturbations.To begin, gather the required reagents. Prepare 1 liter of nematode growth medium or NGM in a 2-liter bottle. Allow the medium to cool to 55 degrees Celsius in a water bath. After placing the bottle on a stir plate, aseptically add the required reagents. Pour approximately 25 milliliters of medium into each 100-milliliter plate. Inoculate 200 milliliters of LB medium with a single E. coli OP50 colony using a sterile inoculation loop. Place the flask on an orbital shaker at 200 revolutions per minute, and incubate overnight at 37 degrees Celsius. Transfer the E. coli OP50 culture into autoclaved centrifuge bottles. After centrifugation, resuspend the bacterial pellet in 1/20th of the original volume. Seed each 100-millimeter NGM plate with one to 1.5 milliliters of the concentrated culture, and incubate overnight at room temperature to allow the bacteria to grow.

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Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

이 비디오는 예쁜꼬마선충의 수명을 측정하는 전통적인 플레이트 기반 방법을 설명합니다. 예시 프로토콜은 RNAi로 처리된 기생충의 수명을 측정합니다.

수명 분석: 예쁜꼬마선충(C. elegans) 수명 측정

C. elegans의 알을 낳는 행동은 발달, 생식 및 해부학 연구에서 중요한 정보를 제공할 수 있습니다.이 비디오는 알을 낳는 분석의 중요한 단계를 소개하고 약물의 생식 독성을 테스트하는 샘플 실험을 보여줍니다.

Egg Laying Assay: 예쁜꼬마선충의 알을 낳는 행동을 정량화하는 방법

출처: Anderson, Q. L., et al. 고처리량, 고함량, 액체 기반 C. elegans 병리 시스템. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 유전자 변형 C. elegans 유충이 마이크로플레이트에서 병원성 박테리아에 노출되는 액체 기반 분석을 보여줍니다. 배지에 분비된 박테리아 독소는 숙주 스트레스와 사멸을 유도합니다. 형광 염료는 죽은 벌레를 염색하여 이미징 기반 사망률 정량화를 통해 유전적 감수성 또는 내성을 평가할 수 있습니다.

C. elegans 유충의 병원성 박테리아 유발 사망률 평가

계란에서 웜 (EIW) 분석은 달걀 누워 행동을 정량화 할 수있는 유용한 방법입니다. 달걀 부설의 변화는 모델 유기체의 행동 반응 할 수...

에 박테리아의 효과를 측정<em&gt; C. 엘레</em계란 보존 분석을 사용하여&gt; 행동

우리는 생식계열 독성을 평가하는 데 사용되는 선충 Caenorhabditis elegans에서 고처리량 화학 분석의 세부 단계를 설명합니다. 이 분석법에서는 화학 물질 노출에 따른 생식세포 기능의 중단을 이수성 배아에 특이적인 형광 리포터를 사용하여 모니터링합니다.

선충을 사용하여 생식선 화학 독성의 종합 평가<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

여기에서는 선충 Caenorhabditis elegans의 배아 신장의 초기 및 후기 단계에서 발생하는 형태 생성 결함을 모니터링하기 위해 특별히 고안된 프로토콜에 대해 자세히 설명합니다. 궁극적으로, 이러한 프로토콜은 이러한 단계를 조절하는 유전자를 식별하고 배아의 전후 축을 따라 차등 요구 사항을 특성화하도록 설계되었습니다.

소설 메트릭은 선충의 배아 신장의 특성을<em&gt; 예쁜 꼬마 선충</em

여기 우리가 설명 복제 설정 방법, 양적 측정 C. 선 충 수명/생존 하 접근법 및 healthspan 높은 처리량 및 강력한 방법으로 데이터 품질을 희생 하지 않고도 많은 조건의 심사 되므로. 이 프로토콜은 전략 하 고 데이터 복제 집합의 분석을 위한 소프트웨어 도구를 제공 합니다.

복제 설정된 방법: 양적 측정 꼬마 선 충 수명에 접근 높은 처리량

이 작품은 한 번의 하룻밤 실행에 80-100 C. 예쁜 꼬마 배아에서 배아의 동시 3D 시간 경과 영상을 허용하는 반 높은 처리량 프로토콜을 설명합니다. 또한 데이터 분석을 간소화하기 위해 이미지 처리 및 시각화 도구가 포함되어 있습니다. 사용자 정의 리포터 균주와 이러한 방법의 조합은 배아 발생의 상세한 모니터링을 가능하게.

C. elegans 배아 개발을 분석하는 세미 고처리량 이미징 방법 및 데이터 시각화 툴킷

샤페론-샤페론과 샤페론 기판 상호 작용을 연구하기 위해, 우리는 온화한 돌연변이와 결합된 RNA 간섭을 사용하여 Caenorhabditis elegans에 있는 합성 상호 작용 스크린을 능력을 발휘하고 chaperones의 과잉 발현및 유기체 수준에서 조직 특정 단백질 기능 장애를 감시합니다.

조직별 샤페론 상호 작용을 위해 검사하기 위해 Caenorhabditis elegans를 사용

여기에서 우리는 모델 유기체 C. elegans를 사용하여 배아 생존력과 생산된 배아(새끼)의 총 수를 결정하는 일반적인 방법을 제시합니다.

Caenorhabditis elegans의 배아 생존력 및 무리 크기 측정

배우세요 Caenorhabditis elegans의 배아 치명률을 정량화하는 저비용 분석법을 통해 유전적 및 환경적 요인이 발달에 미치는 영향을 평가하는 방법을 익히세요. 이 프로토콜은 전문 장비 없이도 정확한 결과를 제공합니다.

Caenorhabditis elegans의 배아 치명률 정량화

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