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	<li>Hattar S, Liao HW, Takao M, Berson DM, Yau KW. Melanopsin-containing retinal ganglion cells: architecture, projections, and intrinsic photosensitivity. Science. 2002;295(5557):1065&#8211;70.</li>
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</ol>

```html
<table><tbody><tr><td>AAV2-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry</td><td>Addgene</td><td>44361</td><td>Cre-dependent viral vector encoding excitatory DREADD (hM3Dq) fused to mCherry for selective ipRGC activation</td></tr><tr><td>Anti-c-Fos antibody (rabbit monoclonal)</td><td>Cell Signaling Technology</td><td>2250S</td><td>Primary antibody used to detect c-Fos as a marker of neuronal activation</td></tr><tr><td>Anti-tdTomato antibody (goat)</td><td>LSBio</td><td>LS-C340696</td><td>Primary antibody used to detect mCherry/tdTomato reporter expression</td></tr><tr><td>Blue LED driver</td><td>Thorlabs</td><td>LEDD1B</td><td>Power supply for controlling intensity and output of blue LED</td></tr><tr><td>Blue LED light source</td><td>Thorlabs</td><td>M470L5</td><td>LED source emitting blue light (&lambda;max &asymp; 470 nm) for photic stimulation</td></tr><tr><td>ClockLab software</td><td>Actimetrics</td><td>Version 6.0.53</td><td>Software for acquisition and analysis of circadian locomotor activity data</td></tr><tr><td>Clozapine-N-oxide (CNO)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C0832-5MG</td><td>Ligand used to activate hM3Dq DREADD receptors in vivo</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Invitrogen</td><td>62248</td><td>Fluorescent nuclear stain for labeling cell nuclei</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat Alexa Fluor 555</td><td>Invitrogen</td><td>A21432</td><td>Fluorescent secondary antibody for detection of goat primary antibodies</td></tr><tr><td>Donkey anti-rabbit Alexa Fluor 488</td><td>Invitrogen</td><td>A21206</td><td>Fluorescent secondary antibody for detection of rabbit primary antibodies</td></tr><tr><td>Fluoromount-G</td><td>Invitrogen</td><td>00-4958-02</td><td>Mounting medium used to preserve fluorescence in tissue sections</td></tr><tr><td>ImageJ (Fiji) software</td><td>NIH</td><td>Version 2.16.0/1.54g</td><td>Open-source software for image processing and quantitative analysis</td></tr><tr><td>Opn4cre Mice</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>RRID:IMSR_JAX:035925</td><td>Mice used for chemogenetic activation</td></tr><tr><td>Violet LED driver</td><td>Mightex</td><td>SLA-1000-2</td><td>Power supply for controlling violet LED output</td></tr><tr><td>Violet LED light source</td><td>Mightex</td><td>BLS-LCS-0385-04-22</td><td>LED source emitting violet light (&lambda;max &asymp; 385 nm) for wavelength-specific stimulation</td></tr><tr><td>Wild-type mice</td><td>The Jackson Laboratry</td><td>Jackson strain #101043</td><td>Mice used for violet light experiment</td></tr></tbody></table>
```

화학유전학적 및 스펙트럼적 접근법을 이용한 주간 생체 위상 변화 유도

Inducing Daytime Circadian Phase Shifts Using Chemogenetic and Spectral Approaches

In mammals, circadian phase shifting during the daytime is limited by reduced photic responsiveness of the suprachiasmatic nucleus (SCN), restricting the ...

inducing-daytime-circadian-phase-shifts-using-chemogenetic-spectral

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

이 문서는 생쥐의 circadian 기능과 가벼운 응답을 결정하는 데 사용할 수있는 방법을 검토합니다.

휠 실행 활동을 사용하여 마우스의 Circadian 및 급성 라이트 응답 측정

Circadian 시계는 개별 세포 내 기능, 즉, 그들은 세포 자율적 있습니다. 여기, 우리는 비 침습적, 루시 페라 기반의 실시간 bioluminescence 기술을 사용하여 셀 자치 클럭 모델을 생성하는 방법을 설명합니다. 리포터 전지는 circadian 생물학을 공부를위한 다루기 쉬운, 기능 모델 시스템을 제공합니다.

루시 페라 제 Bioluminescence 기자를 사용하여 유전자 발현의 셀 자치 Circadian 시계 리듬을 모니터링

출처: Kodani, S., et.al. 마우스의 수면/각성 상태를 모니터링하는 동안 신경 회로의 광유전학적 조작. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 생쥐의 수면에서 각성으로의 전환에 관여하는 신경 회로의 광유전학적 조작을 보여줍니다. 이 절차에는 광섬유와 전극을 뇌와 근육에 외과적으로 이식하여 빛 자극과 전기생리학적 기록을 가능하게 하는 것이 포함됩니다. 말단 줄조선(BNST)의 침대 핵에서 빛에 민감한 양이온 채널을 활성화하기 위해 빛을 전달함으로써 신경 활동이 조절되어 연구자들은 각성 유도와 관련된 뇌 및 근육 신호를 분석할 수 있습니다.

마우스의 수면에서 각성으로의 전환을 위한 신경 회로의 광유전학적 조작

생체 외에서 생물 발광 분석 결과 유 방 상피 세포에서 세포 circadian 리듬을 결정 하기 위해 제공 됩니다. 이 메서드는 기간 2 유전자 발기인의 제어에서 정한 luciferase 표현 하는 포유류 세포 기자 플라스 미드를 활용 합니다. 그것은 다른 세포 유형 circadian 리듬에 기관 특정 효과 평가 하 게 적응 될 수 있다.

생체 외에서 유 방 상피 세포에서 Circadian 리듬 특성 분석 결과 생물 발광

유전자 인코딩된 luciferase 유전자 발현의 인기 있는 비-침략 적 기자입니다. 자동된 경도 luciferase 가스 온도 최적화 레코더 (악어) 이미징의 사용에는 다양 한 조건에서 발광 세포에서 경도 녹음 수 있습니다. 여기 우리가 어떻게 악어 circadian 리듬 연구의 맥락에서 사용할 수 있습니다 보여줍니다.

자동된 경도 Luciferase 가스 온도 최적화 레코더 (악어) 이미지를 사용 하 여 발광 기자 들의 유연한 측정

이 새로 개발된 된 형광 기반 기술을 통해 자유롭게 이동 하는 쥐 실시간 및 높은 시간 해상도 suprachiasmatic 핵 (SCN)에서 circadian 시계 유전자의 녹음 방송을의 장기 모니터링 됩니다.

Vivo에서 형광 기자를 사용 하 여 마우스 Suprachiasmatic 핵에서 Circadian 시계 유전자 발현의 모니터링

여기에서, 우리는 뮌헨 ChronoType 설문지, 금 표준 circadian 상 biomarkers 및 actigraphic 측정에 근거를 둔 circadian 표현형 단으로 참가자의 정확한 분류에 따라 성과에 있는 일주 리듬을 조사하는 방법을 제시합니다.

실제 세계에서 인간 Circadian 현상형 및 일주 성능 테스트

여기에서 는 드로소필라를 일주기의 날에 동기화하는 방법을 자세히 설명합니다. 이것은 생물학적 리듬과 연대기생물학을 연구하는 데 필요한 첫 번째, 그리고 가장 중요한 단계입니다.

드로소필라 멜라노가스터의 일레카디아 인교육

우리는 매일 운전하는 활동 리듬을 녹음 절차를...

Circadian 리듬을 연구 및 매개 변수 잠을 전위의 활동 시금 Drosophila</em

마우스 뇌의 특정 영역별 RNA 발현 프로파일링을 위해서는 정밀하고 재현 가능한 조직 수집 전략이 필요합니다. 본 문서에서는 관상면 뇌 절단과 조직 코어러(corer) 보조 미세 절제술을 모두 사용하는 프로토콜을 설명합니다. 결과 샘플에서 얻은 총 RNA의 수율과 품질은 상술한 방법의 유용성을 입증합니다.

총 RNA의 분리 및 다운 스트림 차세대 시퀀싱 및 유전자 발현 프로 파일링에 대한 개별 마우스 뇌 영역의 Microdissection 아닌 레이저 캡처 현미경 접근법

National Institute of Mental Health (NIMH), National Institutes of Health (NIH).  이 연구는 신뢰할 수 있는 주간 생체 위상 이동을 가능하게 하는 화학유전학 및 보라색 빛 기반 전략을 도입합니다.

화학유전학적 및 스펙트럼적 접근법을 이용한 주간 생체 위상 변화 유도

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