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</ol>

<table><tbody><tr><td>15 mL conical tubes</td><td>VWR</td><td>89039-664</td><td>조직 처리 및 원심분리를 위한 무균 튜브</td></tr><tr><td>40 &mu;m cell strainer</td><td>VWR</td><td>732-2757</td><td>단일 세포 현탁액 준비용 여과 장치</td></tr><tr><td>40 &mu;m cell strainer for low volumes</td><td>Bel-Art</td><td>136800040</td><td>단일 세포 현탁액 준비용 여과 장치</td></tr><tr><td>Automated cell counter</td><td>Bio-Rad</td><td>1450102</td><td>세포 계수 및 생존율 결정에 사용되는 장치</td></tr><tr><td>Bovine pituitary extract</td><td>Thermo Scientific</td><td>13028014</td><td>상피 세포 배지의 보충제</td></tr><tr><td>Cell counting slides</td><td>Bio-Rad</td><td>145-0011</td><td>세포 계수용 이중 챔버 슬라이드</td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>벤치톱 원심분리기/s는 500 x g 이상의 속도 기능과 15 mL 및 1.5 mL 튜브를 수용해야 합니다.&nbsp;</td></tr><tr><td>Collagen I</td><td>Millipore Sigma</td><td>08-115</td><td>하이드로젤 형성에 사용되는 세포외 기질 단백질</td></tr><tr><td>Collagenase A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>11088793001</td><td>조직 분리에 사용되는 효소</td></tr><tr><td>Cryovials</td><td>Corning</td><td>976171</td><td>시료의 극저온 저장용 무균 바이알</td></tr><tr><td>Culture vessels (e.g., chamber slides, multiwell plates)</td><td>Corning</td><td>354104 354108 3603</td><td>하이드로젤 침착 및 오르가노이드 배양의 플랫폼.</td></tr><tr><td>Dimethyl sulfoxide</td><td>Millipore Sigma</td><td>317275</td><td>동결 배지에 사용되는 냉동 보호제</td></tr><tr><td>Dispase II</td><td>Roche</td><td>4942078001</td><td>2차 조직 분리에 사용되는 효소</td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Roche</td><td>10104159001</td><td>세포 분리 중에 사용되는 효소.</td></tr><tr><td>Fetal bovine serum</td><td>Gibco</td><td>10437</td><td>세척 및 중화 배지에 사용되는 혈청 보충제</td></tr><tr><td>Fibronectin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>F2006</td><td>세포외 기질 단백질 구성 요소</td></tr><tr><td>GlutaMAX</td><td>Thermo Scientific</td><td>35050061</td><td>상피 세포 배지의 보충제</td></tr><tr><td>Human epidermal growth factor</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E9644</td><td>상피 세포 배지의 보충제</td></tr><tr><td>Hydrocortisone</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H0888</td><td>상피 세포 배지의 보충제</td></tr><tr><td>Hyaluronic acid</td><td>Millipore Sigma</td><td>385908</td><td>하이드로젤 제형용 세포외 기질 구성 요소</td></tr><tr><td>Hyaluronidase</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>H3506</td><td>조직 분리에 사용되는 효소</td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Thermo Scientific</td><td>3598</td><td>조직 배양 배양에 사용되는 장치</td></tr><tr><td>Insulin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I9278</td><td>상피 세포 배지의 보충제</td></tr><tr><td>Laminin</td><td>Gibco</td><td>23017-015</td><td>세포외 기질 단백질 구성 요소</td></tr><tr><td>Mammary epithelial basal medium</td><td>Thermo Scientific</td><td>M171500</td><td>상피 세포의 성장 배지</td></tr><tr><td>Microcentrifuge tubes (1.5 mL)</td><td>Thermo Scientific</td><td>3451</td><td>소량 반응에 사용되는 튜브</td></tr><tr><td>Orbital rotator</td><td>Thermo Scientific</td><td>400110</td><td>효소 분리 중 조직 분산에 사용되는 회전기</td></tr><tr><td>P1000 pipette</td><td>Gilson</td><td>P1000</td><td>최대 1,000 &mu;L의 볼륨을 혼합 및 옮기는 데 사용되는 장치</td></tr><tr><td>Penicillin-streptomycin</td><td>Thermo Scientific</td><td>15140122</td><td>상피 세포 배지의 항생제 보충제</td></tr><tr><td>Phosphate-buffered saline</td><td>Gibco</td><td>20012-027</td><td>세척 및 헹굼에 사용되는 완충 용액</td></tr><tr><td>Precision balance</td><td>Mettler Toledo</td><td>ML303E</td><td>조직 무게 측정에 사용되는 저울</td></tr><tr><td>Serological pipette</td><td>Nunc</td><td>170356N</td><td>비접착성 상피 세포 수확에 사용되는 피펫</td></tr><tr><td>Sodium hydroxide (1 N)</td><td>Fisher Chemical</td><td>SS261</td><td>콜라겐 중화에 사용되는 시약</td></tr><tr><td>Sterile scalpels</td><td>Bard-Parker</td><td>372615</td><td>기계적 조직 분쇄에 사용되는 도구</td></tr><tr><td>Trypan blue solution</td><td>Gibco</td><td>15250061</td><td>세포 생존율 평가에 사용되는 염료</td></tr><tr><td>Trypsin (0.25%)</td><td>Gibco</td><td>25200056</td><td>세포 분리에 사용되는 효소 시약</td></tr><tr><td>Water bath (37 &deg;C)</td><td>VWR</td><td>10LA</td><td>시료의 제어 해동에 사용되는 장치</td></tr></tbody></table>

유방 형태 형성을 재현하는 3차원 인간 유방 오가노이드를 생성하는 정의된 하이드로겔 기반 방법

A Defined Hydrogel-Based Method For Generating Three-Dimensional Human Breast Organoids That Recapitulate Mammary Morphogenesis

The development of physiologically relevant human model systems that recapitulate tissue architecture and cell-state dynamics remains a major challenge in ...

a-defined-hydrogel-based-method-for-generating-three-dimensional

Research

연구

JoVE Journal

Developmental Biology

발생생물학

호르몬 작용을 연구하기에 적합한 인간 유방 상피의 3D 배양 모델을 설명합니다.

인간의 유선 상피의 호르몬 응답 3D 문화 모델

이 원고는 3 차원 (3D)의 균일 한 배열 세포 외 기질에 둘러싸여 정의 형상의 상피 조직을 설계 할 수있는 소프트 리소그래피 기반 기술을 설명합니다. 이 방법은 세포 형태 및 실험 문맥 다양한 의무가 있고 동일한 복제의 높은 처리량의 선별을 허용한다.

세포 외 매트릭스 내에서 임베디드 공학 3 차원 상피 조직

마우스 유 방 땀 샘에서 개발 된 소기관을 조사 하 고 면역 세포와의 상피 특성과 상호 작용을 평가 하는 것을 특징으로 한다. 조사 된 유기 체는 조사 된 정상 조직에서 종양 세포 모집을 유도할 수 있는 세포-세포 상호작용을 더 잘 평가 하기 위해 사용 될 수 있다.

유 방 땀 샘에서 조사 된 유기 체의 성장과 특성화

상피 및 기질 세포로 구성되는 인간 1 차 자궁내막 오르가노이드를 생성하고 네이티브 자궁내막 조직의 특성을 유지하는 프로토콜이 제시된다. 이 프로토콜은 자궁 조직 획득에서 자궁 내막 오르가노이드의 조직학적 처리에 이르는 방법을 설명합니다.

다세포 인간 1 차 자궁 내막 오르가노이드의 생성

유방 동맥은 외부 근상피 및 내부 발광 상피 세포를 포함하는 이중 층 구조입니다. 제시된 것은 차동 트립시니화를 이용하여 오르가노이드를 준비하는 프로토콜이다. 이 효율적인 방법은 연구원이 별도로 유선 양식 및 기능에 있는 그들의 역할에 관하여 질문을 탐구하기 위하여 이 2개의 세포 모형을 조작하는 것을 허용합니다.

차동 시도에 의한 모자이크 유방 오르가노이드 생성

이 프로토콜의 목표는 약물 선별 연구에 사용될 수 있는 3D 유방 내피 상양 모델을 빠르게 만들기 위해 사전 형성된 내피 네트워크에 다세포 스페로이드로서 유방 상피 세포를 직접 바이오프린트하는 것입니다.

내피 네트워크에 3D 다세포 유방 스페로이드의 직접 생체 인쇄

이 프로토콜의 목표는 심장 조직 공학, 약물 스크리닝 및 질병 모델링을 위해 심장 섬유아세포(CFs)와 공동 배양된 줄기 세포 유래 심근세포(CFs)로 구성된 고도로 정렬된 인간 심장 조직의 3차원(3D) 미세유체 모델의 개발을 설명하고 시연하는 것이다.

미세 유체 플랫폼 내에서 3D 조직 된 인간 심장 조직 개발

이 프로토콜은 차등 원심분리를 통해 원발성 정상 및 종양 유방 조직에서 상피 오가노이드를 생성하는 접근 방식에 대해 논의합니다. 또한 3차원 배양 및 포매된 오가노이드의 면역형광 이미징에 대한 지침이 포함되어 있습니다.

계대증 없이 정상 및 종양 유방 조직에서 마우스 및 인간 상피 오가노이드 생성 및 이미징

여기에서는 흉선 상피 세포(TEC) 성숙 및 장기간의 유지 관리, 체외 흉선형성을 지원하는 것을 목표로 하는 3D 피브린 하이드로겔에서 성장한 인간 iPSC 유래 흉선 오가노이드 형성을 위한 프로토콜에 대해 설명합니다.

3차원 피브린 하이드로겔에서 인간 흉선 오가노이드의 형성

암 전이를 연구하기 위해 이세포성 누화를 캡처하는 3D 암 모델이 매우 필요합니다. 우리의 연구는 침입 및 세포 공간 분포를 연구하는 데 사용할 수 있는 골격 및 골격이 없는 환경에서 이종 다세포 기질-상피의 생성을 제시합니다.

상피암 세포의 스캐폴드가 없는 3D 배양에서 이종다세포 기질 세포(Heteromulticellular Stromal Cells in Scaffold-free 3D Cultures of Epithelial Cancer Cells to Drive Invasion)

Tufts University School of Medicine.  이 프로토콜은 통제된 3차원 배양 시스템에서 유선의 형태형성의 주요 특징을 재현하는 인간 유방 오가노이드를 생성하는 정의된 하이드로겔 기반 방법을 설명합니다.

유방 형태 형성을 재현하는 3차원 인간 유방 오가노이드를 생성하는 정의된 하이드로겔 기반 방법

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