Name: Xenopus laevis 여성의 난자를 구하기 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-08-20T20:12:00.000+00:00
Duration: 4 min 47 s
Description: 배우세요 Xenopus laevis 여성 개구리에서 난자를 채취하고 젤리층을 제거하는 방법을. 인간 융모성 생식선 자극 호르몬을 이용한 난자 유도와 품질 선별 기술을 익혀 세포 생물학 및 발달 생물학 연구에 활용하세요.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

이 실험 방법에 대한 전체 텍스트 프로토콜에서 사용할 수 있습니다 <a href="http://mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb1110/current/abstract?hd=author,Powers]">셀 생물학의 현재 프로토콜</a> .

저자들은 공개할 사항이 없습니다.

xenopus laevis 여성의 난자를 구하기

Obtaining Eggs from Xenopus laevis Females

Xenopus의 달걀은 그대로, lysed, 및 / 또는 fractionated이 실험의 다양한 유용합니다 laevis. 이 프로토콜은, 달걀 누워을​​ 유도 달걀을 수집하고 dejelly, 및 손상된 계란을 제거하는 달걀을 정렬하는 방법을 보여줍니다.

Xenopus laevis 여성의 난자를 구하기

손상되지 않았거나, 용해되었거나, 그리고/또는 분획된 Xenopus laevis의 난자는 광범위한 실험에 유용합니다. 본 프로토콜에서는 산란을 유도하는 방법을 설명하며, ...

Xenopus laevis 난자 추출물은 핵 조립 및 핵 단백질 수송과 같은 세포 내 사건의 인비트로(in vitro) 재구성을 위한 세포질 및 세포소기관 물질의 유용한 공급원입니다. 물론 난자 추출물을 사용하기 전에는 먼저 암컷 개구리로부터 난자를 얻어야 합니다. 안녕하세요, 저는 조지아주 애틀랜타에 위치한 에모리 대학교 세포생물학과의 Maureen Power 박사님 연구실 소속 대학원생인 Marie Cross입니다.오늘은 성숙한 *Xenopus laevis* 암컷으로부터 젤리 형태의 알을 얻고 분리하는 방법을 보여드리겠습니다. 이 절차에는 다음 단계가 포함됩니다: 임신한 암컷의 산란 유도 준비, 인간 함께성선 자극 호르몬(hCG)을 이용한 산란 유도, 그리고 불량 알이나 세포의 선별입니다. 이제 시작하겠습니다.알을 생성하기 위해, 성숙한 암컷 개구리에게 먼저 임신마 혈청 성선자극호르몬을 투여하여 프라이밍을 수행합니다. 프라이밍 절차를 시작하려면, 개구리를 수용할 100 mM sodium chloride가 포함된 수조를 준비하십시오. 주사 후, 프라이밍된 개구리는 리터당 약 한 마리의 밀도로 유지해야 합니다.개구리를 18°C에서 사육함으로써 최적의 산란 상태를 유지합니다. 1ml 시린지에 27G 바늘을 장착하여, 200 units/ml 농도의 Pregnant mare serum gonadotropin 0.5ml를 개구리의 등쪽 림프낭에 피하 주사합니다.프라임 개구리들을 100 mM sodium chloride가 포함된 수조로 옮깁니다. 2~3일 후, 100 units/mL 농도의 Human chorionic gonadotropin 0.5 µL를 개구리의 등쪽 림프낭에 다시 피하 주사하여 산란을 유도합니다.주사 후, 각 개구리를 100 mM 염화나트륨 5L 용액에 넣습니다. 개구리마다 알의 품질이 다르므로 각 개구리를 개별 용기에 넣는 것이 좋습니다. 인간 융모성 성선 자극 호르몬(hCG) 주사 후 약 16~22시간이 지나면, 개구리를 깨끗한 물 탱크로 옮기고 알을 비커에 붓습니다.주사 부위에 감염 징후가 있는지 한두 일 동안 개구리를 관찰하는 것이 권장됩니다. 이 단계에서 각 알은 투명한 젤리 코트로 둘러싸여 있어 알들이 서로 닿는 것을 방지합니다. 젤리 알을 제거하려면, 알을 한 번 헹군 후 2%L cysteine pH 8 용액으로 씻어내고, 개구리당 2%L cysteine 용액 100 bills가 담긴 용기에서 약 5분 동안 계속 배양합니다. 실온에서 5분 후부터 주기적으로 알을 부드럽게 흔들어 줍니다.시스테인 용액을 제브라피쉬 알에서 따라내고 0.25 x modified ringer 용액으로 3회 세척합니다. 이물질을 제거하기 위해 해부 현미경 하에서 100mm 유리 페트리 접시에 알을 붓습니다. 파스퇴르 피펫을 사용하여 페트리 접시에서 상태가 좋지 않은 알을 제거합니다.성숙한 xip 난자는 상단부가 어둡게 색소 침착되어 있고 하단부는 밝은 색을 띱니다. 성숙한 난자의 어두운 색소 침착 반구 중심부에는 난모세포의 성숙을 나타내는 흰색의 핀포인트 크기 점이 보여야 합니다. 좋은 난자는 색소 침착이 고르게 형성된 난자입니다.이 흰색 점이 없는 것은 난모세포이므로 제거해야 합니다. 흰색으로 확대되었거나 색소 침착이 균일하지 않은 알 또한 제거해야 합니다. 상태가 특히 좋지 않은 알은 반구 사이의 경계가 완전히 가려진 흰색의 부푼 공 모양으로 보입니다. 알 용해 버퍼를 붓고 다시 조심스럽게 따라내는 과정을 2~3회 반복하여 선별된 알을 세척하며, 이때 알이 함께 쏟아지지 않도록 주의합니다.이제 난자를 용해하여 추출물을 준비할 수 있습니다. 지금까지 성숙한 Xenopus lavis 암컷에서 난자를 얻고 젤리층을 제거하는 방법을 보여드렸습니다. 조추출물을 준비하는 방법과 분획된 난자 추출물을 사용하여 인비트로(in vitro) 핵 조립을 재구성하는 방법을 다룬 다른 두 영상도 꼭 확인하시기 바랍니다.이상입니다. 시청해 주셔서 감사드리며, 여러분의 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

obtaining-eggs-from-xenopus-laevis-females

Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

의 수정 Xenopus의 oocytes 호스트 전송 방법을 사용하여

Xenopus 배아 상피 조직은 상피 morphogenesis 동안 극성 개발 및 형태의 변화와 같은 세포 행위를 연구하는 이상적인 모델 시스템입니다. 고정 샘플 전통 조직학 점점 라이브 셀 이미징 공촛점에 의해 보완되고있다. 여기 개구리 조직을 분리 및 라이브 세포 공촛점 현미경을 사용하여 라이브 상피 세포 및 cytoskeleton을 시각화하는 방법을 보여줍니다.

라이브 셀 이미징 및 배아 상피 세포의 정량 분석 Xenopus laevis</em

Xenopus 계란 추출물은 DNA 손상 검사 점을 조사 할 수있는 유용한 모델 시스템입니다. 이 프로토콜은 Xenopus의 알 추출물과 DNA 손상 검사 점 유도 시약의 준비입니다. 이 기술은 DNA 손상 검사 점 신호의 연구에서 DNA 손상 방식의 다양한에 적용 할 수 있습니다.

사용하여 DNA의 손상 세키의 연구<em&gt; Xenopus</em&gt; 달걀 압축을 풉니 다

우리는 살려서 살짝 익히고의 컬렉션을...

생산<em&gt; Xenopus의 tropicalis</em&gt; 달걀은 미세 소관 관련 RNA를 식별하기 위해 추출

방법은 Xenopus의 계란 추출물 및 단백질 분해의 저분자 변조기에 대한 고 처리량 스크리닝을 위해 그 적응 방사성 표지와 루시퍼 라제 융합 단백질을 이용하여 단백질 분해 분석에 대해 설명한다.

β-catenin의 저하의 재구성<em&gt; Xenopus의</em&gt; 계란 추출

Xenopus laevis 미성숙 난모세포를 조작하는 방법, 난자에서 난자로의 체외 성숙 및 세포질 내 정자 주입을 설명합니다. 이 프로토콜은 일부 모계 단백질의 분해와 수정 시 관심 유전자의 과발현을 허용하므로 초기 배아 발달에서 특정 요인의 역할을 연구하는 데 가치가 있습니다.

조작 및<em&gt; 체외</em의&gt; 성숙<em&gt; 아프리카 발톱 개구리 laevis의</em세포질 내 정자 주입에 이어&gt; 난 모세포, 배아 발달을 연구하는

단백질 합성 조절은 주로 번역 시작 단계에서 발생하며, 결핍은 다양한 장애와 관련이 있습니다. 이들의 병인을 더 잘 이해하기 위해, 우리는 여기에서 번역 시작 인자 eIF4G1의 돌연변이가 있는 상태에서 mos 전사체의 번역을 평가하는 Xenopus laevis 난모세포를 사용하는 프로토콜에 대해 설명했습니다.

Xenopus의 번역 손상을 식별 할 수있는 모델로 laevis의

세포 및 세포 내 스케일링의 메커니즘은 여전히 파악하기 어렵습니다. Xenopus 배아 추출물의 사용은 세포 기관 크기 조절의 메커니즘을 밝히기 위해 점점 더 보편화되고 있습니다. 이 방법은 배아 추출물 준비와 핵 크기 조절 메커니즘을 확인할 수 있는 새로운 핵 스케일링 분석을 설명합니다.

사용하여 셀 - 무료 분석<em&gt; Xenopus의의 laevis의</em&gt; 배아 핵 크기 규제의 메커니즘을 연구하기 위해 추출

이 프로토콜은 vasculature를 시각화하고 Xenopus tropicalis 의 복잡성을 정량화하기위한 형광 기반의 방법을 보여 줍니다 . 혈관은 생체 내에서 심혈관 질환 발달을 연구하기 위해 유전 적 및 / 또는 약리학 적 조작 후 배아의 박동 심장에 형광 염료를 주입 한 후 수분 내에 영상화 될 수있다.

의 배아 혈관 신생에 대한 시각화 및 정량 분석<em&gt; Xenopus tropicalis</em

우리는 Xenopus laevis 알에서 희석되지 않은 세포질 추출물의 제조 및 라이브 이미징 방법을 설명합니다.

제노푸스 라에비스 동적 세포질 조직을 시각화하기 위한 계란 추출물 준비 및 라이브 이미징 방법

성장 인자 ß 를 변형할 때 가족 전구체 단백질은 제노푸스 라예비스 배아에서 ectopically 발현될 때, 그들은 분화하고, 갈라지고, 초기 가스트루라 단계로 늦은 블라술라에서 시작되는 blastocoele로 분비됩니다. 우리는 면역 blot 분석을 위한 blastocoele 캐비티에서 분열 제품을 심는 방법을 설명합니다.

제노푸스 라레비스 배아의 블라스코클로로 분비된 성장 인자 변형 분석 가족 분열 제품

배우세요 Xenopus laevis 여성 개구리에서 난자를 채취하고 젤리층을 제거하는 방법을. 인간 융모성 생식선 자극 호르몬을 이용한 난자 유도와 품질 선별 기술을 익혀 세포 생물학 및 발달 생물학 연구에 활용하세요.

Xenopus laevis 여성의 난자를 구하기

더 많은 동영상 탐색