Name: 성인 마우스의 후각 행동 테스트 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-01-28T00:00:00.000+00:00
Duration: 9 min
Description: 배우세요 성인 마우스의 후각 민감도 및 선호도를 평가하는 행동 테스트 방법을. 필터 페이퍼에 농도별 냄새 자극을 노출하고 탐색 시간을 기록하여 신경과학 및 행동생물학 연구에 활용할 수 있습니다.

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기금 :이 작품은 스튜어트 HQ &amp; 빅토리아 퀀 Predoctoral 원정대 (RMW), NIH 파이 오니아 수상 (RAS)에 의해 지원되었다

일반 건강 시험 일반 건강 시험보다 포괄적인 치료가 재클린 크롤리의 훌륭한 행동 phenotyping 리소스에서 찾을 수 있습니다, 어떻게 내 마우스 잘못 된거 아냐? 1. 우리는 먼저 대상의 일반적인 건강을 평가하기 위해 수정된 관측 테스트 배터리를 사용합니다. 배터리는 신속하게 추가 테스트를 위해 적합합니다 그 과목을 식별하는 사무엘 어윈의 포괄적인 평가 절차 2 항목을 포함합니다. 간단히 수정 배터리가 물리적으로 비정상 아르 동물을 식별합니다 (예 : 심한 이하 또는 비만인 제대로 손질, dyspneic) 또는 전시 비정상적인 자세, 운동 또는 행동. 이 모든 질병의 발현 수 있습니다. 마찬가지로 건강하지 못한 과목을 식별하는 초기 평가 적합합니다. 동물 일반 건강 검사하는 동안뿐만 아니라 차후 테스트를하는 동안 편안하게 모두 사용됩니다 또한 중요하다. 이 검사는 어떤 잠재적으로 고통스런 절차를 포함하지 않는 아무 마취 또는 진통제를 사용하지 않습니다. 후각 민감도 테스트 이 테스트는 쥐를 두 그룹 (예 : 야생 동물의 종류와 돌연변 그룹) 사이의 후각 감성의 차이를 감지하도록 설계되었습니다. 이 테스트에서는 향기의 여러 dilutions가 만들어집니다. 나이브 동물 그러면 기록이 향기와 총 탐험 시간 (3 분 이내)의 단일 희석을 조사. 향기 여러 dilutions는 다른, 순진한 주제에 대한 테스트 및 총 탐험 시간이 생쥐의 각 그룹에 대해 선량 반응 곡선을 생성하는 데 사용됩니다. 두 연구자는 주제 genotypes 및 / 또는 조건 한 맹인과 테스트에 참여해야합니다. 기본 연구 <ol><li> 네 깨끗한 새장 (인치 8 H × 10 W X 18 L), 침구 않고를 구합니다. biosafety 캐비닛에있는 네 개의 버팀대 줄을. </li><li> 불투명 필터 용지를 사용하여 각 분야 사이의 파티션을 설정합니다. 마지막 파티션에 걸쳐 검은 포스터 보드를 배치 등 그 검은 측면 라인 케이지의 측면과 하단. 빛이 무대 조명 수 있도록 플렉시 글라스의 명확한 조각과 함께 경기장 상단의 커버. (A) <img src="/files/ftp_upload/old/949_2009_1_14_8/figure1new.png" alt="그림 1" /> (B) <img src="/files/ftp_upload/old/949_2009_1_14_9/image15.png" alt="그림 1.5" /> 그림 1. 경기장 셋업. (A) 적절히 draped, 빈 경기장 (B) 아레나 제목과 향수 필터 종이. </li> <li> 과목 habituating 시작합니다. 요법 이니에 대한 첫 번째 새장에서 처음으로 제목을 넣으십시오. 십오분 후, 두 번째 새장을 가장 먼저 주제를 이동합니다. Quatricide의 결핵 최초의 새장을 청소하십시오. 다음, 먼저 청소 새장에서 두번째로 제목을 넣으십시오. 후속 과목이 과정을 계속합니다. 궁극적으로, 각 과목은 사전 테스트하는 요법 이니, 또 15 분 아레나 (네번째이자 마지막 케이지)에 배치되기 전에 세 새장에서 길들여지지하여야한다. </li></ol> 블라인드 연구원 <ol><li> 향기 샘플 필터 종이의 2 인치 사각형으로 2 인치의 적절한 숫자를 확인합니다. </li><li> 미리 선택된 향기를 사용하여 적절하게 그것을 희석. 이러한 땅콩 버터와 같은 소수성 시료의 경우, 용매로 석유를 사용하여, 모든 다른, 증류수를 사용합니다. 와동. </li><li> 전체 케이지 최종 초점에 이러한 biosafety 캐비닛의 맨 끝에 디지털 비디오 녹화 장치를 설정합니다. 매개 변수가 적절한 수 있도록하기 위해 예비 비디오를 가져가라. </li><li> dilutions가, 테스트 시련의 순서를 무작위로 돌보는 것입니다 순서를 기록합니다. </li><li> 기록 대상의 쓰레기 및 식별 번호. </li><li> 일단 제목은 첫 번째 재판에 대한 준비를 시작 경기장에서 15 분 동안 길들여되었습니다. 필터 종이 광장에 그것을 pipetting 전에 원뿔 관에서 처음으로 희석을 피펫 아래. 필터 종이 표면은 최적의 ~ 85 % 적용 (솔루션의 약 0.50 MLS)해야합니다. 필터 용지가 지나치게 포화되지 않는지 확인 kimwipe을 사용합니다. </li><li> 비디오 녹화를 시작합니다. </li><li> 동물의 현재 위치의 반대편 끝에있는 새장에서 필터 종이 사각형을 놓습니다. </li><li> 타이밍을 시작합니다. </li><li> 삼분 후, 녹음을 중지하고 희석 냄새를 제거합니다. </li><li> 한 향기 (예 : 계피) 테스트되어야하는 경우, 경기장에서 첫 번째 실험 대상을 제거합니다. 반복 적절하게 각 과목에 대한 냄새를 diluting, 각 동물에 대해 6-11 단계를 반복합니다. 하나 이상의 향기가 테스트되어야하는 경우, 그러나, 무대에서 테스트 주제를 제거하지 마십시오. 대신 타이밍을 시작합니다. </li><li> 적절하게 위에 나열된 것과 같은 방법을 사용하여 다음 냄새를 희석. </li><li> 일분 후, 비디오 녹화를 시작합니다. 동물의 현재 positio의 반대 끝에있는 새장에있는 다음 향기의 희석과 필터 종이 스퀘어 플레이스N. </li><li> 반복 각 시험에 대한 비디오 파일 번호를 지적, 각 향기에 대해 6-13 단계를 반복합니다. </li><li> 반복 각 과목에 대해 6-14 단계를 반복합니다. <img src="/files/ftp_upload/old/949_2009_1_14_10/image2new.png" alt="그림 2" /> 그림 2. 후각 감도 테스트 세션에 대한 대표적인 결과가.하거나 제어 그룹 (그룹) 또는 실험 그룹 (그룹 B)의 각각의 마우스는 계피의 다섯 가지 dilutions 한 삼분의 세션에 대해 필터를 종이에 추출 중 하나에 노출되었다. 총 시간은 거름종이가 평가되었다 탐험 보냈다. 그룹의 생쥐는 그룹 B에보다 큰 후각 감성을 가지고 </li></ol> 후각 환경 설정 테스트 이 테스트는 즉 특정 검출 결함, 매력이나 aversive 냄새를 감지하는 능력을 식별하도록 설계되었습니다. 다음 절차는 고바의 프로토콜, K., 동부 표준시 al.3에서 후한 빌려. 다시 두 연구자는 주제 genotypes 및 / 또는 조건 한 맹인과 테스트에 참여해야합니다. 총 탐험 시간은 다시 다양한 냄새에 대한 (비디오 감상시) 기록됩니다. 물보다 총 탐험 배 이상있는 사람 냄새가 적은 물보다 시간이있는 사람은 &quot;aversive&quot;칭했다하는 동안 &quot;매력&quot;로 지정되어 있습니다. 연구자는 다음 같은 냄새가 다른 시험 과목에 대해 &quot;매력적인&quot;또는 &quot;aversive&quot;여부를 고려합니다. 기본 연구자에 대한 강한 민감도 테스트 섹션에서 1-3 단계를 따르십시오. 블라인드 연구원 후각 환경 설정 테스트를위한 절차는 2 단계와 4 약간의 수정과 동일합니다. 다음과 같이 변경과 함께 맹인 연구자에 대한 강한 민감도 테스트 섹션의 단계 1-15을 따르시기 바랍니다 : 2 단계 들어, 미리 선택된 향기를 (매력적이고 aversive 모두 향기의 조합)를 사용하여, 각 중 적절하게 희석 솔루션을 원뿔 튜브. 이러한 땅콩 버터와 같은 소수성 시료의 경우, 용매로 석유를 사용하여, 모든 다른, 증류수를 사용합니다. 와동. 4 단계의 경우, 오히려 테스트로 희석을 기록보다 시련의 순서를 randomizing, 테스트하게 될 다양한 향기의 순서를 기록합니다. 이 테스트는 즉 특정 검출 결함, 매력이나 aversive 냄새를 감지하는 능력을 식별하도록 설계되었습니다. 다음 절차는 고바 K. 외의 프로토콜에서 후한 빌려. 3. 다시 두 연구자는 주제 genotypes 및 / 또는 조건 한 맹인과 테스트에 참여해야합니다. 총 탐험 시간은 다시 다양한 냄새에 대한 (비디오 감상시) 기록됩니다. 이하 물보다 시대에 사람이 &quot;aversive&quot;칭했다하는 동안 물보다 총 탐험 배 이상있는 사람 냄새는 &quot;매력&quot;로 지정되어 있습니다. 연구자는 다음 같은 냄새가 다른 시험 과목에 대해 &quot;매력적인&quot;또는 &quot;aversive&quot;여부를 고려합니다. 기본 연구자에 대한 강한 민감도 테스트 섹션에서 1-3 단계를 따르십시오. 블라인드 연구원 후각 환경 설정 테스트를위한 절차는 2 단계, 4, 13 약간의 수정과 동일합니다. 다음과 같이 변경과 함께 맹인 연구자에 대한 강한 민감도 테스트 섹션의 단계 1-15을 따르시기 바랍니다 : 2 단계 들어, 미리 선택된 향기를 (매력적이고 aversive 모두 향기의 조합)를 사용하여, 각 중 적절하게 희석 솔루션을 원뿔 튜브. 이러한 땅콩 버터와 같은 소수성 시료의 경우, 용매로 석유를 사용하여, 모든 다른, 증류수를 사용합니다. 와동. 4 단계의 경우, 오히려 테스트로 희석을 기록보다는, 각 시험의 순서를 randomizing, 테스트하게 될 다양한 향기의 순서를 기록합니다. 단계 13의 동물의 현재 위치의 반대편 끝에있는 케이지의 다음 향기와 필터 용지 사각형을 놓습니다. <img src="/files/ftp_upload/old/949_2009_1_14_11/image3new.png" alt="그림 3" /> 그림 3. 후각 환경 설정 테스트 세션에 대한 대표적인 결과가. 각각의 마우스는 하나, 세 분 세션에 대해 필터를 종이에 서로 다른 향기의 각에 노출되었다. 총 시간은 거름종이가 평가되었다 탐험 보냈다. 땅콩 버터와 바닐라 향기 매력입니다 (탐험 시간 향기&gt; 탐험 시간 물)과 2 Methylbutyric 산성은 (탐험 시간 향기 &lt;탐험 시간 물) aversive입니다. 강한 시험 점수 후각 감도와 환경 모든 동영상을 획득하면, 그것은 총 시간 각 희석 / 냄새를 탐험 지출을 분석하는 것이 필요합니다. 맹인 연구자들이 일관성에 대한 모든 동영상을 분석했습니다. <ol><li> VID 미리보기이오 다음 지적 : 마우스 필터 용지를 조사 및 D) 3 분 경과되었을 때) 거름종이가 경기장에 배치되었을 때, B) 마우스 필터 종이, C를 접근 언제 ()에서 때 필터 종이)는 경기장에 배치했다. 마우스의 행동에 초점을 때 알면 쉽게 정확 총 시간 검토한 탐험 지출 점수를 수 있습니다. </li><li> 비디오를 검토합니다. 마우스가 처음 여과지 (지연)을 조사 시간을 기록해 둡니다. </li><li> 모든 조사는 경기장에서 필터 용지를 삽입 후 3 분 이내에 스톱워치, 시간을 사용합니다. 조사 시간은 마우스의 나레스은 여과지에서 &lt;1mm되는 시간으로 정의됩니다. 이것은 마우스 필터 종이 가까이에있는 시간 중 하나를 포함하지 않는 것이 중요하지만, 적극적으로 그것을 조사하지 않습니다. 전체 탐험 시간에 종이에 앉아있는 논문이나 관찰을 씹는 및 핥아의 복싱 경기를 포함시키지 마십시오. 그것은 정확하게 후각 행동을 분석하여 이러한 규칙에 밀접하고 지속적으로 준수하는 것이 필요합니다. </li><li> 기록 지연 시간은 총 시간은 필터 종이 및 비디오 파일 번호를 조사 보냈다. </li></ol>

<ol><li>Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What%26rsquo%3Bs+Wrong+with+my+Mouse%3F+Behavioral+Phenotyping+of+Transgenic+and+Knockout+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">What&rsquo;s Wrong with my Mouse? Behavioral Phenotyping of Transgenic and Knockout Mice.</a> , John Wiley and Sons. 42-60 (2007).</li>
<li>Irwin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+observational+assessment%3A+Ia.+A+systematic%2C+quantitative+procedure+for+assessing+the+behavioral+and+physiologic+state+of+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacologia%22%5BJournal%5D)">Comprehensive observational assessment: Ia. A systematic, quantitative procedure for assessing the behavioral and physiologic state of the mouse.</a> Psychopharmacologia. 13, 222-257 (1968).</li>
<li>Kobayakawa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innate+versus+learned+odour+processing+in+the+mouse+olfactory+bulb%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb.</a> Nature. 450, 503-508 (2007).</li>
</ol>

상기 테스트는 기본적인 후각 기능의 빠르고 안정적​​인 평가를 위해 수 있습니다. 그것이 신뢰성 테스트에 대한 과목의 적절한 선택과 준비가 필요하다는 그러나, 간과되지 않습니다. 아프하거나 마비 아르 동물은 종종 일관성 시험 과목입니다. 또한, 시험 과목 요법 이니,이 핵심입니다. 우리는 요법 이니 과정에서 여러 케이지의 사용은 동물 실험자들이 취급하고 환경 변화와 함께 편안하게 될 수 것으로 나타났습니다. 또한 요법 이니에 대한 지적보다 짧은 시간이 불안을 줄이기 위해 충분하지 않은 것으로 나타났습니다. 불안 동물은 종종 예측 시험 과목이며 진정한 차이점을 흐릿하게 수 있습니다. 생쥐의 실제 테스트에서, 그것은뿐만 아니라 데이터를 수집하면 일치뿐만 아니라, 주제 &#39;행동을 분석하는 것이 중요합니다. 우리는 실험 대상의 코가 전체 탐험 시간의 일부로 여과지에서 &lt;1mm 때 그것이 유용 해당 시간을 계산하는 것으로 확인되었습니다. 또한, 필터 종이를 물고 또는 씹는 ...

<table><tbody><tr><td>2-Methylbutyric acid</td><td>시약</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>W269506</td><td>&lt;b&gt;사용 농도:&lt;/b&gt;9.16 x 10&lt;sup&gt;-1&lt;/sup&gt; &amp;#8211; 10&lt;sup&gt;-8&lt;/sup&gt; M (H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 내))</td></tr><tr><td>Pure Vanilla Extract</td><td>시약</td><td>McCormick &amp;amp; Co.</td><td>n/a</td><td>&lt;b&gt;사용 농도:&lt;/b&gt;10&lt;sup&gt;-1&lt;/sup&gt; &amp;#8211; 10&lt;sup&gt;-5&lt;/sup&gt; 희석 (H20 내)</td></tr><tr><td>Peanut Butter (Skippy, Extra Crunchy)</td><td>시약</td><td>Unilever</td><td>n/a</td><td>&lt;b&gt;사용 농도:&lt;/b&gt;10% (w/v), 미네랄 오일 내</td></tr><tr><td>Cinnamon Extract</td><td>시약</td><td>McCormick &amp;amp; Co.</td><td>n/a</td><td>&lt;b&gt;사용 농도:&lt;/b&gt;10&lt;sup&gt;-1&lt;/sup&gt; &amp;#8211; 10&lt;sup&gt;-5&lt;/sup&gt; 희석 (H&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;O 내)</td></tr><tr><td>Mineral Oil, light</td><td>시약</td><td>Fisher Scientific</td><td>O121-1</td><td>&lt;b&gt;사용 농도:&lt;/b&gt;해당 없음</td></tr></tbody></table>

성인 마우스의 후각 행동 테스트

Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse

쥐 후각 시스템 때문에 틀에 박힌, 아직 접근이 회로의 시스템 생물학, 부분, 연구 과학자, 이익을 증가입니다. 또한, 유기체의 일생 동안 새로운 뉴런을 생성하기 위해이 지역의 독특한 능력은 모두 발달 및 재생 생물학을위한 매력적인 시스템이 있습니다. 이러한 관심은 후각 기능의 빠르고, 아직 신뢰성 평가를위한 수단을 필요로. 후각 능력의 많은 시험은 특별히 쥐를위한 복잡한 변수 또는하지 않습니다. 또한, 일부 테스트는 메모리 결손뿐만 아니라 후각 능력, 혼란함을 주죠 얻은 결과에 결함 민감합니다. 여기, 우리는 후각 감성과 선호도에 결함을 식별하기위한 테스트의 간단한 배터리를 설명합니다. 첫째, 초기 일반적인 건강 평가 추가 테스트에 적합한 동물의 식별을 허용합니다. 둘째, 생쥐가 임계값 차이가 있는지 확인할 냄새 다양한 dilutions에 노출되어 있습니다. 셋째, 생쥐는 후각 선호의 평가를 허용 매력적이고 aversive 모두 각종 냄새, 함께 제공됩니다. 이 간단한 연구는 다양한 자원과 전문 지식의 실험실에 대한 접근 후각 행동의 초기 특성을 만들어야합니다.

쥐 후각 시스템의 기본, 아직 고유의 특성은 생물학 자 사이의 증가 공부를 주도했습니다. 그 함수의 비교적 간단 평가 그때도 필요합니다. 여기 마우스 후각 감성과 선호도의 특성에 대한 민감한 테스트를 설명합니다.

설치류의 후각 시스템은 정형화되어 있으면서도 접근성이 뛰어나기 때문에, 부분적으로 시스템 생물학 분야에서 연구되며 과학자들의 관심을 점점 더 많이 받고 있습니다...

Rodin 후각 체계 또는 후각은 점점 더 인기 있는 연구 분야가 되었습니다. 후각 민감도를 테스트하기 위해, 마우스를 베딩이 없는 케이지에서 순화시킨 후, 농도가 점차 증가하는 취기 물질이 묻은 여과지 조각에 노출시킵니다. 그 후 마우스가 여과지를 탐색하는 데 소비하는 시간을 기록합니다.후각 선호도 테스트는 정확히 동일한 방식으로 수행됩니다. 다만, odorant의 농도를 높이는 대신 생쥐가 서로 다른 odorant를 탐색하는 데 소비하는 시간을 기록합니다. 안녕하세요, 저는 하버드 의과대학 신경생물학과의 Dr.Rosalyn Siegel 연구실 소속 Rochelle Witt입니다.안녕하세요, Siegel 연구소의 Jennifer Deno입니다. 오늘은 후각 테스트를 위한 두 가지 절차를 보여드리겠습니다. 저희 연구실에서는 후각 민감도와 후각 선호도를 연구하기 위해 이 절차들을 사용합니다.이제 시작해 보겠습니다. 후각 민감도 테스트 절차를 시작하려면, 베딩이 없는 깨끗한 케이지 4개를 준비하십시오. 케이지의 크기는 높이 8인치, 너비 10인치, 길이 18인치여야 합니다.생물안전작업대 내에 네 개의 케이지를 일렬로 배치합니다. 그다음, 불투명 여과지를 사용하여 각 아레나 사이에 칸막이를 설치합니다. 이어서 마지막 칸막이에 검은색 포스터 보드를 배치하여 케이지의 측면과 바닥을 덮도록 합니다.케이지 상단을 투명한 플렉시글라스로 덮어 아레나에 빛이 들어오게 합니다. 이제 피험자들의 순화 과정을 시작하십시오. 첫 번째 피험자를 첫 번째 케이지에 넣습니다.15분 후, 첫 번째 피험자를 두 번째 케이지로 옮깁니다. Quatra side tb로 첫 번째 케이지를 세척합니다. 그다음 두 번째 피험자를 세척된 첫 번째 케이지에 넣습니다.테스트 전까지 이후의 실험 대상들에 대해 이 과정을 반복하십시오. 실험 대상 중 한 마리를 네 번째 케이지에 넣고 15분 동안 추가로 순응시킵니다. 최종적으로, 처음 세 개의 케이지 각각에 실험 대상이 한 마리씩 순응되어 있어야 합니다.이제 향기 샘플을 준비할 준비가 되었습니다. 향기 샘플은 피험자, 유전자형 또는 조건에 대해 알지 못하는 다른 연구자가 준비해야 합니다. 2인치 x 2인치 크기의 여과지 사각형을 적절한 수만큼 만들어 샘플 준비를 시작하십시오.그 다음, 원추형 튜브에 미리 선택한 향료를 적절히 희석합니다. 마우스의 배경(background)에 따라 대조군과 실험군을 효과적으로 구별하기 위해 서로 다른 향료 희석 비율이 필요할 수 있음을 유의하십시오. 이러한 관찰 결과에 따라, 미경험 마우스를 대상으로 실험 테스트를 진행하기 전에 대조군과 유사한 피험자들을 통해 적절한 향료 희석 배율을 경험적으로 도출하는 것이 유용함을 확인하였습니다. 피넛 버터와 같은 소수성 샘플의 경우 오일을 용매로 사용하고, 그 외 모든 샘플에는 다른 용매를 사용하십시오.증류수 보텍스를 사용하여 희석액이 적절히 혼합되었는지 확인하십시오. 다음으로, 케이지 끝부분 전체가 초점에 들어오도록 흄 후드 끝단에 디지털 비디오 녹화 장치를 설치하십시오. 카메라 설정이 적절한지 확인하기 위해 예비 영상을 촬영하십시오.실험 노트에 희석액을 테스트할 순서를 기록하되, 각 시행마다 순서를 무작위로 정하도록 주의하십시오. 또한 피험체의 리터(litter) 번호와 식별 번호를 기록하십시오. 피험체가 아레나에서 15분 동안 적응을 마치면, 첫 번째 시행을 위한 준비를 시작하십시오.원추형 튜브에서 첫 번째 희석액을 피펫팅하여 위아래로 섞어준 다음, 이를 필터 페이퍼 정사각형 위에 피펫팅합니다. 필터 페이퍼 표면의 약 85%가 덮이는 것이 가장 이상적입니다. 킴와이프(Kim wipe)를 사용하여 필터 페이퍼가 과하게 포화되지 않도록 합니다.향기가 밴 여과지가 준비되었으므로, 첫 번째 후각 민감도 시험을 수행할 준비가 되었습니다. 시험을 시작하려면 비디오 녹화를 시작하십시오. 그런 다음 향기가 밴 여과지를 동물의 현재 위치 반대편 케이지 내에 배치하십시오.타이머를 시작하십시오. 3분 후, 기록을 중단하고 향료를 제거합니다. 다음으로, 타이머를 다시 시작하고 두 번째 향료 샘플을 준비하십시오.1분 후, 비디오 녹화를 시작하십시오. 이전과 마찬가지로, 동물의 현재 위치와 반대편 케이지 끝에 향기 샘플을 놓습니다. 각 향 농도 희석액과 각 피실험체에 대해 이 절차를 반복하며, 각 시행별 비디오 파일 번호를 기록하십시오.후각 민감도 테스트를 보여드렸으므로, 이제 후각 선호도 테스트를 진행하십시오. 후각 선호도 테스트의 경우, 다음의 두 가지 약간의 수정 사항을 제외하고 후각 민감도 테스트에서 설명한 것과 동일한 절차를 따르십시오. 첫째,하나의 미리 선정된 향에 대해 여러 희석액을 준비하는 대신, 유인 향과 혐오 향을 모두 준비하십시오. 둘째, 테스트할 희석 농도를 기록하는 대신, 각 시행에서 순서를 무작위화하여 테스트할 변수의 순서를 기록하십시오. 피험자의 습관화, 블라인드 연구자의 참여, 여과지에 향을 도포하는 과정, 그리고 각 시행의 시간 측정 비디오 녹화를 포함한 절차의 다른 모든 단계는 후각 테스트와 동일합니다.후각 선호도 테스트가 완료되면 후각 테스트 점수 산정을 진행하십시오. 모든 후각 민감도 및 선호도 영상을 확보한 후, 일관성을 위해 피험자가 각 희석액이나 향을 탐색하는 데 소비한 총 시간을 측정하십시오. 분석의 객관성을 위해 블라인드 연구자가 영상을 분석하여 이 작업을 수행하도록 하십시오.먼저 비디오를 미리 보고 다음 사항들을 기록해 두는 것이 도움이 됩니다. 거름종이를 아레나에 배치한 시점, 마우스가 거름종이에 접근하는 시점, 마우스가 거름종이를 탐색하는 시점, 그리고 거름종이를 처음 배치한 때로부터 3분이 경과한 시점을 확인하십시오. 마우스의 행동에 집중해야 할 시점을 미리 파악하면, 이후 검토 단계에서 총 탐색 시간을 더 정확하게 측정할 수 있습니다. 이제 비디오 전체를 다시 검토하십시오. 스톱워치를 사용하여 거름종이를 아레나에 배치한 후 3분 이내에 이루어진 모든 탐색 시간을 측정하십시오.탐색 시간은 마우스의 코가 여과지로부터 1mm 이내에 있는 모든 시간으로 정의하며, 마우스가 여과지에 근접해 있더라도 능동적으로 탐색하고 있지 않은 시간은 포함하지 않는 것이 중요합니다. 총 탐색 시간에 종이를 씹거나 핥는 행동, 또는 종이 위에 앉아 있는 시간은 포함하지 마십시오. 후각 행동을 정확하게 분석하기 위해 이러한 규칙을 엄격하고 일관되게 준수하십시오.비디오 기록을 검토하여 필터 페이퍼를 조사하는 데 소요된 총 시간을 확인한 후, 모든 비디오에 대해 분석을 반복하십시오. 다음은 후각 테스트의 대표적인 결과입니다. 첫 번째 차트는 후각 민감도 훈련 세션의 결과를 보여줍니다.실험군 B 또는 대조군 A의 각 마우스를 필터 페이퍼에 적신 다섯 가지 서로 다른 희석 농도의 시나몬 추출물에 3분 동안 1회 노출시켰습니다. 필터 페이퍼를 탐색하는 데 소요된 총 시간을 측정하였으며, 이 차트는 후각 선호도 테스트 세션의 결과를 보여줍니다. 각 마우스는 필터 페이퍼에 적신 각각의 서로 다른 향에 3분 동안 1회씩 노출되었습니다.거름종이를 탐색하는 데 소비된 총 시간을 평가했습니다. 지금까지 이러한 절차를 사용하여 성체 마우스의 후각 능력을 테스트하는 방법을 보여드렸습니다. 후각 능력을 정확하게 테스트하고 학습이나 기억과 같은 다른 능력이 영향을 주지 않도록 하려면, 경험이 없는 나이브(naive) 마우스를 사용하는 것이 중요합니다. 이것으로 마치겠습니다.시청해 주셔서 감사합니다. 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.

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Research

연구

JoVE Journal

Biology

생물학

후각 기능의 손상은 파킨슨병, 알츠하이머병, 헌팅턴병을 포함한 많은 신경퇴행성 질환에서 흔히 나타나는 특징입니다. 본 기사에서는 신경 퇴행성 질환의 마우스 모델에서 후각 능력을 측정하는 데 사용할 수 있는 마우스의 후각 구별 및 감지를 평가하기 위한 일련의 테스트에 대해 설명합니다.

신경 퇴행성 질환의 마우스 모델에 대한 후각 분석 실험

이 원고는 설치류의 후각 시스템을 조사하는 프로토콜을 설명합니다. 후각 습관화/습관 제거 테스트를 통해 조사관은 마우스가 반복적으로 제시된 냄새에 습관화되어 있는지, 그리고 새로운 냄새가 나왔을 때 마우스가 습관 해제를 보이는지 여부를 결정할 수 있습니다.

마우스에서 냄새 차별과 요법 이니에 대한 테스트

우리는 쥐를 대상으로 간단하고 편견 없는 후각 테스트를 제시합니다. 이 프로토콜을 사용하면 물과 비교되는 새로운 냄새에 대한 후각적 구별, 선호도, 회피 및 민감도를 단일 행동 세션으로 평가할 수 있습니다. 이 방법은 단일 실험자에 대해 표시되며 분석은 컴퓨터 지원 비디오 처리를 기반으로 합니다.

간단하고 컴퓨터 지원 마우스에 대한 후각 테스트를

여기, 우리는 쥐 냄새 차별 테스트는 연관 학습 작업에 기차. 이 프로토콜은 또한 두뇌에 구조적인 변화를 유도 하는 학습에 대 한 연구에 대 한 수 있습니다.

후 각 학습 및 쥐에 있는 차별의 객관적이 고 재현성 시험

이 문서에서는 새로운 마우스 판단 편향 프로토콜에 대한 자세한 설명을 제공합니다. 정서적 상태에 대한이 후각 파기 작업의 민감성에 대한 증거도 입증되고 다양한 연구 분야에서 그 유용성이 논의됩니다.

후각 파기 작업을 통한 마우스 판단 편향 평가

본 논문은 흡입된 환경오염물질 노출이 마우스의 후각 기능에 미치는 영향을 평가하기 위한 매몰식품 검사와 사회적 악취 차별 실험에 대해 자세히 설명한다.

흡입된 환경 오염 물질이 마우스의 후각 기능에 미치는 영향 연구

이 프로토콜은 go/no-go 후각 행동 실험을 위한 후각계의 구성을 설명합니다. olfactometer의 성공적인 구성을 보장하기 위해 이미지와 함께 단계별 지침이 제공됩니다. 프로세스 중에 발생하는 문제를 해결하기 위한 정보도 포함되어 있습니다.

설치류 후각 행동 연구를 위한 후각계 구축

여기에서는 우울증의 마우스 모델에서 식욕 자극과 혐오 냄새 자극에 대한 부정적인 후각 편향을 평가할 수 있는 후각 선호도 테스트 프로토콜을 제시합니다.

An Olfactory Preference Test for measuring Olfactory Hedonic Biases in Mouse Models of Depression(우울증의 마우스 모델에서 후각 쾌락 편향을 측정하기 위한 후각 선호도 테스트)

임의의 점 kinematograms과 컴퓨터 - 생성 무척추 동물의 비디오 재생을 고용 op​​erant 조절 패러다임을 사용하는 도마뱀의 시각적 감도를 테스트.

도마뱀의 운동의 속도와 방향에 시각 민감도 테스트

에서 복잡한 운전하는 동작의...

성인 Drosophila Melanogaster의 로코의 고해상도 비디오 추적

배우세요 성인 마우스의 후각 민감도 및 선호도를 평가하는 행동 테스트 방법을. 필터 페이퍼에 농도별 냄새 자극을 노출하고 탐색 시간을 기록하여 신경과학 및 행동생물학 연구에 활용할 수 있습니다.

성인 마우스의 후각 행동 테스트

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