Name: 미국 호르세쇼 게, Limulus Polyphemus의 혈액 수집 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-10-13T00:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 48 s
Description: 학습하세요 미국 호르스쇼 게 Limulus polyphemus의 혈액 수집 방법을. 심장 천자를 통해 대량의 혈액을 채취하고 원심분리로 혈장과 세포를 분리하는 기술을 익히세요. 이 방법은 LAL 검정을 위한 생물의학 연구에 필수적입니다.

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위에서 설명한 기존 연구는 NSF 교부금 0,344,630에 의해 지원되었다.

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말굽 게 4 종의, 동쪽의 북아메리카 해안 세 종 일본에서 벵골 만 해당 범위에서 Limulus polyphemus의가 있습니다. 해부학적인 몸의 구조와 유사한 형태가 27 4억4천5백만년 전에서 화석으로 발견 되었기 때문에 동물은 &quot;살아있는 화석&quot;으로 식별됩니다. 성숙에 도달 13 년 최소한 20 년은 28 생활 - 말굽 게 10을 필요로하는, 긴 동물을 나타냅니다. 그것은 장어와 콘치 어업 29 미끼로 광범위한 수확의 대상이되어 있지만, 미국의 말굽 크랩은 여전히 합리적인 풍부하며 비파괴 작은 성인 혈액의 50 ML의 수집 및에서 많은 400 ML 수 있습니다 대형 여성. 도이 정도의 혈액 수집은 10 분 미만으로 완료할 수 있습니다. 너무 작은 노력으로 많은 혈액을 내실수가 다른 어떤 즉시 사용할 수 무척추 동물의 알아요. 내독소에 대한 랄 테스트의 중요성, 그람 음성 박테리아의 존재에 대한 지표는 말굽 게 13 면역 시스템에 관심을...

미국 호르세쇼 게, limulus polyphemus의 혈액 수집

Blood Collection from the American Horseshoe Crab, Limulus Polyphemus

말굽 게 어떤 긴 무척추 동물의 가장 특징 면역 체계가 있습니다. 말굽 게는에서 면역의 연구는 혈액의 대량 수집 용이성으로하고 혈액의 단순에서 촉진되었다. 말굽 게는 일반적인 순환, 세분화 amebocyte에서만 하나의 셀 유형을 보여줍니다. 플라즈마는 바닷물의 염분 성분을 가지고 있으며, 단지 세 풍부한 단백질, hemocyanin, 호흡기 단백질, C - 반응 박테리아 세포를 포함한 외부 세포의 cytolytic 파괴 기능 단백질, 및 α2 - macroglobulin은 프로 테아제를 억제하는 병원균을 침해니다. 혈액은 lipopolysaccharide (일명, 내독소, LPS), 그람 음성 세균의 제품으로 오염을 최소화 조건 하에서 직접 심장 주사에 의해 수집됩니다. 혈액 400 ML - 대형 동물은 200를 얻을 수 있습니다. 플라즈마의 연구, 혈액 세포는 즉시 원심 분리에 의해 혈장에서 제거되며 플라즈마 다음의 구성 단백질로 fractionated 수 있습니다. 혈액 세포가 편리하게 다음 그 coverglasses를 장착, 문화 접시 표면에 대한 자세한 중 하나 LPS 무료 coverglasses를 삽입하여 직접 현미경 검사를 허용 조건 LPS 무료 isotonic 호수 (0.5 M NaCl)에 혈액 작은 볼륨을 수집하여 미세 공부 아르 세포 부착 다음과 같은 간단한 관측 실 인치 직접 관찰을위한 두 번째 준비 3를 수집하는 것입니다 - LPS없는 배아 요리의 혈액 5 ML하고 다음 실로 총체적 amebocytes의 조각을 explanting하는 슬라이드와 coverglass 사이에 샌드위치가 조직. 이 준비에서 운동성이있는 amebocytes 그들이 쉽게 볼 수 있습니다 coverglass 표면에,에 마이 그 레이션. 혈액 응고 시스템 amebocytes의 집합과 혈액 세포의 분비 과립의에서 발표되는 단백질, coagulin의 세포외 응고의 형성을 포함한다. 세탁 혈액 세포의 생화 학적 분석 2퍼센트 트윈 - 20, 0.5 M LPS 무료 NaCl, 세포의 원심 분리에 의해 다음과 0.5로 세척 M의 0.1 볼륨으로 혈액을 수집하여 수행할 수 수 집합과 degranulation가 발생하지 않습니다을 필요로 NaCl.

미국 말굽 게, Limulus polyphemus은 틀림없이 모든 무척추 동물의 혈액의 다량을 위해 가장 편리한 소스입니다. 혈액의 일반적인 순환, 세분화 amebocyte, 그리고 플라즈마, hemocyanin, C - 반응 단백질 및 α2 - macroglobulin에서 3 풍부한 단백질에 하나의 셀 유형, 구성의 간단하다. 혈액은 심장에서 수집되고 혈액 세포 및 플라즈마 원심 분리로 구분됩니다.

미국 호르세쇼 게, Limulus Polyphemus의 혈액 수집

투구게는 수명이 긴 무척추동물 중 면역 체계가 가장 잘 규명된 생물입니다. 투구게의 면역 연구는 ...

미국Horseshoe Crab인 Limulus PolyPhen의 혈액을 채취하려면, 게를 굴곡시킨 자세로 잡고 심장을 천자하기 위해 힌지 부분에 주사 바늘을 삽입해야 합니다. 순환계에 접근하게 되면, 성체 게로부터 거의 모든 혈액을 배출시킬 수 있습니다. 왜 혈액을 채취하는 것일까요?투구게의 혈액에는 아메바세이트(amoebocyte)라고 불리는 매우 운동성이 강한 세포가 포함되어 있으며, 이는 그람 음성균이 존재할 때 격렬하게 반응하는 특수한 응고 인자를 분비합니다. 이러한 사실은 FDA가 Limulus 아메바세이트 용해물 분석법 또는 그람 음성균 검사법을 채택하는 계기가 되었습니다. 안녕하세요, 저는 캘리포니아 대학교 데이비스 캠퍼스 분자 및 세포 생물학과의 피터 암스트롱(Peter Armstrong)입니다.저는 현재 여름 동안 연구를 수행하는 매사추세츠주 우즈 홀의 해양생물연구소(Marine Biological Laboratory)에서 소식을 전해드리고 있습니다. 오늘은 미국 왕관게(American horseshoe crab)로부터 혈액을 채취하는 방법을 보여드리겠습니다. *Limulus polyphemus*는 무척추동물 중 대량의 혈액을 얻을 수 있는 가장 훌륭한 공급원이라고 할 수 있습니다.이제 시작해 보겠습니다. 투구게는 사육이 가능합니다. 이들은 고품질의 해수가 필요하며, 물의 폭기 및 탈질 작용을 제공하는 마린 아쿠아리움에서 유지 관리할 수 있습니다.Woods Hole에서는 바닷물을 투구게 수조에 직접 공급합니다. 여기 보시는 것처럼 수조 동물들에게는 일반적으로 새우, 물고기, 오징어 또는 바닷가재를 먹이로 줍니다. 동물에게 먹이를 주려면, 수조에서 꺼내어 등을 바닥으로 가게 눕힌 뒤 입에 먹이를 가져다 줍니다.배가 고프면 먹이를 먹을 것입니다. 동물에게는 일주일에 두 세 번 먹이를 주어야 합니다. 전방에서 후방으로 이어지는 신체의 세 가지 주요 구분은 prosoma, EPIs, soma, 그리고 telson입니다.전체 몸통(pro soma)의 전측 및 외측 자유 가장자리는 플랜지(flange)이며, 후방의 가장 깊은 함입 부위는 에피텟(epithet)입니다. telson이 관절을 이루는 곳은 말단만(terminal bay)이며, 전체 몸통(pro soma)과 에피텟(epithet)이 관절을 이루는 접합부는 틈새 바로 아래에 위치한 힌지(hinge)입니다. 심장은 이 힌지(hinge)에 위치합니다.

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호르세쇼 크랩을 사용하여, Limulus Polyphemus 비전 연구

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학습하세요 미국 호르스쇼 게 Limulus polyphemus의 혈액 수집 방법을. 심장 천자를 통해 대량의 혈액을 채취하고 원심분리로 혈장과 세포를 분리하는 기술을 익히세요. 이 방법은 LAL 검정을 위한 생물의학 연구에 필수적입니다.

미국 호르세쇼 게, Limulus Polyphemus의 혈액 수집

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