CRISPR

- [Instructeur] Het CRISPR-Cas9-systeem is een DNA-bewerkingstool die staat voor Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats en CRISPR-geassocieerd eiwit 9. CRISPR-Cas9 werd voor het eerst waargenomen in bacteriën en is een verdedigingsmiddel tegen virussen. Als vreemd, viraal DNA een bacterie binnendringt, wordt het verwerkt tot kleinere fragmenten, die kunnen worden ingebracht in een regio van het bacteriële genoom, een CRISPR-locus genaamd.

Wanneer het gebied wordt getranscribeerd, associeert het product met kleinere RNA's, tracrRNA's genaamd, die kunnen helpen om zowel het Cas9-eiwit als RNAse op het molecuul te oriënteren, waarvan de laatste het transcript splitst. Het eindresultaat is verschillende complexen, elk bestaande uit een Cas9-eiwit, tracrRNA en een CRISPR-RNA, afgeleid van DNA in de sprinkhaan. Het CRISPR-RNA in deze structuren herkent en begeleidt Cas9 naar viraal DNA, dat vervolgens wordt gesplitst en vernietigd.

Wetenschappers benutten CRISPR-Cas9 door individuele RNA-moleculen te synthetiseren die tracrRNA en CRISPR RNA nabootsen, die op een interessant gen kunnen richten. Wanneer bijvoorbeeld twee van dergelijke geleidende RNA's in cellen met Cas9 worden geïntroduceerd en beide op hetzelfde gen richten, kan een sequentie worden uitgesneden. Nadat dit doelgebied is verwijderd, worden de afgesneden uiteinden opnieuw verbonden en worden de effecten op de cellen waargenomen.

Het CRISPR-Cas9-systeem is dus gemodificeerd vanuit een bacterieel mechanisme en kan worden gebruikt voor een reeks technieken voor genbewerking.