Montage, Tuning en gebruik van een Apertureless Near Field Infrared Microscoop voor eiwit Imaging

Samenvatting

De montage van een nearfield infrarood microscoop voor beeldvorming proteïneaggregaten wordt beschreven.

Samenvatting

Dit document heeft tot doel de lezer te onderwijzen in de assemblage en de werking van een infrarood-nabije-veld microscoop voor beeldvorming verder dan de diffractielimiet. De apertureless nabije-veld microscoop is een lichtverstrooiing-type instrument dat infrarood spectra geeft aan circa 20 nm resolutie. Een complete lijst van componenten en een stap-voor-stap protocol voor het gebruik is voorzien. Voorkomende fouten in de montage en tuning instrument worden besproken. Een representatieve dataset die de secundaire structuur van een amyloïde fibrillen shows gepresenteerd.

Protocol

Achtergrond:

Apertureless probe nabije-veld microscopie IR biedt een hoge ruimtelijke resolutie imaging. Het is een relatief nieuwe techniek waarbij een incident infraroodstraal wordt verspreid door een scherpe atomaire kracht microscopie (AFM) tip oscillerende bij de resonantiefrequentie van de cantilever de buurt van het monster. Een IR-detector verzamelt het verstrooide licht en is gedemoduleerd op deze resonantiefrequentie of de harmonischen. Op deze manier kan de achtergrond spreiding van de gerichte laserstraal incident op de rest van het monster oppervlak worden verlaagd en een ruimtelijke resolutie tot ver buiten de diffractielimiet....