Methodenartikel

Touch Habituation Assay: een methode om niet-associatief leren te bestuderen bij C. elegans

30 april 2023

In dit artikel

Samenvatting

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bron: Mersha, M. D., et al. Langdurige gedrags- en reproductieve gevolgen van embryonale blootstelling aan lage dosis toxische stoffen. J. Vis. Exp. (2018).

Deze video introduceert de touch habituation assay, een C. elegans gedragsmethode om mechanosensatie te beoordelen en de tijd tot gewent te kwantificeren.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het volgende protocol is een fragment uit Mersha et al. Langdurige gedrags- en reproductieve gevolgen van embryonale blootstelling aan lage dosis toxische stoffen, J. Vis. Exp. (2018)

  1. Anterior Touch Gewenkingstest
    1. Breng ongeveer 10 gesynchroniseerde jongvolwassen wormen over naar nieuwe onuitgemaakte NGM-platen met behulp van een met vuur gesteriliseerde 30 G platina draadpick. Laat wormen 5 minuten ongestoord om ze de tijd te geven om aan de nieuwe plaat te acclimatiseren.
    2. Gebruik voor de gewentreactie een wenkbrauwhaar dat aan het uiteinde van een houten spies of tandenstoker is bevestigd en steriliseer door 70% ethanol in te dompelen. Veeg af met een schoon pluisvrij weefsel en wacht 1 minuut tot ethanol is verdampt. Raak de worm voorzichtig aan op het hoofd (voorste van de faryngeale bol) met behulp van het wenkbrauwhaar. Herhaal de aanrakingen, zodat 10 s tussen aanrakingen om de worm te laten herstellen.
    3. Blijf aanraken (10 s interstimulus intervallen toestaan) totdat de worm niet meer achteruit beweegt. Op dit punt is de worm gewend aan de stimulus. Registreer het aantal aanrakingen dat nodig is om de worm te laten bewonen.
    4. Analyseer het verschil tussen de gemiddelde gewenkingspercentages van de behandelde en onbehandelde besturingselementen met behulp van eenrichtings ANOVA, gevolgd door de post-hoctest van Tukey.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
EtOHSigma-Aldrich64-17-5
N2 (Wild-type C. elegans) wormsCGCRepository at U of Minnesota
Platinum wire pickGenesee Scientific59-AWP
Petri platesFisher07-202-011
Dissection MicroscopeAmScopeSM-2TYY

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Mechanosensatieanterior aanrakingkeerresponsinterstimulusintervalNGM platengesynchroniseerde wormenzachte aanraking

Gerelateerde artikelen