1. Het uitvoeren van de agressietest
<ol><li>Voer de agressietest uit in een rechthoekige tank van 19 L van 30 cm x 15 cm x 10 cm. Rust de tank uit in externe ondoorzichtige scheidingswanden rond drie zijden van de agressietank, waarbij de voorkant wordt blootgesteld om te worden bekeken, om ongewenste prikkels van buitenaf te verminderen. Verdeel de tank met externe markeringen in vier gelijke rechthoekige kwadranten en bevestig een spiegel permanent (met siliconen caulk) in het kwadrant linksonder, hellend op 22,5° en vormt een rechterdriehoek tegen de uiterst linkse kant van de tank.</li>
	<li>Zorg ervoor dat de temperatuur van het water in de acclimatisatietank en de agressietank binnen 2 °C van het behuizingsrek ligt. Laat hiervoor vers, verouderd water voorverwarmen tot 27,5-28,5 °C klaar om toe te voegen aan de agressietank. OPMERKING: Het is belangrijk om het water tussen elke test te veranderen om onterechte reuksignalen te elimineren.</li>
	<li>Breng, door cupping, een focale vis van het behuizingsrek over naar een aparte acclimatisatietank waar deze gedurende 10 minuten zal acclimatiseren. OPMERKING: Het is belangrijk om prikkels die bij de vis worden geïntroduceerd door onjuiste behandeling te verminderen. Breng personen over zoals eerder beschreven. Plaats met name handmatig en zorgvuldig een kleine, transparante plastic beker in de tank van belang. Zonder de vis evenzeer te verstoren als over te brengen met behulp van een net, schep je de vis langzaam in de beker.</li>
	<li>Zorg ervoor dat de video camcorder klaar is om op te nemen door te bevestigen dat de agressie testtank (zie stap 1.1) scherp is en druk onmiddellijk voordat u het individu overbrengt naar de agressietank op record op het apparaat. Breng focale vis over via cupping van acclimatisatietank naar agressietank. OPMERKING: Het is belangrijk om op te nemen voordat de vis de agressietank binnenkomt om het exacte tijdstip van binnenkomst te volgen.</li>
	<li>Neem de agressietank 10 minuten en 30 seconden op en kop vervolgens de focale vis uit de agressietank terug in de acclimatisatietank.</li>
	<li>Wacht bij het bekijken van de opname 30 seconden nadat de vis in de tank is geïntroduceerd als een extra acclimatisatieperiode voordat u gedrag scoort.</li>
	<li>Met behulp van het JWatcher-scoresysteem dat is gedefinieerd voor agressief gedrag, kwantificeert u het volgende gedrag gedurende 10 minuten: tijd doorgebracht in de buurt van spiegel, aantal spiegelbenaderingen, aantal darts, aantal pogingen tot beten (mond openen in de richting van de spiegel) en het aantal laterale displays (dorsale, borst-, anale en caudale vin erectie).</li>
	<li>Scoor minstens twee keer een enkele agressietest, totdat de test wordt gescoord met hoge overeenstemming tussen iteraties.</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>19 L rectangular tank&amp;nbsp;</td><td>That Fish Place&amp;nbsp;</td><td>211932</td><td></td></tr><tr><td>ArtMinds Square Mirror, Value Pack 3&quot; x 3&quot;&amp;nbsp;</td><td>Michaels&amp;nbsp;</td><td>10334162</td><td></td></tr><tr><td>Zebrafish Rack System&amp;nbsp;</td><td>Aquaneering Inc&amp;nbsp;</td><td>ZS550</td><td></td></tr><tr><td>Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO lens&amp;nbsp;</td><td>Nikon Corporation</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Hitachi KP-D20A CCD Camera</td><td>Prescott&#039;s, Inc.</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Jwatcher</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr></tbody></table>

agressietest: een methode om agressief gedrag van zebravissen te bestuderen als reactie op een spiegel

Bron: Way G.P., et al. <a href="https://www.jove.com/v/54049/" target="_blank">Vrijmoedigheid, agressie en shoaling-assays voor zebravisgedragsyndromen</a>. J.Vis. Exp. (2016)
Het artikel beschrijft een test voor het bestuderen van de agressie van zebravissen. De methode maakt gebruik van een eenvoudige spiegel en observeert de gedragsreactie van zebravissen op zijn eigen reflectie in spiegel.

Agressietest: een methode om agressief gedrag van zebravissen te bestuderen als reactie op een spiegel

Source: Way G.P., et al. Boldness, Aggression, and Shoaling Assays for Zebrafish Behavioral Syndromes. J. Vis. Exp. (2016)
The article describes an assay ...

- Start with two rectangular tanks, an acclimation tank and an aggression tank. Now cover the outer three sides of the aggression tank with a white paper to reduce external stimuli. Mark the tank externally to divide it into four equal rectangular quadrants for position tracking. Fix a mirror in the left lower quadrant angled at 22.5 degrees from vertical. The fish&#39;s reflection acts as a stimulus for aggression.
Pour water into both the tanks. The water should be pre-warmed to 27.5 degrees. Place the focal fish into the acclimation tank. This fish is the test subject for the behavioral assay. After 10 minutes, transfer the focal fish from the acclimation tank to the aggression tank via cupping. Now let the fish acclimatize for another 30 seconds.
Record the number of bites, quick lunges toward the mirror with an open mouth, the number of lateral displays, flaring of dorsal, pectoral, anal, and caudal fins in the direction of the mirror, and the amount of time spent in the quadrant near the mirror. Aggressive fish tend to spend more time near the mirror and bite the mirror more often. In the example protocol, we will observe these aggressive behaviors in zebrafish.
- Begin by obtaining a 19 liter rectangular tank measuring 30 by 15 by 10 centimeters. Outfit the tank with external opaque partitions surrounding three sides of the aggression tank, leaving the front exposed for viewing, to reduce undesirable outside stimuli. Divide the tank with external markings into four equal rectangular quadrants. Use silicone caulk to fix a mirror within the left lower quadrant, inclined at 22.5 degrees, forming a right triangle against the far left side of the tank.
Have fresh aged water pre-warmed to 27.5 to 28.5 degrees Celsius ready to add to the aggression tank in order to ensure that the temperature of the water in the acclimation tank and aggression tank are within 2 degrees Celsius of the housing rack. Cup a focal fish from the housing rack, and transfer it into a separate acclimation tank, where it will acclimate for 10 minutes.
Confirm that the video camera is focused on the aggression assay tank and press record. Then immediately transfer the focal fish via cupping from the acclimation tank to the aggression tank. Record the aggression tank for 10 minutes and 30 seconds. Then cup the focal fish from the aggression tank back into the acclimation tank.
When watching the recording after the assay is complete, wait 30 seconds after the fish has been introduced to the tank as an additional acclimation period before scoring behaviors. Finally, score a single aggression assay at least twice until the assay is scored with high agreement between iterations.

aggression-assay-method-to-study-aggressive-behavior-zebrafish

Research

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

Danio rerio (zebrafish)

Adult

Aggression Assay: A Method to Study Aggressive Behavior of Zebrafish in Response to a Mirror

2.8K Views. - Start with two rectangular tanks, an acclimation tank and an aggression tank. Now cover the outer thr...

Abstract

Protocol

<table><tbody><tr><td>19 L rectangular tank&nbsp;</td><td>That Fish Place&nbsp;</td><td>211932</td><td></td></tr><tr><td>ArtMinds Square Mirror, Value Pack 3" x 3"&nbsp;</td><td>Michaels&nbsp;</td><td>10334162</td><td></td></tr><tr><td>Zebrafish Rack System&nbsp;</td><td>Aquaneering Inc&nbsp;</td><td>ZS550</td><td></td></tr><tr><td>Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO lens&nbsp;</td><td>Nikon Corporation</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Hitachi KP-D20A CCD Camera</td><td>Prescott's, Inc.</td><td>NA</td><td></td></tr><tr><td>Jwatcher</td><td>NA</td><td>NA</td><td></td></tr></tbody></table>

Agressietest: een methode om agressief gedrag van zebravissen te bestuderen als reactie op een spiegel

In This Article

Abstract

Protocol

Materials

Reprints and Permissions

Tags

Related Articles

Name	Company	Catalog Number
19 L rectangular tank	That Fish Place	211932
ArtMinds Square Mirror, Value Pack 3" x 3"	Michaels	10334162
Zebrafish Rack System	Aquaneering Inc	ZS550
Nikon AF Nikkor 35-105 mm f/305~4.5s MACRO lens	Nikon Corporation	NA
Hitachi KP-D20A CCD Camera	Prescott's, Inc.	NA
Jwatcher	NA	NA