Methodenartikel

Toepassing van de Light-cured Dental lijm hars voor permanente montage elektroden of Microdialyseprobes bij chronische experimenten

14.8K weergaven

DOI:

10.3791/249

30 juli 2007

In dit artikel

Samenvatting

In dit rapport stellen we een nieuwe toepassing van licht-uithardende tandheelkundige harsen voor montageplaat van elektroden of microdialyse probes in chronische experimenten. Dit materiaal maakt directe binding aan de schedel.

Samenvatting

Bij chronische opname experimenten, zelf-uithardende tandheelkundige acrylharsen is gebruikt als een montageplaat van elektroden of microdialyse-probes. Aangezien deze acryl niet bond tot op het bot, zijn schroeven zijn gebruikt als ankers. Echter, in kleine proefdieren, zoals vinken of de muis, hun schedels zijn zeer fragiel en kan niet met succes Houd de ankers. In dit rapport stellen we een nieuwe toepassing van licht-uithardende tandheelkundige harsen voor montageplaat van elektroden of microdialyse probes in chronische experimenten. Dit materiaal maakt directe binding aan de schedel. Daarom zijn anker schroeven niet nodig en chirurgische veld kan aanzienlijk worden verminderd. Ervaringen uit het verleden tonen aan dat de hechting effect houdt langer dan 2 maanden. Conventionele hars het venster van de tijd wanneer de materialen zijn plooibaar en werkbaar is een paar minuten. Echter, het raam van de arbeidstijd voor deze tandheelkundige lijmen is aanzienlijk breder en verstelbaar.

Protocol

Stap 1. Voorbereiding van de probe implantatie

  1. Anesthesie (niet getoond in de video)

    Verdoven elke vogel met een interperitoneal injectie van een ketamine (12,5 mg / kg lichaamsgewicht) en xylazine (25 mg / kg) mengsel tot een stabiel niveau van chirurgische anesthesie te produceren.

  2. Fix een hoofd om een ​​stereotaxische kader

    Gebruik Xylocaine (TM) gelei aan de lokale pijn van het oor bars 'druk te verminderen. Het hoofd van de vogel is vastgesteld in een stereotaxische apparaat dat bestaat uit het oor bars en een snavel de houder die de kop in een hoek van 45 ° houdt. Tijdens de operatie stereotaxische voor implantatie, warm het lichaam van de vogel door de chirurgische pad met thermische controle (temperatuur = 34 ~ 36 ° C).

  3. Desinfecteer chirurgische gebied

    Desinfecteer het chirurgische veld met isodine (TM) voorafgaand aan de operatie.

Stap 2. Stereotaxische positionering

  1. Referentiepunt alignment

    Lijn dummy sonde (glas micropipet) naar de Lambda (Y-punt) en Mark Y-punt met de kleurstof gevulde pipet. Resterende dextran-TMR van de laatste tracer studie werd gebruikt in de video.

  2. Insnijden van de huid

    Verwijder het vel en bloot de oppervlakte van de schedel. Dan, schoon het oppervlak van de schedel met wattenstaafjes.

  3. Positionering van dummy canule (in horizontale richting)

    Verplaats de dummy canule om de doelstelling site (AP as en Lateral coördinatie)

  4. Kleine craniotomie en het insnijden van dura mater.

    Gebruik een fijne pincet voor craniotomie en een fijne injectienaald (30 G) voor de insnijdingen van de dura mater. Dan, schoon het oppervlak van de schedel.

  5. Uiteindelijke positionering (implantatie) van de dummy canule

    Zoek de tip van de gids canule op 0,30 mm boven de microdialyse probe-beoogde regio. Ten slotte is weer schoon het oppervlak van de schedel, want een schone en droge ondergrond is vereist voor zware bonding.

Stap 3. Voorbehandeling van het oppervlak craniale

(De vergelijkbare procedure voor "directe vullen restauratie" van de tandheelkundige product te worden gebruikt.)

  1. Primer behandeling
    1. Meng Primar vloeistof A met B op een schotel.
    2. Breng het mengsel op het oppervlak van de schedel met een kleine borstel.
    3. Laat gedurende 30 seconden.
    4. Droog met een lichte luchtstroom. (Niet wasbaar.)

  2. Toepassing van bindmiddel
    1. Breng de bonding agent op het oppervlak van de schedel met een kleine borstel.
    2. Breng een zachte luchtstroom. (Niet wasbaar.)
    3. Light-cure gedurende 20 seconden.

Stap 4. Montage van composiet

  1. Mount hars met duidelijke plugger

    Als een Plain plugger niet beschikbaar is, kan een micro-spatel worden gebruikt.

  2. Het belichten
  3. Incrementele montage

    Incrementele montage wordt aanbevolen om ervoor te zorgen volledige reactie van de hars.

    Voor incrementele montage toe te passen bindmiddel voor elke montage.

  4. Mold de composiet-en licht-uithardende voor de uiteindelijke verharding.
  5. Einde van de operatie

Het reinigen van de chirurgische gebied, toe te passen antibioticum (Gentamicine zalf), en verwijder het dier uit de stereotaxische vlam. Blijf dan het dier in een thermo-gecontroleerde ruimte (temperatuur = 33-35 ° C) voor post-anesthesie herstel.

Zoals te zien in de video, was er geen abnormaal gedrag is geconstateerd in een van de dieren op de volgende dag na de operatie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

In vergelijking met de toepassing van conventionele zelf genezen van acrylharsen, de geïntroduceerde techniek heeft een aantal belangrijke voordelen:

1. Directe verlijming:
Zelf uithardende acryl kan worden bevestigd aan het bot voor een tijdje, maar het zich niet houdt tot op het bot. Daarom zijn verankering schroeven nodig zijn om een ​​montageplaat fix (zie Figuur 2A). In contrast, licht uithardende hars kan binden tot op het bot direct, zodat schroeven zijn niet nodig (Figuur 2B). Daarom kan grootte van montagebasi...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Experimenten werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen voor dierproeven van de hersenen Science Institute, RIKEN (RIKEN-BSI) en het instituut dier ethische commissie goedgekeurd.

Dankbetuigingen

We danken onze collega's in RIKEN-BSI voor hun vriendelijk steunt en vruchtbare adviezen tijdens dit werk. Ik wil graag mijn oprechte waardering uit aan professor Shigemi Mori, hoogleraar G bor Juh sz, Drs te drukken. Kiyoji Matsuyama, Katalin AK Kesi en rp d Dobolyi die adviseerde me om microdialyse methode bestuderen tijdens de graduate opleiding aan de Graduate University for Advanced Studies, Japan. Tot slot, we danken de heer Chris Sarnecky en Dr Akitsugu Takasu voor hun steun in de video-opname.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Foto 1A toont microdialyse probe (een), een dopmoer (b) en een gids canule (c). Op deze foto, is de gids canule, omringd door tandheelkundige hars die zich aan de schedel direct. Foto B toont een vogel tijdens de drug perfusie. Op de bovenkant van het hoofd, is er een microdialyse probe die is aangesloten op een fijne Tefron buis. Schaal bars = 1 cm voor A en 2 cm voor B, respectievelijk.

figure-materials-1
Figuur 1 - Foto's van een microdialyse probe (A) en een vogel tijdens de drug perfusie (B)

Referenties

  1. Adell, A., Artigas, F. In vivo Brain microdialysis: Principles and applications. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Boulton, A., Baker, G., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  2. Kendrick, K. Microdialysis in large unrestrained animals: neuroendocrine and behavioral studies of acetylcholine, amino acid, monoamine and neuropeptide release in the sheep. Microdialysis in the Neuroscience. Robinson, T., Justice, J., Bateson, A. 7, Elsevier. Amsterdam. 327-348 (1991).
  3. Oakley, B., Schafer, R. Experimental Neurobiology: A laboratory Manual. , University of Michigan Press. Ann Arbor. (1978).
  4. Okumura, T., Yamashita, Y., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese Finch I. A Biological study. Soc. Neurosci Abst. 33, (2007).
  5. Boulton, A., Baker, G. The relation of brain electrical activity to behavior. In Vivo Neuromethods: Neuromethods. Robinson, T., Bateson, A. 32, Humana Press Inc. Totowa. 325-357 (1998).
  6. Yamashita, Y., Okumura, T., Okanoya, K., Tani, J. Function of the sensori-motor nucleus NIf in generation of complex syntactical song in the Bengalese finch. Proceeding of the 2nd International Symposium on Mobiligence, , 101-104 (2007).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Elektrodeplaatsingmicrodialyseprobeschedelbevestigingstereotaxische chirurgieaanbrengen van primerhechtmiddelincrementele montageLED lichteenheid

Gerelateerde artikelen