Blaastumoren zijn gevestigd in vrouwelijke muizen in een minimaal invasieve wijze via catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende aanhechting van carcinoom cellen om de branden sites.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een orthotope Model van Murine Blaaskanker
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
In deze eenvoudige procedure, zijn blaastumoren gevestigd in vrouwelijke C57 muizen door het gebruik van de catheterisatie, lokale cauterisatie, en de daaropvolgende celadhesie. Na hun blazen zijn transurethrally gecatheteriseerd en afgevoerd, zijn dieren weer gecatheteriseerd het inbrengen van een platina draad in blazen toestaan zonder beschadiging van de plasbuis of blaas. De catheters zijn gemaakt van Teflon om te dienen als een isolator voor de draad, die elektrische stroom voert in de blaas om een brandwond creëren. Een elektrocauterisatie eenheid wordt gebruikt voor het afleveren 2,5 W aan het blootgestelde uiteinde van de draad, wegbranden extracellulaire lagen en het verstrekken van bevestiging sites voor carcinoom cellen die in suspensie geleverd aan de blaas door middel van een latere catheterisatie. Cellen blijven in de blaas gedurende 90 minuten, waarna de katheters zijn verwijderd en de blaas op natuurlijke wijze af te voeren. De ontwikkeling van de tumor wordt bewaakt via een echografie. Specifieke aandacht wordt besteed aan de catheterisatie techniek in de bijbehorende video.
Protocol
1. Dieren
- Vrouwelijke C57BL/6J muizen (Mus musculus) zijn geverifieerd vrij van besmettelijke ectoparasieten, worminfecties endoparasieten, en antilichamen tegen 17 muriene virussen door de verkoper voor de verzending. Muizen zijn ondergebracht in de AAALAC-geaccrediteerde dier faciliteit van Tulane University in overeenstemming met de Gids voor de Zorg en gebruik van proefdieren. 1
- In het bijzonder, muizen zijn gehuisvest groep (4-5 muizen / kooi) in individueel geventileerde polycarbonaat cageswith microisolation filter toppen op hardhout beddengoed. Ze zijn ad libitum verstrekt gepelleteerd knaagdier voedsel en dri....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Deze minimaal invasieve methode voor de vaststelling orthotope blaas tumoren in vrouwelijke muizen kan ook worden toegepast voor celtypes andere dan de MB49, hoewel verschillende resultaten moeten worden verwacht. Als er minder agressieve tumorcellen worden gebruikt, zal het verhogen van de wattage licht (met behulp van 0,5 W stappen naar de nieuwe optimale stand) leveren een oppervlakte van meer vatbaar zijn voor tumorcellen gehechtheid, en langere blaas incubatietijden voor de bijgebracht cellen zullen een grotere hoe.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Experimenten op dieren werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen en voorschriften uiteengezet door de institutionele zorg en het gebruik Comite van Tulane University in te stellen.
Dankbetuigingen
Dit werk werd gefinancierd door de National Science Foundation LOOPBAAN award (cbet-0846395) en de Vakgroep Vergelijkende Geneeskunde, Tulane University.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| C57Bl/6J muizen | Jackson Laboratory | 000664 | 3-5 weken oud |
| Polycarbonaat kooien en geventileerd rek | Lab Products | Super Mouse 750 | 327mm x 190mm x 143mm |
| Houtvijzel strooisel | Harlan Laboratories | Laboratory –grade SaniChips | |
| Knaagdierdieet | Harlan Laboratories | Rodent Diet 2019 | |
| IV-katheter | MWI Veterinary Supply | 009231 | 24 G x ¾ in. |
| Elektrocauterisatie-unit | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | |
| Echografie-unit | Sonosite | 180 Plus (Vet) | |
| MB49 cellijn | Wake Forest University Baptist Medical Center | N.v.t. | |
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | |
| Foetaal runderserum | Gemini Bio Products | 100106 500A57B | |
| Penicilline-streptomycine | Invitrogen | 15140-163 |
Referenties
- Institute of Laboratory Animal Resources. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. Washington, DC. (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zha....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
