$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
De komst van intravitale microscopie in experimentele knaagdier malaria-modellen heeft het mogelijk grote stappen om de kennis van parasiet-gastheer interacties 1,2. Zo zijn in vivo beeldvorming van malariaparasieten tijdens de pre-erytrocytaire fase onthulde de actieve ingang van parasieten in de huid lymfeklieren 3, de volledige ontwikkeling van de parasiet in de huid 4, en de vorming van een hepatocyt-afgeleide merosome tot migratie te garanderen en vrijkomen van merozoïeten in de bloedstroom 5. Bovendien heeft de ontwikkeling van de individuele parasieten in erytrocyten is onlangs gedocumenteerd met behulp van 4D-imaging en daagde onze huidige visie op eiwit-export in malaria 6. Zo heeft intravitale imaging radicaal veranderd onze visie op belangrijke gebeurtenissen in Plasmodium ontwikkeling. Helaas, studies van de dynamische passage van malariaparasieten via de milt, een belangrijke lymfe-organen prachtig aangepast aan de geïnfecteerde rode b duidelijklood cellen ontbreekt wegens technische beperkingen.
Met behulp van de muizenmodel van malaria Plasmodium yoelii in Balb / c muizen, hebben we intravitale beeldvorming van de milt en rapporteerde een differentieel verbouwen ervan en de naleving van de parasitering rode bloedcellen (pRBCs) naar barrière-cellen van fibroblast oorsprong in de rode pulp tijdens het infectie met het niet-dodelijke parasiet lijn P.yoelii 17x in tegenstelling tot infecties met de P.yoelii 17XL dodelijke parasiet lijn 7. Het bereiken van deze conclusies, werd een specifieke methodologie met ImageJ gratis software ontwikkeld om de karakterisering van de snelle drie-dimensionale beweging van single-pRBCs mogelijk te maken. Resultaten verkregen met dit protocol laten het bepalen van de snelheid, richting en verblijftijd van parasieten in de milt, alle parameters het aanpakken van hechting in vivo. Daarnaast hebben we het verslag van de methodologie voor de bloedstroom kwantificeren met behulp van intravitale microscopie en het gebruik van DIFlende kleurstoffen om inzicht te krijgen in de complexe structuur microcirculatie van de milt.
Ethiek verklaring
Alle dieren werden uitgevoerd op het dier faciliteiten van de Universiteit van Barcelona in overeenstemming met richtlijnen en protocollen zijn goedgekeurd door de ethische commissie voor Dierproeven van de Universiteit van Barcelona CEEA-UB (Protocol nr. DMAH: 5429). Vrouwelijke Balb / c muizen van 6-8 weken oud werden verkregen van Charles River Laboratories.