Overzicht
De studie beschrijven we in dit protocol wordt uitgevoerd gedurende drie opeenvolgende dagen, met een tussen-subject design van drie experimentele groepen. Op dag 1, alle vakken ondergaan vreesconditionering, waar ze leren om onderscheid te maken tussen twee signalen, een die een schok en een ander dat niet doet voorspelt. Op dag 2, alle onderwerpen ondergaan uitsterven training, maar verschillen met betrekking tot wat er gebeurt van tevoren: Twee groepen ontvangen een herinnering cue om de angst geheugen opnieuw te activeren voordat uitsterven training terwijl een derde groep ontvangt geen dergelijke cue. De ene groep krijgt de herinnering cue 10 min voor uitsterven, waardoor ze ondergaan uitsterven, terwijl de angst geheugen wordt reconsolidating. De andere groep krijgt de herinnering cue 6 uur vóór uitsterven, waardoor ze ondergaan uitsterven nadat het venster is vermoedelijk gesloten. De derde groep ontvangt geen herinnering cue voor het ondergaan van uitsterven, waardoor ze ondergaan standaard uitsterven training. Op dag 3, alle vakken return voor een andere uitsterven sessie. Hun niveau van angst toen ze voor het eerst de geconditioneerde cue op dag 3 te zien geeft aan of de angst herinnering blijft. Alle drie dagen worden uitgevoerd op dezelfde experimentele setting, een geluid gedempt, temperatuur-gecontroleerde ruimte. De geconditioneerde stimuli zijn gekleurde vierkantjes weergegeven op een computerscherm. We induceren en angst meten met een milde elektrische schok en huidgeleiding respectievelijk met een Biopac systeem module (zie tabel 1). Een desktop computer wordt gebruikt om de AcqKnowledge software programma dat zorgt voor de registratie en monitoring van SCR, terwijl een aparte computer wordt gebruikt om te rennen en de experimentele script te presenteren aan het onderwerp uit te voeren. De onderwerpen ondergaan alle drie de fasen rond dezelfde tijd van de dag.
1. Angst Beoordeling met huidgeleiding Response (SCR) - Elektrode Application & Opname
- Het experiment kamer moet idealiter worden warm gehouden (we onze kamers ergens between 70 en 75 graden) zodat betrouwbare en meetbare SCR vergemakkelijken. Reinig het onderwerp links of rechts binnen handbereik met behulp van een wattenstaafje bevochtigd met gedestilleerd water, wij raden niet aan schurende cleansors als ze kunnen de huid uitdrogen, het verstoren van zweet reacties. Zorg ervoor dat de vingertoppen zijn volledig drogen voordat aanbrengen van de elektroden.
- Breng hooggeleidende elektrolyt gel om beide elektroden (hier gebruiken we "Signa Gel" door Parker Laboratories Inc, en elektroden aangesloten op een MP100 Data Acquisition System gemaakt door Biopac Systems). Toestaan gel goed stijgen iets boven de SCR elektrode en er geen luchtbellen in de gel waarborgen kan interefere de SCR signaal.
- Bevestig een elektrode op het eerste sec vingers van de hand tussen de eerste en phalanges sec, waarbij de elektrodermale signaal sterker. Zorg ervoor dat de elektrode klittenband goed vastzitten en vraag het onderwerp te geven of zij elke pulseren in hun vingertoppen te voelen. Deze pulserende indicreert de bandjes zijn te strak, die interefere de SCR signaal.
- Zodra huidgeleiding elektroden zijn bevestigd, begint het opnemen van een huidgeleiding monster gedurende ongeveer 5 minuten om het onderwerp elektrodermale signaal testen. Hier gebruiken we AcqKnowledge 3,9-software (van Biopac Systems Inc) en neem SCR golfvormen op een MAC computer. We gebruiken een bemonsteringsfrequentie van 200 Hz, een niveau dat een signaal zo langzaam als SCR echter hogere worden gebruikt. De opname scherm moet worden gescheiden van de computer de presentatie van de experimentele script en uit het zicht van het onderwerp. Controleer of het onderwerp een robuust SCR antwoorden door hen door te nemen en diep adem, moet dit een aanzienlijke toename van SCR produceren (zie Figuur 1 voor een voorbeeld van een dergelijke reactie).
2. Angst Inductie met milde elektrische schok Stimulatie - Elektrode Application & Work-up Procedure
- Op de pols tegenovergesteldede site van de hand met de SCR elektroden, bevestigt u de stimulator bar. Hier gebruiken we een bar-elektrode (productcode EL350 van Biopac Systems Inc), aangesloten op een SD9 Square Pulse Stimulator (gemaakt door Grass Technologies, een Atro-Med, Inc Product Group) met een kraal van geleiding gel toegepast op elke van de elektrode koppen.
- De schok trekker moet worden losgekoppeld van de stimulator doos tijdens de work-up procedure. Plaats de balk op de binnenste pols, aan weerszijden van de palmaris longus pees en zet hem vast met nylon klittenband om het te houden op zijn plaats tijdens het experiment, maar zorg ervoor dat de riem niet te strak.
- Informeert de persoon die ze handmatig toegediende schokken te ontvangen. Begin op een laag niveau (wij raden aan 20 v), en het werk tot een niveau dat zij bepalen is oncomfortabel, maar niet pijnlijk. Wij raden de schok duur worden ingesteld op 200 ms, 50 pulsen / sec, een standaard niveau dat wordt gebruikt in een reeks van vroegere vreesconditionering studies 21,24, hoewel anderen hebbengebruikt iets andere duur om hetzelfde gevoel te induceren 25,26.
- Handmatig activeren van de schokken, te beginnen bij 20 volt. Ga verder triggering enkele schokken, geleidelijk verhogen van de intensiteit in 5v stappen, totdat u het onderwerp geeft aan dat schokken oncomfortabel zijn, maar niet pijnlijk. Er moet een groot SCR om de schokken (zie figuur 2 voor een voorbeeld van een reactie op de shock). Noteer de uiteindelijke schokken en onderhouden spanningsniveau voor de rest van het experiment.
3. Dag 1 - Acquisitie
- Richt de onder voorbehoud van hun ogen op het scherm te allen tijde, het vinden van een comfortabele positie dat niet vereist beweging en adem rustig sinds abrupte respiratoire veranderingen kunnen interfereren met SCR. Beide armen moeten worden geplaatst in een ontspannen houding met de polsen op tafel / bureau voor betrokkene of op de armen van een comfortabele stoel. Vertel het onderwerp dat ze visuele prikkels op het scherm zieten ontvangen af en toe schokken. Instrueren het onderwerp van de relatie tussen de stimuli ze zien en wanneer een schok zijn genomen.
- Plaats de stekker van de trekker in de Stimulator en verander de trigger op AcqKnowledge instelling van UIT op EXTERNAL. Wanneer het onderwerp kan beginnen, zet de spanning tot het vermelde niveau en initiëren zowel AcqKnowledge bestand en de experimentele script. Hier gebruiken we E-prime software versie 2.0 uit de psychologie Software Tools, Inc
- Tijdens de overname sessie, een geconditioneerde stimulus (in dit geval een geel vierkant) co-eindigt met een aversieve uitkomst (hier, een milde schok) op een subset (38%) van de proeven, we noemen dit onze CS +. De andere geconditioneerde stimulus (in dit geval een blauw vierkant) wordt nooit gekoppeld aan de US, we noemen dit onze CS-. We maken gebruik van gedeeltelijke versterking van leren traag omdat eerder werk heeft aangetoond dat 100% versterking resulteert in snelle verdwijnen wanneer proefpersonen realiseren tussen deCS + en US veranderd 21. Een gedeeltelijke versterking paradigma maakt het ook mogelijk ons in onze analyse beperken tot niet-versterkte CS + proeven, dus exclusief CS + gerelateerde SCR's die mogelijk zijn verontreinigd door fysiologische reacties op shock (zie figuur 3 voor voorbeelden van geconditioneerde en ongeconditioneerde SCR's voor elk CS type).
- Geconditioneerd stimuli (CSS) worden gepresenteerd voor 4 sec. Er is een 10-12 sec willekeurige variabele inter-trial-interval (ITI), tijdens welke onderwerpen een zwart scherm te bekijken met een wit fixatie kruis in het midden. Elke sessie begint met een scherm dat aangeeft het experiment gaat beginnen (* READY *) en eindigt met een scherm dat aangeeft dat zij met succes had afgerond dat een deel van het experiment (* Je hebt de deel van het experiment *). Tijdens verwerving, een totaal aantal van 10 ongewapende trials CS + trials en 10 CS-proeven worden gepresenteerd naast 6 CS + proeven die worden versterkt door shock.
- Produceer twee verschillende pseudo-randomized orders voor het gehele experiment zodat geen trial-type (CS +, CS-of CS + VS) meer dan twee keer wordt herhaald. Binnen elke bestelling, tegengewicht voor de kleuren van de CSS. Dit moet resulteren in 4 orders waarvan de opdracht is gerandomiseerd tussen individuen binnen elke groep. We raden waaronder ten minste een optreden van opeenvolgende versterkte CS + US proeven om onderwerpen te voorkomen dat de veronderstelling dat ze nooit zullen aaneengesloten schokken te ontvangen (zie tabel 2 voor een voorbeeld van trial bestelling).
4. Dag 2 - Reactivering & Extinction Training
Betreft verdeling:
Willekeurig verdelen alle onderwerpen die voldoende overname van angst vanaf dag 1 (zie onderstaande uitsluitingscriteria) hebben aangetoond in drie groepen:
Groep 1 (reactivering-10 min): ontvangt uitsterven training 10 minuten na het ophalen binnen de verdichting venster
Groep2 (reactivering-6 hr) ontvangt uitsterven training 6 uur na retrieval buiten het venster verdichting
Groep 3 (no-reactivering): ontvangt standaard uitsterven training zonder enige ophalen
- Bij aankomst, moet elk onderwerp worden opgezet als per de stappen 1 - 2.2, met dezelfde te zijn tegen schokken set op dag 1 (geen werk-up nodig is). Er zijn geen nieuwe instructies. Laat het onderwerp zich comfortabel zitten en aandacht te besteden aan de gepresenteerde stimuli, net als de vorige dag.
- Onderwerpen in de reactivering groepen (beide 10 min en 6 uur) ondergaan een van ongewapend presentatie van de CS + (no shock) gevolgd door een 10-min break. Onderwerpen in de no-reactivering groep onderworpen aan de set-up procedure, maar dan direct naar de pauze zonder de reactivering sessie. Tijdens de pauze, de AcqKnowledge opname van de SCR te stoppen, draait u de stimulator spanning op nul en directe onderwerpen 'aandacht op een apart scherm dat een heeftvooraf geselecteerde televisieprogramma (bijvoorbeeld hier we een willekeurig ~ 10 min deel van een "Simpsons" episode). Onderwerpen zullen kijken gedurende 10 minuten terwijl alle elektroden blijven aangesloten.
- Na de pauze, de reactivering-10 min groep verloopt met uitsterven training. Onderwerpen in de reactivering-6 uur groep ruil voor uitsterven training 6 uur later. Voor de no-reactivering onderwerpen, waarvan de helft onmiddellijk ondergaan uitsterven training, en de helft terug 6 uur later voor de opleiding. Deze groep bepaalt voor de herinnering cue, evenals andere tijd verstrijkt tussen reactivering en uitsterven training in elke herinnering groep. Bovendien, aangezien patiënten in de reactivering-6 hr groep kan extinctie ondergaan ofwel in de middag of avond (om voldoende tijd te laten verlopen na reactivering) is het belangrijk om de onderwerpen reactivering-10 min en geen reactivering groep uitgevoerd in de ochtend , 's middags en' s avonds, om een gelijkmatige verdeling van onderwerpen kunnen op elk moment van de dag.
- During uitsterven, in totaal 10 ongewapende CS + trials en 11 CS-trials worden aan elke groep reactivering. Aangezien de CS-niet gepresenteerd tijdens de reactivering sessie moet een extra presentatie worden toegevoegd aan het uitsterven sessie zodat alle CSS gepresenteerd evenveel malen Dag 2. De no-reactivering groep moeten krijgen 11 ongewapende presentatie van elk CS.
- In het uitsterven sessie hervatten het AcqKnowledge opgenomen bestand en terug te keren stimulator spanning op het ingestelde niveau. Instrueer het onderwerp bij te wonen om de experimentele scherm waar de extinctie-script wacht op * READY * scherm. Een herinnering aan de aanwijzingen van de vorige dag is het vaak nuttig. Hervatten met het verlies opleiding script, waarbij het onderwerp herhaalde presentaties van zowel CSS ontvangt zonder shock (zie tabel 2).
5. Dag 3 - Spontane Fear Recovery Assay
- Als het onderwerp op adequate wijze uitsterven leren (zieUitsluitingscriteria hieronder) ze moeten terug naar het lab 24 uur na hun uitsterven sessie. Bij aankomst, moeten ze worden opgezet zoals beschreven in stap 1 en 2.2; spanning is ingesteld op hetzelfde niveau als de overname sessie. Herinner onderwerpen van de aanwijzingen van de voorgaande dagen.
- Elk onderwerp zal worden onderworpen aan een re-uitsterven sessie, waarbij ze weer krijgen 10 ongewapende presentaties van zowel CSS (zie tabel 2), om de mate waarin de angstreacties te herstellen wegens het verstrijken van de tijd te beoordelen. De eerste proef op dag 3 moet een extra CS-(zie tabel 3) en door de oriëntatie reactie op het begin van de sessie genegeerd. (Hetzelfde kan worden gedaan aan het begin van dag 2, maar omdat alleen de gegevens van eind acquisitie wordt gebruikt om uitsterven leren (zie uitsluitingscriteria) te beoordelen en in de uiteindelijke analyse, deze aanbeveling is niet kritisch voor dag 2.) De volgende proef op dag 3 moet worden gecompenseerd tussen CS + en CS-. Spontaneous herstel wordt gemeten door het aftrekken van de SCR tijdens de eerste CS + studie tijdens re-uitsterven van de laatste CS + proef tijdens uitsterven.
- Aan het eind van de sessie het onderwerp ondervraagd en betaalden 40 dollar voor vertrek.
6. Pre-verwerking & Scoren SCR gegevens
- Analyseer de gegevens offline met behulp van AcqKnowledge software. Hier stellen we drie parameters gemeten moeten worden onze gegevens grafiek: t (tijd), delta-t (latency) en pp (piek-piek). Deze metingen de time-punt latency en piek amplitude van de geselecteerde SCR. Begin een nieuw tijdschrift grafiek om uw metingen op te nemen. Pass golfvormen door middel van een low-pass filter om hoogfrequente data te verminderen door het selecteren van Transformeren → Digitaal filter → FIR → Low Pass (we gebruiken de standaardinstellingen die in de Erken Software Guide: afgesneden frequentie = 25; 32 coëfficiënten; filter hele golf). Strijk de gegevens om lawaai te verminderen door selectieting Transform → smoothing → transformatie hele golf (we gebruiken de standaardinstellingen die in de Erken Software Guide: gemiddelde waarde glad; glad factor = 3 monsters; filter hele golf, maar met een hogere sampling rates of verhoogde ruis, kan de smoothing factor zijn verhoogd).
- Selecteer een huidgeleiding respons tijdens elk onderzoek door het nemen van de basis naar top verschil voor de grootste golfvorm (in microsiemens, ps) die begint binnen van 0,5 tot 4,5 sec venster volgende stimulus onset. Het begin van de SCR moet beginnen binnen dit venster te kwalificeren als een stimulus-specifieke reactie, maar kan langer duren om piek. SCR kan worden opgenomen totdat ze piek amplitude zijn de reacties die piek na 5 sec niet worden beschouwd als stimulus-specifiek en moet worden genegeerd. Dit is precies de reden waarom versterkte proeven mogen niet worden geregistreerd: een SCR die nog steeds een piek aan het einde van de proef kan worden beïnvloed door de schok en produceren daaropvolgende stijgingen van de SCR die zijn not verband met de CS zelf.
- Een reactie piek criterium van 0,02 microseconden moet worden benut; reacties onder dit criterium worden doorgaans beschouwd als ruis en gecodeerd als nul. Na het scoren, moeten alle onversterkte studies voor elk onderwerp worden gedeeld door gemiddelde dat respectieve onderwerp Amerikaanse reactie. Dit wordt verkregen door het gemiddelde van alle SCR shock onderzoek bij de verwerving sessie en rekeningen voor individuele verschillen in reactiviteit shock onderwerp. Tot slot moeten alle proeven worden vierkantswortel omgevormd tot scheefheid te verminderen.
Timing
Dag 1
Voorbereiding: 5-7 min
Acquisitie Script: ≈ 9 min
Totaal: 15 min
Dag 2
Voorbereiding: 5-7 min
Reactivering Script: ≈ 30 sec
Break: 10 min
Extinction Script: ≈ 5,5 min
Totaal: 20 min
Dag 3
Voorbereiding: 5-7 min
Re-Extinction Script: ≈ 6,5 min
Totaal: 15 min
7. Representatieve resultaten voor elke groep
Aan het einde van dag 1 (overname), onderwerpen moeten differentieel SCR aantonen aan de CSS, dat wil zeggen hoger reageren op de CS + als te vergelijken met de CS-(zie figuur 4, acquisitie, voor een voorbeeld van individuele vakken). Tegen het einde van Dag 2 (reactivering / extinctie) dient deze differentiële respons verminderen, zodat er geen verschil meer tussen CS + en CS-(zie figuur 4 uitsterven, voor een voorbeeld van individuele subjecten). Bij de behandeling van spontaan herstel op dag 3, zouden we verwachten dat er een gebrek aan angst herstel te zien in de reactivering-10 min groepomdat deze groep kreeg uitsterven opleiding binnen de verdichting venster, waardoor het oorspronkelijke geheugen spoor te reconsolidate met deze nieuwe veiligheidsinformatie, en het voorkomen van het herstel van de angstreacties (zie figuur 4, bovenste paneel, voor een voorbeeld van een individueel onderwerp). We zouden verwachten dat substantieel herstel van angst echter te zien, voor de CS + (niet CS-) in de reactivering-6 hr groep die uitsterven opleiding buiten de verdichting venster (zie figuur 4, middenpaneel, voor een voorbeeld van een individu onderwerp) en de no-reactivering groep die standaard extinctie opleiding (zie figuur 4, onderste paneel, voor een voorbeeld van een individu).

Figuur 1. Voorbeeld van SCR tijdens elektrode opgezet. Black, verticale pijlen geven de plaats waar proefpersoon werd geïnstrueerd omdiep adem, die resulteerde in een duidelijke toename van de SCR. Klik hier om een grotere afbeelding te bekijken .

Figuur 2. Voorbeeld SCR tijdens shock opwerkprocedure. Zwarte verticale pijlen geven punt waarop shock werd toegediend. Grey pijlen geven de piek van huidgeleiding stijging in antwoord op de schok. hier grotere figuur weergeven .

Figuur 3 Voorbeeld geconditioneerde reactie (CR) aan het begin van de CS + gevolgd door een grotere ongeconditioneerde respons (UR) de levering van shock (US);. Volgende proces is dat van een CS-. Grijze pijlen geven de CS begin en einde; zwarte pijlen indicaten de levering van de VS. Klik hier om een grotere afbeelding te bekijken .

Figuur 4 Voorbeeld van acquisitie, uitsterven en spontaan herstel in een individueel onderwerp van elke experimentele conditie (bovenste paneel: reactivering-10 min; middenpaneel: reactivatie-6 uur; onderpaneel: geen reactivering)..

Tabel 1. Tabel van relevante producten en apparatuur.

Tabel 2. Verdichting protocol en de tijdlijn.

Tabel 3. Een voorbeeld van proef om voor elke fase van deexperiment. Opmerking een extra CS-moet worden toegevoegd aan Dag 2,2 (extinctie) in beide groepen herinnering om rekening te houden voor de reactivering van de CS +. De eerste CS-trial op dag 3 (aangegeven met grijze achtergrond) wordt door de reactie oriënteren aan het begin van de zitting genegeerd.
Experimentele opzetten
De setup is voorzien van een PC met E-prime, een Mac met te erkennen, een MP100 Biopac systeem, en een schok doos. In-line code is geprogrammeerd in de E-prime script te communiceren met de Erken-software en de schok doos. Dit maakt E-prime signalen af aan aangevende gebeurtenis aanzetten, en signalen Erken de schok vak shock administratie te activeren. De output van E-prime wordt via een printerpoort de Biopac, dat de gebeurtenissignaal zijn beurt stuurt de Mac opname fysiologie met bevestigen via een USB-verbinding die bij het Biopac systeem, alsmede de schok box (zie Tabel 1 voor de prodduct informatie).
Uitsluitingscriteria
Onderwerpen worden uitgesloten alvorens alle experimentele sessies of gegevensanalyse indien zij aantonen een van de volgende:
- Het niet detecteerbaar of betrouwbaar SCR laten zien - bij de toepassing van en het testen van huidgeleiding respons kan onderwerpen aan te tonen plat SCR. Als dit gebeurt, is het raadzaam om een extra 5 minuten wachten als reactie niet onmiddellijk komen, of voor bellen op met in de geleiding gel (in dit geval elektroden moeten worden verwijderd, gereinigd en opnieuw gevuld). Onderwerpen die platte SCR reactie, zelfs na deze probleemoplossing strategieën moeten worden vrijgesteld van het experiment.
- Het niet verkrijgen van de angst respons (op dag 1) aan te tonen: differentieel SCR op de CS + en CS-aan het eind van de overname zitting (gemiddelde van de tweede helft van de overname studies) die in de verkeerde richting (dwz CS-> CS +) of die te klein conclude leren heeft plaatsgevonden (dat wil zeggen, verschil is minder dan 0,1 microseconden).
- Niet uitsterven van de angstrespons (op dag 2) tonen: differentiële SCR de CS + en CS-eind van het uitsterven zitting (op de laatste proef) die groter dan 0,1 microseconde.