1. Preoperatieve zorg
- Verwijder voedsel van ratten 's nachts voor de operatie.
- Laten anesthesie in de kamer met 4-5% isofluraan en O2 flow van 2 l / min.
- Shave buik van borstbeen tot bekken met behulp van elektrisch scheerapparaat.
- Plaats verdoofde rat in rugligging op isothermische verwarmingskussen.
- Breng oogzalf (Vitagel) voor het plaatsen van de ratten 'snuit in de neuskegel.
- Houd anesthesie met isofluraan concentratie van 2-3% en O2 flow van 2 l / min.
- Desinfecteer de huid met Betadine-oplossing.
- Bevestig diepte van de anesthesie met een pincet snufje tussen de tenen van de achterpoten.
- Dien 5,7 mg / kg Enrofloxacine intraperitoneaal als perioperatieve antibioticaprofylaxe, en 1 mg / kg Flunixine voor pijnstilling.
2. Mediane Laparotomie
- Voer middellijn incisie met behulp van scalpel vanaf net onder xyphoid proces (Blade nr. 10).
- Mobiliseer de omtrek huid tegen Onderstrying buikspieren met behulp van Metzenbaum schaar.
- Open buikholte.
- Installeer oprolmechanismen het best mogelijke blootstelling van de operatie gebied te vergemakkelijken.
3. Biliopancreatische en Alimentary Limb
- Bepaal waar de twaalfvingerige darm of proximale jejunum loopt onder de dikke darm.
- Transect dunne darm ongeveer 10 cm aborally van hier en ligeren beide uiteinden van de darm (PDS 5-0).
- Plaats proximale stomp van de twee uiteinden in de linker bovenste kwadrant van de buik, maar wordt straks gebruikt worden om de biliopancreatische onderdeel van Roux-en-Y reconstructie te vormen.
- Plaats distale stomp van de twee uiteinden in de rechter bovenbuik van de buik want het zal later worden gebruikt om het maagdarmkanaal onderdeel van Roux-en-Y reconstructie te vormen.
4. Jejuno-jejunostomie
- Identificeer caecum met ileocoecal ventiel en ileum.
- Oraal Volg ileum voor ongeveer 25 cm. De jejuno-jejunostomie zullen hier worden geplaatst als uitgangspuntvan de gemeenschappelijke kanaal Roux-en Y-reconstructie.
- Ophalen biliopancreatische ledematen van links bovenste kwadrant van de buik en plaats het naast gemeenschappelijke kanaal waar je van plan bent jejuno-jejunostomie uit te voeren.
- Veilig biliopancreatische ledematen en gemeenschappelijk kanaal met behoud steek (PDS 6-0).
- Incisie beide lussen over ongeveer 10 mm met behulp van micro-schaar.
- Maak jejuno-jejunostomie door het uitvoeren van side-to-side anastomose met behulp van onderbroken hechtingen (PDS 6-0).
- Eerste volledige rugzijde en vervolgens ventrale zijde van anastomose.
5. Maag Pouch
- Identificeer gastro-oesofageale overgang.
- Mobiliseer dit gebied door het ontleden van maag-lever-en gastro-milt ligamenten met behulp van Metzenbaum schaar.
- Naar links maag slagader en vagale vezels van links para-oesofageale bundel zijdelings aan grote bloedingen en vagale schade aan de zenuwen wanneer kleine maag zakje is gemaakt te voorkomen.
- Expose gastro-oesofageale junction door het plaatsen van een wattenstaafje retro-oesophageally.
- Stollen kleine schepen van de frontale maag met behulp van commercieel beschikbare cauterisatie-apparaat - ook om bloedingen te voorkomen.
- Transect maag ongeveer 5 mm onder gastro-oesofageale overgang creëren van maag zakje met een omvang van niet meer dan 2-3% van de originele maag grootte met behulp van fijne, gebogen schaar.
- Sluiten maag overblijfsel (PDS 5-0).
6. Gastro-jejunostomie
- Ophalen voedings ledematen van rechts bovenste kwadrant van de buik en plaats hem naast de maag zakje.
- Maak Gastro-jejunostomie door het uitvoeren van end-to-side anastomose (PDS 7-0).
- Eerste complete achterkant en dan voorkant van anastomose.
7. Abdominale Sluiting
- Verminder anesthesie door het verminderen van isofluraan concentratie tot 1,5%.
- Sluit spierlaag van buikwand met een continue hechtingen (PDS 4-0).
- Dien 100 pi van 0,3 mg / mlbuprenorfine subcutaan oplossing voor pijnstilling.
- Verder terug te dringen isofluraan concentratie tot 1%.
- Sluit de huid met behulp van onderbroken hechtingen (Vicryl 4-0).
8. Postoperatieve zorg
- Stop met isofluraan en ga verder met O2.
- Dien 5 ml warme zoutoplossing voor vloeistof substitutie in drie subcutane depots.
- Positie rat onder rood licht tot volledig herstel.
- Zet de rat om naar huis te kooi.
9. Representatieve resultaten
Dieren en huisvesting
Mannelijke Wistar ratten (Harlan Laboratories Inc, Sleedoorn, Verenigd Koninkrijk;. Elevage Janvier, Le-Genest-St Isle, Frankrijk) met een gewicht tussen 350 en 500 g werden individueel gehuisvest in een 12 uur / 12 uur licht-donker cyclus bij een kamertemperatuur 21 ± 2 ° C. Water en standaard chow waren ad libitum beschikbaar, tenzij anders vermeld. Alle experimenten werden uitgevoerd onder een vergunning van de Home Office, Verenigd Koninkrijk (PL70-6669) of goedgekeurd door de Veterinair Bureau van het kanton Zürich, Zwitserland. Alle ratten kregen een week acclimatiseren alvorens te worden gerandomiseerd naar gastric bypass of sham-operatie. Na de operatie, ratten ontvangen vloeibaar dieet gedurende 3 dagen voor de toegang tot de normale chow werd opnieuw geïnstalleerd.
Lichaamsgewicht
De gegevens van onze rat gastric bypass-model zijn in overeenstemming met eerdere bevindingen die de maag-bypass operatie effectief is om het lichaamsgewicht te verminderen en vooral voor gewichtsverlies (figuur 2) te behouden. Gemiddelde pre-operatieve lichaamsgewicht van ratten gebruikt voor maag-bypass en sham-activiteiten was gelijk (sham: 433,4 ± 8,3 g vs bypass: 420,7 ± 8,4 g, p = 0,28). Vijf dagen na de operatie schijn bediende woog aanzienlijk meer in vergelijking met gastric bypass ratten (sham: 422,2 ± 8,3 g vs bypass: 374,7 ± 7,6 g, p <0,001). Op postoperatieve dag 60, verschil in lichaamsgewicht was bijna 170 g (sham: 533,2 ± 8,1 g vs bypass: 366,2 ± 10,8 g, p <0,001).
De inname van voedsel
Voedselinname gevolgd dergelijke patronen lichaamsgewicht en werd verminderd maagbypass ratten ten opzichte van schijn-geopereerde ad libitum gevoede ratten. Figuur 3 toont de gemiddelde dagelijkse voedselopname beide groepen (postoperatieve dag 1-60). Dagelijkse inname van voedsel was consequent lager na gastric bypass (sham: 29,9 ± 0,2 g vs bypass: 25,7 ± 0,3 g, p <0,001).
Darmhormonen
Bloed van alle ratten werd verzameld op de dag van stopzetting van het onderzoek 8,16. Dieren hadden ad libitum voedsel Toegang tot de avond voor en werden onthoofd in het begin van het licht cyclus op dag 60 na de operatie. Blood verkregen onmiddellijk gecentrifugeerd bij 3000 rpm gedurende 10 minuten bij 4 ° C, en bewaard bij -20 ° C werden de monsters in tweevoud in een punt. PYY-achtige immunoreactiviteit was meadoeld orgaan een specifieke en gevoelige radioimmunoassay, welke maatregelen zowel de volledige lengte (PYY1-36) en fragment (PYY3-36). GLP-1 werd gemeten door opgericht in-house radioimmunoassays 17,18. Verschillen in inname van voedsel kan gedeeltelijk worden verklaard door de verhoogde postprandiale plasmaspiegels van peptide YY (PYY) en glucagon-like peptide 1 (GLP-1) als gastric bypass ratten toonde significant hogere niveaus voor PYY (sham: 26 ± 2 pmol / l vs . bypass: 141 ± 14 pmol / L, p <0,001) en GLP-1 (sham: 40 ± 5 pmol / L versus bypass: 215 ± 23 pmol / L, p <0,001; figuur 4).

Figuur 1. Gastric bypass anatomie. Schematische weergave van de dunne darm anatomie voor (A) en na (B) gastric bypass operatie. De verschillende tinten rood ongeveer vertegenwoordigen overeenkomstige segmenten van de dunne darm met het medium rode die de voordarm(Slokdarm, maag twaalfvingerige darm en proximale jejunum), de lichtrode die de middendarm (proximale en midden jejunum, proximale ileum) en de donkerrode die de einddarm (ileum, caecum).

Figuur 2. . Gewichtsverlies na de maag-bypass operatie bij ratten verandering in lichaamsgewicht voor een representatieve groep van ratten na gastric bypass (-) (n = 52) en schijn-geopereerde ratten (-) (n = 52) gedurende een observatieperiode van 60 dagen. Gegevens werden samengevoegd vorige publicaties 6,8-10 en wordt als gemiddelden ± SEM (*** = p <0,001).

Figuur 3. Gemiddelde inname van voedsel na de maag-bypass operatie bij ratten. Gemiddelde dagelijkse inname van voedsel van een representatieve groep van ratten na gastric bypass (zwart, n = 52) en sham-geopereerde ratten (wit, n = 52) gedurende eenpostoperatieve periode van 60 dagen. Gegevens werden samengevoegd vorige publicaties 6,8-10 en wordt als gemiddelden ± SEM.

Figuur 4. Postprandiale PYY en GLP-1 serumspiegels na de maag-bypass operatie bij ratten. Postprandiale PYY en GLP-1 serum niveau voor gastric bypass ratten (zwart, n = 18) en sham-geopereerde ratten (wit, n = 22). Gegevens werden samengevoegd vorige publicaties 8,16 en wordt als gemiddelden ± SEM.