Het novembernummer van het Journal of Visualized Experiments begint met een reeks gedragsexperimenten voor het meten van het grijpvermogen bij primaten. Onderzoekers van de Universiteit van Fribourg demonstreren vier grijp- en reiktaken, die allemaal gemeenschappelijke stappen volgen voor het comfortabel fixeren van het dier en het correct positioneren van de kop. De Brinkman Board-test wordt gebruikt om het reiken naar statische objecten te beoordelen, terwijl het Rotating Brinkman Board een conditie presenteert waarbij dieren de positie van het object moeten anticiperen. De Brinkman Box-test maakt het mogelijk om de behendigheid te onderzoeken onder condities waarbij de aap minder vrijheidsgraden heeft om de grijptaak uit te voeren en geen gebruik kan maken van visuele geleiding voor de beweging. Terwijl de brinkman board- en box-tests uitsluitend vertrouwen op de analyse van video-opnamen gemaakt tijdens de experimenten, beschikt het apparaat voor de lade-reiktaak over detectoren die grijp- en belastingskrachten alsook de ladepositie bewaken om data te genereren, waardoor deze test geschikt is voor het meten van zowel kracht als grijpvermogen. In combinatie bieden deze vier tests een krachtige aanpak om de motorische controle in de distale voorpoot te beoordelen, en de groep uit Fribourg presenteert data uit zowel laesiestudies als experimenten gericht op het testen van potentiële therapieën voor ruggenmergletsel.
In Clinical and Translational Medicine werken samenwerkers van de Division of Surgical Research aan het University Hospital Zurich en het Institute of Laboratory Animal Science aan de Universiteit van Zurich samen om een radiotelemetrie-apparaat in muizen te implanteren, dat gebruikt kan worden voor het uitvoeren van fysiologische metingen bij vrij bewegende dieren. De apparaten bestaan uit twee elektroden, die in staat zijn om biopotentiële activiteit (ECG, EEG of EMG) alsook temperatuur te meten, en een lichtgewicht radiozender (1-200 Hz bandbreedte) die in de buikholte kan worden geïmplanteerd. De stress van dierhantering alsook anesthesie zijn bekende storende factoren die fysiologische metingen beïnvloeden; radiotelemetrie-apparaten zijn daarom een handige manier om fysiologische data te verkrijgen van dieren in een ongestoorde, natuurlijke staat, en om gelijktijdig metingen bij meerdere dieren uit te voeren.
JoVE breidt zijn verzameling electroporatieprotocollen verder uit met een methode voor het introduceren van macromoleculen in het craniofaciale mesenchyem van ontwikkelende Xenopus laevis-kikkervisjes, afkomstig van het Liu Lab aan King's College London. Xenopus-kikkervisjes worden overgebracht naar een electroporatiekamer, waar ze kunnen worden geïnjecteerd met nucleïnezuren en vervolgens worden onderworpen aan electroporatie, waardoor expressievectoren of morpholino's in het ontwikkelende craniofaciale weefsel worden afgeleverd. Genoverdracht in gedifferentieerd kraakbeen is inherent problematisch, en het Liu lab laat zien dat morpholino's via electroporatie kunnen worden geïntroduceerd in procartilagineuze en cartilagineuze weefsels van het Xenopus-kikkervisje gedurende verschillende ontwikkelingsstadia.
In Bioengineering illustreert de groep Zuckerman van het Lawrence Berkeley National Laboratory hun methode voor de synthese van peptoiden, een klasse biologisch actieve organische moleculen die lijken op peptiden, maar waarbij de zijketens gebonden zijn aan het stikstofatoom van de peptidebinding in plaats van aan de alfa-koolstof, wat hen resistent maakt tegen proteolyse. De groep Zuckerman demonstreert submonomeersynthese, waarbij peptide-monomeren sequentieel worden toegevoegd in bromoacetylering- en bromideverplaatsingsreacties, waardoor de lengte en samenstelling van de peptoidketen nauwkeurig kunnen worden gecontroleerd. Bovendien vereenvoudigt het feit dat de synthese op amidehars wordt uitgevoerd, en dus een vaste-fasesynthese is, de zuivering van de gesynthetiseerde peptoiden aanzienlijk. Deze auteurs laten ook zien hoe de nieuw gesynthetiseerde peptoiden kunnen worden geïnduceerd om zichzelf te assembleren tot hooggeordende structuren, zogenaamde nanosheets, die gevisualiseerd kunnen worden met fluorescentie- en scanning-elektronenmicroscopie. Deze nanosheets zouden kunnen dienen als een potentieel platform voor eiwit- en membraanmimetica.
Later in de maand presenteert JoVE voor onze sectie Immunologie en Infectie een assay voor het meten van fagocytische activiteit in cellen die zijn blootgesteld aan klinische antilichaammonsters. Samenwerkers van het Massachusetts General Hospital en Dartmouth College laten via time-lapse videomicroscopie zien dat THP-1-cellen beads die gecoat zijn met antilichaam-gebonden antigenen zullen omsluiten, en presenteren een plaat-gebaseerde flowcytometrie-methode voor het kwantificeren van de mate van fagocytose. Onze auteurs gebruiken deze methode om het vermogen van verschillende antilichaammonsters om fagocytose te induceren te bepalen, zoals die van HIV-patiënten die zowel behandeld als onbehandeld zijn met antiretrovirale therapieën.
Deze samenvatting van de inhoud van JoVE in november biedt een kort overzicht van de hoogtepunten van JoVE voor deze maand. Andere opmerkelijke artikelen omvatten methoden voor live-imaging van cytoskeletdynamiek in endotheliale cellen, het meten van calciumflux in cardiomyocyten en slice-elektrofysiologie van volwassen geboren neuronen in de bulbus olfactorius.