Zenden Plant Virussen gebruiken Wittevlieg

Samenvatting

Beter inzicht in en ons vermogen om veel van de insecten overgedragen plantenvirussen beheerder vereist het gebruik van de vector. Insect overdracht van plantenvirussen is een tritrofe interactie, en als zodanig vereist het manipuleren van insecten, virussen, en plant. Vectoren worden gekweekt in grote aantallen en gemanipuleerd op zodanige wijze dat een hoge mate van overdracht op testplanten verzekeren. De basisprincipes van het houden van en het manipuleren van de witte vlieg, Bemisa tabaci ( Hemiptera: Aleyrodidae), Wordt een vector van plantaardige virussen behorend tot verschillende opkomende planten virus geslachten, wat neerkomt op een groot aantal economisch belangrijke virussen gepresenteerd.

Samenvatting

Wittevlieg, Hemiptera: Aleyrodidae, Bemisia tabaci, een complex van morfologisch indistinquishable soorten ^5, zijn vectoren van veel plant-virussen. Verschillende genera van deze witte vlieg-overgebrachte plantenvirussen (Begomovirus, carlavirus, Crinivirus, Ipomovirus, Torradovirus) zijn enkele honderden soorten van opkomende en economisch belangrijke pathogenen van belangrijke voedsel-en vezelgewassen (beoordeeld door ^9,10,16). Deze virussen niet repliceren in hun vector, maar toch worden gemakkelijk verplaatst van plant tot plant door de volwassen wittevlieg met verschillende middelen (beoordeeld door ^{2,6,7,9,10,11,17).} Voor de meeste van deze virussen witte vlieg voeding vereist voor het verkrijgen en inoculatie, terwijl voor andere slechts sonderen vereist. Veel van deze virussen kunnen of kunnen niet gemakkelijk worden overgebracht door andere middelen. Daarom houden van het virus culturen, biologische en moleculaire karakterisering (identificatie van gastheer bereik en symptomen) ^3,13, Ecologie ^2,12, vereisen dat de virussen om experimentele hosts met behulp van de witte vlieg vector worden overgedragen. Naast de ontwikkeling van nieuwe benaderingen voor het beheer, zoals de evaluatie van nieuwe chemische verbindingen ¹⁴ of ^15, nieuwe culturele benaderingen ^1,4,19, of de selectie en ontwikkeling van resistente cultivars ^7,8,18, vereist het gebruik van wittevlieg voor virusoverdracht. Het gebruik van witte vlieg overdracht van plantenvirussen voor de selectie en ontwikkeling van resistente cultivars in fokprogramma's is bijzonder uitdagend ^7. Effectieve selectie en screening op resistentie telt grote aantallen planten en er is behoefte aan 100% van de planten geënt om het aantal genotypes die resistentiegenen bezitten voorbeeld. Deze studies maken gebruik van zeer grote aantallen viruliferous witte vliegen, vaak meerdere keren per jaar.

Wittevlieg onderhoud hier beschreven kan honderden of duizenden genererenvan de volwassen wittevlieg op planten per week, het hele jaar door, zonder de besmetting van andere plantaardige virussen. Planten vrij zijn van zowel wittevlieg en virus moet worden geproduceerd om in de witte vlieg kolonie elke week. Wittevlieg culturen moet vrij zijn van witte vlieg pathogenen, parasieten, en parasitoiden dat wittevliegpopulatie en / kan verminderen of verminderen van de transmissie-efficiëntie van het virus worden bewaard. Kolonies die in de beschreven wijze snel worden opgeschaald getallen populatie nodig verhogen of verlagen, en kan worden aangepast aan het toevoeren voorkeuren van de witte vlieg gebaseerd op de plant samen met het virus tegemoet.

Er zijn twee basistypen van wittevlieg kolonies die kunnen worden gehandhaafd: een nonviruliferous en een viruliferous wittevlieg kolonie. De nonviruliferous kolonie bestaat uit witte vliegen grootgebracht virusvrije planten en kan de wekelijkse beschikbaarheid wittevlieg die kunnen worden gebruikt om virussen te brengen van verschillende culturen. De viruliferous wittevlieg kolonie,samengesteld wittevlieg grootgebracht virus-geïnfecteerde planten kan wekelijks beschikbaarheid witte vliegen die het virus verkregen waardoor het overslaan van een stap in het virus transmissieproces.

Protocol

1. Wittevlieg Kolonie Onderhoud

1. Eisen aan de omgeving: Whitefly kolonies moeten op een gecontroleerde groei ruimte worden gehandhaafd. Reguleren van de relatieve vochtigheid, temperatuur, fotoperiode en lichtintensiteit zijn essentieel voor optimale koloniegroei (figuur 1). Een temperatuur van 28 ° C, 30-50% relatieve vochtigheid, en een 14 uur fotoperiode zal een kolonie die zich ontwikkelt van ei tot volwassen opkomst in 18 dagen (dit varieert met de waardplant) opleveren. Relatieve luchtvochtigheid moet onder 70% blijven om de groei van insecten en planten schimmels ontmoedigen. Kunstmest prijzen en drenken moet worden teruggebracht tot schimmels en zout accumulatie ontmoedigen. De lichtintensiteit van de kolonie zou moeten zijn vrij hoog. VHO TL-lampen gebruikt in voldoende aantallen om ongeveer 800-1000 ft kaarsen bij de luifel hoogte te genereren zijn voldoende voor de meeste planten (dwz. Katoen, gewone boon, lima bonen, tomaat). Netheid is essentieel inwittevlieg een kolonie om optimale kweekomstandigheden te behouden.
2. Kolonie Kooien: Wittevlieg moet worden gehandhaafd op planten in kooien, in plaats van vrij in de groei kamer. Kooien kunnen worden vervaardigd van verschillende materialen, maar moet zorgen voor: ventilatie, het gemak van toegang, de mogelijkheid om witte vlieg ontsnappen of infiltratie, en van voldoende omvang te verhinderen om genoeg planten te behouden om de wittevliegpopulatie nodig genereren. Goede resultaten zijn verkregen met organza plus aluminium screening (voor kracht) als witte vlieg-proof screening (zie tabel van specifieke apparatuur en benodigdheden).
3. Kolonie Plant Voorbereiding: De soort van de plant gekozen is een belangrijke overweging bij het ​​starten van een witte vlieg kolonie. De installatie moet kunnen een hoge insectenbevolking ondersteunen zonder instorten. De gekozen een nonviruliferous kolonie plant moet een nonhost voor het virus of virussen die zijn bedoeld te dienen teneinde besmetting kolonie voorkomen en als het handhaven van een viruli zijnferous kolonie, moet hij gastheer van het virus te zijn. De planten moeten vrij snel uitgroeien tot ontstaan ​​van nieuwe volwassenen te ondersteunen binnen 18 dagen worden ingevoerd om de kolonie, maar niet zo snel als de kooien binnen vier weken ontgroeien. Dwerg, bush, of een patio-achtige planten cultivars worden aanbevolen als ze produceren vaak een soortgelijke bladoppervlak om groter cultivars, maar zonder de stamverlenging.
4. Het is zeer belangrijk om achter de kolonie planten in kassen in kooien die witte vliegen en andere insecten sluiten. Gebruik van planten die zijn besmet met witte vliegen, trips, mijten of voordat ze in de kolonie kan de kolonie te storten. Aangetaste planten hebben ook het potentieel om te worden besmet met insecten overgebrachte virussen die zal interfereren met virusoverdracht studies.

2. Wittevlieg Kolonie Oprichting

1. Start een kolonie voor het eerst met behulp van schone witte vliegen - die vrij zijn van plantenvirussen, andere insecten en insecten ziekteverwekkers. Deze kunnen worden verkregenvan medewerkers of het veld. Als veld verzameld, moet wittevlieg worden gedurende ten minste 8 weken op nonhost planten van de plant virus, en controle op afwezigheid van plantaardige symptomen om zeker te zijn dat ze vrij zijn van plantenvirussen.
2. Week 1: Introduceer schoon wittevlieg op de eerste kooi van planten. Wittevlieg kan worden geïntroduceerd door aspiratie van bekende nummers of door zachtjes te schudden wittevlieg uit een andere bron planten, afhankelijk van de eisen aan de kolonie. In week 1, zijn wittevlieg leggen eieren op de onderkant van de plant blad oppervlakken. Een geschatte populatiegrootte kan worden voorspeld voor elke ontstaan ​​op basis van het aantal volwassenen gebruikt om eieren en het gemiddelde aantal gelegd door de vrouwelijke witte vlieg op de waardplant betrokken eieren leggen.
3. Week 2: Begin met een andere kooi door de invoering van wittevlieg om nieuwe waardplanten om eieren te leggen. De planten in de kooi begonnen in week 1 hebben eieren, en enkele onvolwassen witte vliegen die de onderzijde van de bladeren (figuur 2). Sommigevolwassen wittevlieg geïntroduceerd tijdens week 1 zullen nog in leven zijn.
4. Week 3: Begin een derde kooi door de invoering van wittevlieg op nieuwe installaties om eieren te leggen. De planten in de kooi begonnen in week 1 onvolwassen en volwassen witte vliegen vele nieuwe opkomende hebben en moet er een merkbare verhoging van de volwassen wittevliegpopulatie zijn. De planten in de kooi begonnen in week 2 zal veel eitjes en onvolwassen witte vliegen die de onderzijde van de bladeren.
5. Week 4: Begin een vierde kooi door de invoering van wittevlieg op nieuwe installaties om eieren te leggen. De planten in de kooi begonnen in week 1 zal veel volwassen witte vliegen die ongeveer een week na opkomst. De planten in de kooi begon in week 2 zal hebben veel nieuwe volwassen wittevlieg in opkomst en er moet een zeer merkbare toename van wittevliegpopulatie zijn. De planten in de kooi gestart tijdens week 3 zullen veel eitjes en onvolwassen witte vliegen die de onderzijde van de bladeren.
6. Wekelijks na de eerste 4 weeks: Elke week start een nieuwe kooi door de invoering van de volwassen wittevlieg uit de vierde oudste kooi (de kooi gestart in week 1) op nieuwe installaties in een nieuwe, schone kooi. De oude kooi moet worden verwijderd en de planten weggegooid. Deze wittevlieg zijn ongeveer 1 week na opkomst. In het geval van de viruliferous kolonie, zullen deze wittevlieg virus doorgeven aan de nieuwe installaties alsmede eieren leggen voor de volgende generatie van de wittevlieg.
7. Plan transmissie experimenten om de wittevlieg die zal ontstaan ​​in de derde week van de kooi te gebruiken. Indien meer wittevlieg nodig kan installatie aantal worden verhoogd en witte vliegen kunnen worden toegevoegd aan de week 1 kooi wittevliegpopulatie verhogen.

3. Methode voor het Enten van Test Planten

1. Naar hoge transmissiesnelheden te verzekeren: 1) Wittevlieg moeten worden behandeld zo voorzichtig mogelijk om schade aan de insecten die transmissiesnelheden zal verminderen voorkomen; 2) Er moet voldoende bladoppervlak beschikbaar voor wittevlieg te eit wordenhaar sonde of diervoeders. Een toename van de acquisitie tijd of een toename van het aantal overname waardplanten kan verhogen lage tarieven van de besmettelijkheid in de test planten als gevolg van verdringing in zowel de verwerving of inenting toegang periode.
2. Collectie van Wittevlieg. Hieronder volgt een procedure voor het verzamelen en het vervoer van de precieze aantallen wittevlieg nodig zijn voor experimentele doeleinden. Om grote aantallen whiteflies bewegen, zoals nodig voor resistentie screening bijvoorbeeld, is het alleen nodig om voorzichtig schudden witte vlieg-aangetaste planten via testplanten of virus-geïnfecteerde acquisitie systemen (en later de testplanten). Zorg ervoor te schudden de planten gedurende vele locaties om aggregatie effecten te minimaliseren.
3. Nieuw opgedoken volwassen witte vliegen (1-3 dagen na opkomst) zijn zeer actief en voeden vaak zo de neiging om de hoogste overdrachtssnelheden te geven ^4. Oudere wittevlieg nog steeds uitgezonden, maar bij een lagere frequentie. Meerdere wittevlieg per proeffabriek (15-40 per plant) moet worden gebruikt voor de hoge tarieven van de transmissie sinds een verhouding van 1 wittevlieg per plant vaak resulteert in onacceptabel lage transmissiesnelheden ^3,4. Het aantal benodigde afhangen van het virus en de soort van de verwerving en testplanten.
4. Monteer aspiratie apparaten en collectie flesjes. (Figuur 3)
5. Met een hand, houden een gele plastic kaart in de kolonie kooi die bevat de wittevlieg worden verzameld. Tik voorzichtig de planten aan te moedigen de volwassen wittevlieg te vliegen. Wittevlieg zal worden aangetrokken door de gele kaart en zal vliegen van de fabriek naar de kaart, waar ze kunnen worden verzameld met behulp van een afzuiger en een zeer zachte adem. Zuig nooit wittevlieg die voeden op planten. Hun stiletten zijn ingebed in de plant tijdens het voeden, zodat ze af te trekken van de planten zullen hun stiletten breken en waardoor ze niet in staat om ofwel te verwerven of te verzenden virus (Figuur 4).
6. Verzamel ongeveer 20 volwassen witte vliegen in een enkele collectie flacon om fysieke schade aan de insecten uit herhaalde aspiraties (figuur 5) te minimaliseren.
7. Om de collectie flacon wijzigen, tik dan zachtjes de flacon op een hard oppervlak en cap met Parafilm terwijl de wittevlieg zijn gedesoriënteerd uit het tikken.
8. Zet een nieuwe verzamel flacon op de afzuiger en herhalen totdat het aantal wittevlieg nodig zijn verzameld. Wittevlieg kan de verzameling flacons bij kamertemperatuur blijven gedurende enkele uren.
9. Acquisitie. Wittevlieg zijn op een virus geïnfecteerde planten geplaatst en mogen voeden met de geïnfecteerde planten gedurende 48-72 uur. Overname periodes langer dan 72 uur in het algemeen niet te verhogen overdrachtssnelheden. Voor die virussen overgedragen in een persistente of semipersistent wijze 1 uur en enkele uren, respectievelijk voldoende acquisitie toegang perioden (tabel 1). De beste resultaten worden verkregen wanneer whiteflies krijgen toegang tot planten in kooien die de insecten beperken tot een enkele plant ofmeerdere planten. Maar sommige experimenten vereisen verkrijging van bepaalde bladeren waarbij clip kooien worden gebruikt. Bij gebruik clip kooi is belangrijk de witte vlieg voeding voorkeur voor de onderzijde van de bladeren plaats. Ook verdringing van wittevlieg in clip kooien kunnen verminderen overdrachtssnelheden - acceptabele tarieven van overdracht zijn bereikt met behulp van 10 vrouwelijke wittevlieg per clip kooi van 2,5 cm diameter.
10. Enten. Bereid een kooi op de omvang van de inoculatie en plaats de testplanten binnen. Als er slechts een plant te worden ingeënt overwegen een enkele plant kooi. Als er meer dan een plant wordt geënt overwegen een kleine PVC-frame / organza zakje kooi of een aluminium kooi (Figuur 6). De grootte van de kooi voor enten iets groter de grootte van de plant (s) worden geïnoculeerd. Hogere transmissiesnelheden worden verkregen wanneer wittevlieg dicht bij de plant luifel worden gehouden en niet veel vrije ruimte gegeven.
11. Verzameling van witte vliegen in verworven hosts afhankelijk van de behoeften van het experiment. Als kleine hoeveelheden nodig zijn, zuigen whiteflies zoals hierboven beschreven. Plaats de collectie flesjes van wittevlieg in de kooi in de buurt van de planten en verwijder het deksel (figuur 7). Open het flesje en laat de witte vlieg of omkeren en tik op de flacon zachtjes om de wittevlieg los. Als grote aantallen nodig zijn gewoon bewegen overname planten met wittevlieg in de kooien waar de proef fabrieken zich bevinden en schud de wittevlieg uit de overname waardplant. Voor beide typen introductie, moet u de wittevlieg over de planten te distribueren naar aggregatie minimaliseren en verzekeren een uniforme inenting.
12. Laat de wittevlieg te peilen of diervoeder voor de juiste hoeveelheid tijd, weer afhankelijk van het virus en tot op zekere hoogte de waardplant (tabel 1).
13. Controleer de wittevlieg ten minste een keer tijdens inenting toegang periode om te verzekeren dat wittevlieg zijnsonderen of het voeden door het openen van de kooi en het draaien over een aantal bladeren op elke plant.
14. Voor de inoculatie toegang langere perioden verstoren de planten licht (met een bamboe stok of gelijkwaardig) om de toppen van de planten en witte vliegen borstel moedigen te herverdelen over de planten. Herverdeling van wittevlieg verzekert een hogere transmissiesnelheid door het tegengaan van de natuurlijke neiging van wittevlieg te aggregeren.
15. Beëindiging. De inenting toegang beëindigd is door het doden van de wittevlieg met goedgekeurde chemicaliën. Breng twee insecticiden ene na de andere: een contact insecticide om snel te beëindigen volwassen witte vliegen en een systemisch insecticide om eventuele wittevlieg die zich ontwikkelen in de volgende weken en die gemist door het contact insecticide (figuur 8) te beëindigen. Een contact insecticide zoals insecticide zeep en systemische insecticiden zoals imidacloprid of pyrometrozine gebruikt werden met goed succes.

Resultaten

Deze methoden om witte vlieg kolonie opzetten en onderhouden, en manipulatie plantenvirussen zenden met succes gebruikt in een aantal studies ^4,11,12,14 en vele anderen genoemd. Met deze methoden met persistent overgebracht virussen, hebben we routinematig verkregen gewenste tarieven verzending van 100% voor de selectie op resistentie, insecticiden screenen op hun vermogen om te interfereren met voortplanting (en evalueren van resistentie inducerende verbindingen) ^13,14,17,18 ( Figuur 9). De hier beschreven procedures kunnen en zijn al aangepast naar vele locaties in zowel de publieke en private onderzoeksfaciliteiten.

Type Transmission	Acquisitie Access Periode (uur)	Inenting Access Periode (uur)	Ref.
Nonpersistent	1	2-24	10
Semipersistent	6-24	8-24	10, 16
Aanhoudend	48-72	48-72	3, 6, 8, 9

Tabel 1. Vermoedelijke die kunnen worden gebruikt om hoge verzending van virussen produceren met verschillende verhoudingen met de vector Bemisia tabaci species complex. Geschatte tijden zijn gebaseerd op gepubliceerde minimum vereist voor 80-100% transmissie en in sommige gevallen aangepast tijden te verantwoorden latente periodes en verschillen tussen wittevliegpopulatie, virus, en waardplanten.

Figuur 1. Een voorbeeld van een viruliferous wittevlieg kolonie. Deze groei kamer bevat kooien van planten geïnfecteerd met een begomovirus en Infested met viruliferous wittevlieg.

Figuur 2. Links: immatures stadia van de wittevlieg, Bemisia tabaci MEAM clade sensu De Barro ⁶ ongeveer 1 week na opkomst en Rechts: een volwassen wittevlieg, een effectieve vector van veel plant-virussen.

Figuur 3. Soorten collectie apparaten die kunnen worden gebruikt om wittevlieg te planten virusoverdracht verzamelen.

Figuur 4. Links: Gele plastic kaart gebruikt om witte vlieg volwassenen tonen wittevlieg klaar voor collectie te verzamelen . Rechts: Het verzamelen van wittevlieg uit een gele plastic kaart. Wittevlieg is te zien op de kaart als kleine witte / grijze vlekken.

Figuur 5. Wittevlieg verzameld door aspiratie (20 in een flacon) van de kolonie klaar voor of verwerving of inenting.

Figuur 6. Links boven:. Enkele plant kooien gebruikt voor zowel verwerving of inenting Boven Rechts: Grotere kooien gemaakt van pvc buizen en organza. Onderste: Aluminium / scherm en organdy kooien in een kas met planten bestemd voor een witte vlieg kolonie.

32fig7.jpg "/>
Figuur 7. Wittevlieg wordt overgedragen aan een enkele plant voor enting (of overname).

Figuur 8. Toevoeging van een systemisch insecticide doordrenken om de wittevlieg inenting toegang te beëindigen.

Figuur 9. Veld planten onder evaluatie voor resistentie tegen Tomato yellow leaf curl virus. Alle planten werden geënt als 5 weken oude zaailingen en vervolgens getransplanteerd naar het veld voor de evaluatie. Planten op de voorgrond zijn een resistente germplasm lijn, planten in de achtergrond zijn gevoelig kiemplasma lijn.

Discussie

De hier beschreven methoden ontwikkeld gedurende twee decennia en zijn gebaseerd op de fundamentele informatie van vele studies witte vlieg transmissie, gedrag en biologie. Aangezien er vele publicaties, dit manuscript vooral betrekking reviews en een aantal geselecteerde specifieke publicaties het type gegevens gebruikt voor ontwikkeling van deze techniek illustreren. Het is hierbij van groot belang dat de procedure wittevliegen zachtjes sinds breken van poten en antennes worden behandeld kan leiden tot abnormaal gedrag en lagere transmissie. Collectie met stofzuigers en andere mechanische afzuiginrichtingen heeft nooit goede resultaten opgeleverd. Een andere overweging voor succes is dat het aantal wittevliegen gebruikt om 100% transmissie te testen planten te verkrijgen, moet worden vastgesteld voor elke combinatie van de waardplant en virussen. Deze optimale verhouding hoeft maar een keer te worden vastgesteld. De beste resultaten werden verkregen met behulp van jonge volwassen witte vliegen (1-3 dagen na opkomst) omdat ze giive de hoogste tarieven van de transmissie. Oudere volwassenen kan worden gebruikt, maar grotere aantallen wittevlieg nodig zal zijn om te compenseren voor hun verlaagde tarieven van overdracht. Vrouwtjes zijn gekend om te zenden tegen hogere tarieven dan mannen, omdat ze zich voeden vaker dan mannen. Het is echter meestal niet de moeite waard de tijd om de seksen voor transmissie wordt gescheiden. Deze procedure kan worden aangepast op vele manieren om de middelen en behoeften van de onderzoeker te passen.

Bij het werken met meerdere virussen is het het beste om een ​​enkele kolonie van wittevlieg gefokt op nonhost planten van het virus te houden. Deze witte vliegen kunnen geplaatst op virus-geïnfecteerde planten voor overname worden verzameld en vervolgens na de overname van de wittevlieg weer kan worden verplaatst naar de test planten. Planten bestemd voor de kolonie worden gekweekt in kassen in kooien om de invoering van witte vliegen die hen zouden kunnen besmetten met een virus te voorkomen. Aantasting van deze planten met mijten, trips en andere plantenziekten kunnen compromitteren de health van de kolonie en veroorzaken in te storten. Eindelijk besproeien van de kolonie planten moet worden gedaan met zorg. Deze planten zijn onderhevig aan extreme stress door het voederen van zoveel wittevlieg en de lager dan normale lichtomstandigheden. Root rottende schimmels die worden ingevoerd op het veen in de grondloze mixen kan een probleem worden als de planten zijn zelfs een keer overwatered. Voorbehandeling van de planten met een fungicide doordrenken kan sommige van de problemen te elimineren.

Terwijl wittevlieg overdracht van plantenvirussen kan tijdrovend zijn en vereisen kostbare hulpbronnen (zoals groei kamers) is het essentieel voor de overdracht van sommige virussen waarvoor we geen andere middelen van overdracht. Het is het een belangrijk hulpmiddel voor het screenen planten op resistentie tegen virussen, omdat het gebruik maakt van dezelfde soort transmissie die planten in het veld wordt verwacht te weerstaan. Het gebruik van meer kunstmatige middelen van overdracht niet altijd de beste resultaten opleveren in evaluaties van kiemplasma voor Virus-resistentie.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
Naam van het Item	Bedrijf	Catalogusnr.	Opmerkingen (optioneel)
Wittevliegbestendig scherm	Klayman Meteor Ltd. Petah Tikva 49130, Israël	---	BioNet 50 maasscherm Antivirus Insect Screen
Wittevliegbestendig scherm	Hummert International (www.hummert.com)	27-4050-1 - 27-4062-1	BioNet 50 maasscherm Antivirus Insect Screen
Wittevliegverzamelingsapparaten	BioQuip	1135A	Kan ook worden gemaakt met oliedruppelaars, flexibele plastic buizen, plastic vacuümadapters en kaasdoek
Verzamellijvjes	BioQuip	8909	De gebruikte flesjes hangen af van welke afzuiger wordt gebruikt.
Gele plastic kaarten	elke onderneming	---	Elke heldergele plastic kaart werkt, kan op veel plaatsen worden gekocht.
Wittevliegkooien	---	---	Deze zijn niet commercieel verkrijgbaar en moeten worden geconstrueerd. Kooien van 60 cm x 60 cm x 60 cm werken goed voor ons. Onze voorkeur gaat uit naar degenen die zijn geconstrueerd van aluminium raamschermen, nylon organdi, vinyl plastic, met een structuur gecreëerd met behulp van aluminium raamkozijnen. Deuren worden bevestigd met pianoscharnieren en afgedicht met weersstrips; de toppen van de kooien zijn van vinyl plastic. Kooien kunnen ook worden gemaakt van 1) plexiglas dat op de randen wordt vastgelijmd met ventilatie die wordt geboden door gescheurde openingen die op de zijstukken zijn gesneden; 2) grote zakken van nylon organdi, organza of 50 maas witvliegscherm met interne ondersteuning door PVC-buizen en fittingen die op de gewenste lengte zijn gesneden en binnenin de zakken zijn geassembleerd, 3) houten kozijnen en nylon organdi, organza of 50 maas witvliegscherm.