Methodenartikel

Angiogenese in het ischemische Rat Lung

15.4K weergaven

DOI:

10.3791/50217

8 februari 2013

In dit artikel

Samenvatting

De long is doorbloed door zowel de systemische bronchiale arterie en longslagaders. In de meeste long ziekten is de kleinere systemische vasculatuur die robuust neovascularisatie toont. Beëindiging van pulmonale bloedstroom bevordert stevige bronchiale angiogenese. Wij bieden chirurgische details van het induceren van linker longslagader ischemie dat bronchiale neovascularisatie bevordert.

Samenvatting

De volwassen long geperfundeerd door zowel de systemische bronchiale slagader en de hele veneuze terugstroom die door de longslagaders. In de meeste long ziekten is de kleinere systemische vasculatuur die beantwoordt aan een behoefte voor verbeterde longperfusie en toont robuust neovascularisatie. Pulmonale vasculaire ischemie geïnduceerd door pulmonale obstructie is te leiden tot een snelle systemische arteriële angiogenese in de mens en in verschillende diermodellen. Hoewel de histologische beoordeling van het tijdsverloop van bronchiale arterie proliferatie bij ratten werd zorgvuldig beschreven door Weibel 1, mechanismen die verantwoordelijk zijn voor deze georganiseerde groei van nieuwe schepen zijn niet duidelijk. Wij chirurgische gegevens induceren linker longslagader ischemie in de rat die leidt tot bronchiale neovascularisatie. Kwantificering van de mate van angiogenese een extra uitdaging door de aanwezigheid van de twee vasculaire bedden in de longen. Methodenfunctionele angiogenese gebaseerd op gelabelde microsferen injecties bepalen voorzien.

Inleiding

Systemische angiogenese in de longen is goed herkend. In ziekten zoals astma 2, interstitiële longfibrose 3, kanker 4 en chronische pulmonaire embolie 5, de systemische vasculatuur in en rond de longen prolifereert en rond het longparenchym. Echter diermodellen deze differentiële activering van de systemische plaats van de pulmonale circulatie bestuderen weinig. Misschien is de meest reproduceerbaar model van systemische neovascularisatie in de longen van de volwassen zoogdier voorvallen na inductie chronische pulmonale ischemie. De reactie naar links longslagader obstructie in mensen 5-7, honden 8, 9 ....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle protocollen uitgevoerd op ratten zijn goedgekeurd door de Johns Hopkins University Animal Care en gebruik Comite en in overeenstemming met de NIH richtlijnen. Indien mogelijk moet het dier chirurgisch voorbereid in een gebied gescheiden van de chirurgische ruimte om verontreiniging van de operatieplaats te minimaliseren.

1. Anesthesie / analgesie

  1. Place rat (Sprague Dawley mannelijke ratten, 125-150 g, Harlan, Indianapolis, IN) in een inductiekamer doordrenkt met 3% isofluraan.
  2. Plaats verdoofde rat op een operatie boord aan neuskegel en ventilator met 3% isofluraan anesthesie. Steriele techniek voor alle procedure....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Vasculaire cast: Resultaten van de effecten van linker longslagader ischemie in de rat zijn afgebeeld in figuur 1. Afgebeeld is een methacrylaat cast van de bronchiale bloedvaten en de uitgebreide vascularisatie van de linker luchtwegen boom 28 dagen na LPAL. Deze cast verkrijgen werd de systemische vasculatuur geïnjecteerd met een mengsel methacrylaat (rood), retrograde in de dalende aorta en de trachea werd gecannuleerd en ingespoten met een witte siliconen gebaseerd materiaal. Deze vasculaire cast ee.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Links longslagader ligatie bij alle proefdieren leidt tot robuuste systemische neovascularisatie van de ischemische long. We hebben ingediend de details van de chirurgische benadering in een rat model. De resultaten van vasculaire gieten, histopathologie en in vivo labeling tonen dat bronchiale arteriën prolifereren en perfuseren het longparenchym. Aldus kan de mechanismen van bronchiale angiogenese worden bestudeerd in een diermodel dat de menselijke toestand van chronische pulmonaire embolie parallel. Bovendi.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Geen belangenconflicten verklaard.

Dankbetuigingen

Wij erkennen het werk van Dr Adlah Sukkar, MD in het bijstaan ​​met het gieten van de long. Dit werk wordt gefinancierd door NHLBI, HL088005.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Reagentia: Vennootschap
buprenorfinehydrochloride, Puralube Butler Schein
bupivicaine APP Pharmaceuticals
Povidonjood swabstick Dynarex Corporation
polypropyleen hechtdraad size 6-0, 3/8 cirkel achteruit snijden naald Myco Medische
PE20 leidingen Becton Dickinson
15 pm crimson polystyreen fluorospheres Invitrogen
1 ml Hamilton glazen injectiespuit Hamilton Company
Uitrusting:
Genie Plus injectiepomp Kent Wetenschappelijke
Fluorescentiespectrofotometer Digilab
Knaagdieren Ventilator Model 683 Harvard Apparatus
Tabel 1. Tabel van specifieke reagentia en apparatuur.

Referenties

  1. Weibel, E. R. Early stages in the development of collateral circulation to the lung in the rat. Circulation Research. 8, 353-376 (1960).
  2. Li, X., Wilson, J. W. Increased vascularity of the bronchial mucosa in mild asthma. Am. J. Respir. Crit. Ca....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Longslagaderligatiebronchiale neovascularisatiethoracotomieprocedureinjectie van gelabelde microsferensystemische arteri le angiogeneselongischemie bij rattenstudie naar de bronchiale circulatiecanulatie van de halsslagaderperfusieanalysemethodechirurgische thoracotomietechniek

Gerelateerde artikelen