Methodenartikel

Tot oprichting van Schimmel Entomopathogens als endofyten: Op weg naar Endofytische Biologische bestrijding

37K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/50360

⸱

11 april 2013

 ,  , 
1Entomology, International Center for Tropical Agriculture (CIAT), Cali, Colombia , 2Sustainable Perennial Crops Laboratory, Agricultural Research Service, United States Department of Agriculture, Beltsville, Maryland, USA

In dit artikel

Samenvatting

Dit protocol laat twee inoculatie methoden om de schimmel entomopathogen introduceren Beauveria bassiana Als endofyt in de gewone boon ( Phaseolus vulgaris), Ter voorbereiding van de volgende evaluaties van endofytische biologische bestrijding.

Samenvatting

Beauveria bassiana is een schimmel entomopathogen met de mogelijkheid om endophytically koloniseren planten. Als endofyt, B. bassiana kunnen een rol spelen bij het ​​beschermen van planten herbivorie en ziekte. Dit protocol laat twee infectiemethoden te stellen B. bassiana endophytically in de gewone boon (Phaseolus vulgaris), ter voorbereiding van de volgende evaluaties van endofytische biologische bestrijding. Planten worden gekweekt uit het oppervlak gesteriliseerde zaden gedurende twee weken voordat een B. bassiana behandeling van 10 8 conidia / ml (of water) toegepast hetzij als bladspray of een bodem doordrenken. Twee weken later worden de planten geoogst en hun bladeren, stengels en wortels worden bemonsterd om endofytische schimmelkolonisatie te evalueren. Hiervoor worden monsters afzonderlijk oppervlak gesteriliseerd, in meerdere secties gesneden en geïncubeerd in aardappel dextrose agar media gedurende 20 dagen. De media wordt gecontroleerd om de 2-3 dagen tot schimmelgroei te observeren alssamenhingen met installatiedelen en noteer het optreden van B. bassiana de omvang van de kolonisatie endofytische schatten. Analyses van inoculatie succes vergelijken het optreden van B. bassiana binnen een bepaald plantendeel (dat wil zeggen bladeren, stengels of wortels) over behandelingen en controles. Naast de beëntingsmethode de specifieke resultaat van het experiment afhangen van de gewassen soort of variëteit, de schimmel entomopathogen species stam of isolaat gebruikt en de plant groeiomstandigheden.

Inleiding

Schimmel entomopathogens belangrijke regulatoren zijn van insecten populaties met een aanzienlijk potentieel als mycopesticides 1. Pas recent hebben echter schimmel entomopathogens aangetoond dat het plaatsvindt als endofyten, zowel natuurlijk als reactie op verschillende infectiemethoden 2. De ecologische functie van endofytische schimmel entomopathogens blijft grotendeels onbekend, maar sommige studies hebben ze in de groei van planten 3,4, herbivoor weerstand 5-8, en ziekteresistentie 9,10. De algemene doelstelling van de methoden die hier gepresenteerd is een schimmel entomopathogen te introduceren als een endofyt, ter voorbereiding van de volgende evaluaties van endofytische biologische bestrijding.

Beauveria bassiana (Balsamo) Vullemin (Ascomycota: Hypocreales) is de best bestudeerde endofytische schimmel entomopathogen 5-9,11-19, en het is beschikbaar als een commercieel mycopesticide. Infectiemethoden getest om vast te stellen B. bassiana als endofyt zijn bodem doorweekt 14,17, zaadcoatings 18 en onderdompelingen 14, kiemwortel dressings 13,15, wortel en wortelstok onderdompelingen 11,16,18, stengel injecties 17, blad-sprays 14,17,20 en bloemtakken 19. Met behulp van deze methoden, hebben de onderzoekers geïntroduceerd B. bassiana in banaan 11, bonen 7, cacao 13, koffie 17, maïs 7, katoen 7, dadelpalm 12, jute 21, opium poppy 20, pompoen 7, pine 18, sorghum 14, tomaat 7 en tarwe 7. Recente gegevens wijzen erop dat endofytische B. bassiana heeft de potentie om planten te beschermen niet alleen geleedpotigen plagen 5-7,22-27, maar ook van een plantpathogenen 9.

De gewone boon (Phaseolus vulgaris) behoort tot de meest kwetsbare gewassen tegen ziektenen ziekten. Het kan worden beïnvloed door meer dan 400 plagen en 200 pathogenen waarvan aanval wordt beschouwd als de meest beperkende factor boonproductie tussen regio 28 zijn. Bijgevolg kunnen de gewone boon zijn een uitstekend model gewas om het volledige spectrum van endofytische biologische bestrijding te onderzoeken door B. bassiana. Als eerste stap in deze richting, in dit artikel beschreven blad sprays en bodem doorweekt als inoculatie methoden om B.bassiana te introduceren als een endofyt in de gewone boon.

Protocol

1. Planten

  1. Oppervlakte-steriliseren jansbroodpitten (cv. Calima) door onderdompeling gedurende twee minuten in 0,5% natriumhypochloriet en twee minuten in 70% ethanol. Spoel de zaden driemaal in steriel gedestilleerd water.
  2. Evalueer het succes van sterilisatie door uitplaten 100 ul van het laatste spoelwater op aardappel dextroxe agar (PDA) media en incuberen van de plaat gedurende 10 dagen bij 25 ° C. Beëindigen en opnieuw starten van het experiment als een groei wordt gezien op de plaat.
  3. De zaden in groepen van drie in potten met een steriele mengsel van grond en zand op een 2:1 verhouding. Breng de potten naar een groeikamer bij 25 ° C, ca. 50% RH en 12 uur fotoperiode. Een week na het ontkiemen, elimineren de twee minst krachtige zaailingen. Water om de 2-3 dagen met steriel gedestilleerd water en bemesten 10 en 20 dagen na het planten met een 6 g / L water oplossing van NPK 15-15-15 kunstmest.

2. Zwam

  1. Zorg voor een commerciëleciële formulering van Beauveria bassiana stam GHA (Mycotrol SE, Laverlam, Cali, Colombia).
  2. Om een ​​enkele-spore voorraad cultuur te genereren, op te schorten ca. een entnaald vol conidia in 1 ml van een 0,1% waterige oplossing van Triton X-100 en vortex gedurende 10 sec. Vervolgens plaat 100 ul van de suspensie van 2,5% Noble agar en incubeer gedurende 24 uur bij 25 ° C. Breng een enkele kiemende conidium in een 100 mm plaat met PDA en groeien totdat het omvat de gehele plaat (ca. 3-4 weken).
  3. Onder steriele omstandigheden, de schimmelgroei schrapen van het oppervlak van het medium en suspendeer in 10 ml steriele 0,1% Triton X-100. Vortex gedurende een minuut. Dan, filter de suspensie door een steriele kaasdoek om hyfen te verwijderen en de bouillon suspensie te verkrijgen.
  4. Gebruik een hemocytometer om de conidiale concentratie van de voorraad schorsing te schatten. Om conidiale telt vergemakkelijken, bereiden een 10.000-voudige seriële verdunning van de voorraad, elke keer dat de overdracht 100 ul of conidiale suspensie in 900 pi 0,1% Triton X-100 en vortexen 10 sec voor de volgende verdunning.
  5. Het inoculum genereren aanpassen stock suspensie tot een eindconcentratie van 10 8 conidia / ml, met de formule:
    figure-protocol-1
  6. Om conidiale levensvatbaarheid plaat 100 ul van de 10.000-voudige verdunning beoordelen 2,5% Noble agar en incubeer gedurende 24 uur bij 25 ° C. Dan, inspecteren drie willekeurige groepen van 100 conidia tot procent kieming te schatten. Beschouw een conidium ontkiemd bij een zichtbare kiem buis langer dan de halve diameter van de conidium projecten van. Gebruik alleen de vering, wanneer het gemiddelde percentage kieming meer dan 90%.

3. Inenting

  1. Inoculeer planten wanneer zij hun eerste echte bladstadium (ca. 14 dagen na het planten). Waterplanten in de bodem capaciteit met steriel gedistilleerded. water 24 uur voor inentingen.
  2. Voor de bladspray methode een handmatig verstuiver de conidiale suspensie (behandeling) of 0,1% Triton X-100 (controle) aan de adaxiale (bovenste) oppervlak van bladeren totdat ze verzadiging van toepassing. Bedek de bovenkant van de pot met aluminiumfolie om conidiale afvoer voorkomen dat de bodem. Na het besproeien betrekking planten met een plastic zak voor 24 uur om een ​​hoge luchtvochtigheid vergemakkelijken schimmel invasie handhaven.
  3. Voor de bodem drench methode gebruikt een maatcilinder tot 10 ml van conidiale suspensie (behandeling) of 0,1% Triton X-100 (controle) aan het oppervlak van de bodem op de basis van de plant. Toepassing
  4. Na inentingen, terug planten aan de groei kamers regelen van hen in een gerandomiseerd compleet blok design. Liefst vier aanvullende experimentele blokken worden aangebracht om evaluaties van plantengroei mogelijk naast evaluaties van endofytische kolonisatie in hetzelfde experiment.

4. Evalaties

  1. Evalueren experiment een blok tegelijk selecteren de blokken in willekeurige volgorde. Dit is bijzonder belangrijk voor grote experimenten die niet kunnen worden geëvalueerd op een dag.
  2. Voor het verwerken van een plant, meten en registreren de hoogte van de basis naar het apicale meristeem. Dan, voorzichtig ontwortelen en grondig wassen in stromend leidingwater.
  3. Van elke plant, monster twee folders, twee stukken wortel en twee stukken stam. Willekeurig bijsluiter monsters van de eerste ware blad van de plant. Vervolgens krijgen twee monsters stam, 3 cm lang elk van het midden van de plant en van nabij het bodemoppervlak. Tot slot krijgen twee penwortel monsters, ook 3 cm lang elk, vanuit het midden van de wortel en van 1 cm achter de wortel tip. Plaats de monsters op drie afzonderlijke papieren zakken en label op de juiste wijze.
  4. Na wassen en bemonstering alle planten in een blok, beginnen de verwerking verlaat, wordt wortels en uiteindelijk de stengels.
  5. Surface steriliseren tkwesties in een steriele laminaire stroming kap als in 1.1, hierboven. Spoel elk monster driemaal door onderdompeling in steriel gedestilleerd water en laat het drogen in een steriele handdoek papier. Dan, ontleden en gooi de buitenste randen, waar endofyten zou kunnen zijn geëlimineerd door contact met desinfecterende middelen.
  6. Snijd de bijgesneden monster in zes afdelingen, met een gemiddelde 6x6 mm voor bladeren en 6 mm lang voor stengels en wortels. Plaat de zes secties in een 60 mm Petri plaat met PDA medium aangevuld met antibiotica tetracycline, streptomycine en penicilline 2 mg / L elk. Dicht de plaat met parafilm en geïncubeerd in het donker bij 25 ° C. Elke plant levert zes borden, twee per plantendeel.
  7. Verander het spoelwater na verwerking elk blok van een gegeven plantendeel. Ontdoen voordat het gebruikte spoelwater, een plaat 100 pl monster PDA media en incubeer gedurende 10 dagen bij 25 ° C gesteriliseerd succes te beoordelen. Als schimmelgroei ontstaat, houden geen rekening met de overeenkomstige monsters voor analyses.
  8. Controleer de platen elke 2-3 dagen gedurende 20 dagen te observeren en opnemen schimmelgroei. Accijnzen en overdracht installatiedelen vertonen aanwezigheid van schimmel endofyten om platen met verse PDA. Dit voorkomt besmetting van naburige installatiedelen in de originele plaat.
  9. Record B. bassiana groei van installatiedelen. Beauveria bassiana kunnen worden geïdentificeerd door karakteristieke witte dichte mycelia steeds crème tot lichtgele aan de rand. Bij twijfel, het monster te monteren in een druppel water en inspecteren onder een microscoop, op zoek naar bolvormig sporen en zigzag-vormige conidioforen, karakteristiek voor de soort.
  10. Gebruik extra experimentele blokken om de gevolgen van de behandelingen op plantaardige biomassa te evalueren. Eerste meet de hoogte van de basis naar de top van het apicale meristeem. Dan, voorzichtig ontwortelen en wassen planten in leidingwater en laat ze drogen bij 45 ° C gedurende drie dagen de tijd om hun droge gewicht te bepalen.

Resultaten

B. bassiana was in staat om endophytically-koloniseren P. vulgaris in reactie op de inoculatie behandelingen aangetoond (figuur 1). Zowel blad sprays en bodem doorweekt resulteerde in endofytische kolonisatie door B. bassiana in meer dan 80% van de behandelde planten (Figuur 2). De mate van kolonisatie afhankelijk van de geëvalueerde plantendeel en de gebruikte beëntingsmethode. Bladeren gereageerd best om spuiten inentingen. Wortels, anderzijds, reageerde alleen doordrenken inentingen. Tenslotte heeft ook te reageerde op beide infectiemethoden. B. bassiana werd niet gedetecteerd in de controle installatiedelen.

Onafhankelijk van de behandeling, andere dan endofyten B. bassiana groeide van 15% van de geëvalueerde installatiedelen, maar ze werden ontleed uit de media platen voordat ze konden binnenvallen naburige secties en de resultaten beïnvloeden.

Behandeling en controle planten waren zichtbaar onderscheiden twee weken na inentingen. Er werden geen verschillen gevonden in het drooggewicht en hun lengte.

figure-results-1
Figuur 1. Representatieve resultaten van inoculatie behandelingen op endofytische kolonisatie van bonen planten (Phaseolus vulgaris cv Calima.) Door Beauveria bassiana Linksboven:. Controle platen zonder groei. Rechtsboven: Schimmel endofyt van een plant gedeelte vervuilende hele plaat. Linksonder: B. bassiana groeien van twee installatiedelen. Rechtsonder: Endofytische B. bassiana sporen en conidioforen gezien onder een microscoop.

figure-results-2
Figuur 2. Effect van inoculatie behandelingen op endofytische kolonisatie van bean (Phaseolus vulgaris cv. Calima) door Beauveria bassiana, twee weken na inoculatie van de stam GHA. Percent kolonisatie geeft het aantal gekoloniseerde installatiedelen gedeeld door het aantal gekweekte secties.

Discussie

Vele factoren kunnen invloed hebben op de specifieke uitkomst van een experiment om een ​​schimmel entomopathogen als een endofyt vast te stellen. Onze resultaten tonen de beëntingsmethode is er een van. Biologische factoren om te experimenteren met onder meer het gewas of de cultivar geselecteerd en de schimmel entomopathogen soort stam of isoleren gebruikt. Andere factoren om te overwegen het manipuleren van bijvoorbeeld de concentratie van het inoculum, de leeftijd van de plant tijdens de inentingen, en de plant groeiomstandigheden.

Het zou ideaal zijn voor een inenting methode om de systemische planten kolonisatie leiden door een schimmel entomopathogen 14,17,18,21. In plaats daarvan blijkt dat infectiemethoden vaak een bepaald patroon van lokale kolonisatie bevorderen. In koffie, bijvoorbeeld, blad sprays voorstander blad kolonisatie overwegende dat de bodem doorweekt voorstander wortelkolonisatie 17. We vonden hetzelfde patroon in de gewone boon. Uiteindelijk moet de keuze van de inoculatie methodegeleid door de geplande locatie van de endofyt binnen een plant, vermoedelijk overeenkomt met de niche van het doel herbivoor of plant pathogeen.

Hoewel vaak gebruikt, endofyt detectie en kwantificering op basis van media culturen kan kostbaar, moeilijk en gevoelig voor fouten. Zo werden er in totaal 10.800 installatiedelen (uitgeplaat op 1.800 petrischaaltjes) geëvalueerd in een experiment om B. te optimaliseren bassiana inentingen op banaan 16. Van deze werden 4.496 secties gekoloniseerd door een vermeende B. bassiana, zoals geïdentificeerd voornamelijk door kolonie morfologie. Uiteraard zou microscopische controle van de soort per kolonie is een gewenst maar onbetaalbaar stap. Anderzijds werden 1176 delen gekoloniseerd door andere schimmels en werden weggegooid en behandeld als ontbrekende gegevens 16. De kans bestaat echter dat B. bassiana was een arme concurrent of langzamer te groeien, en kan uiteindelijk zijn voortgekomen uit die secties als er eenllowed voldoende tijd. Daarom endofyt detectiemethoden op basis van media-culturen zijn onderworpen aan valse positieven en valse negatieven. Bijgevolg is de ontwikkeling van betrouwbare detectie en kwantificering, bijvoorbeeld die gebaseerd op polymerase chain reaction (PCR) assays 20,21,24 wordt gerechtvaardigd.

Het uiteindelijke doel voor inoculatie-experimenten zou moeten zijn om een ​​efficiënte behandeling die duurzame systemische resistentie biedt tegen herbivorie en / of ziekte te ontwikkelen. Een plausibel, maar nog niet getest, hypothese is dat de mate van endofytische kolonisatie positief moeten correleren met de mate van endofyt-gemedieerde resistentie. Een logische volgende stap na verfijning infectiemethoden dus zou kunnen zijn om deze correlatie te onderzoeken. Verschillende video-protocollen kan onderzoekers helpen een geschikte weerstand test te ontwerpen voor een doel plaag-of ziektedruk 29-31. Uiteindelijk is deze assay wat bepaalt het succes van de inoculathode en de bijbehorende mogelijkheden voor endofytische biologische bestrijding.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen hebben.

Dankbetuigingen

De productie en het experimentele werk die hierin weerspiegelen de toegewijde en enthousiaste hulp van Reynaldo Pareja. Gefinancierd door Bestuursdienst Colombia van Wetenschap, Technologie en Innovatie (Colciencias) en door een subsidie ​​van de Bill & Melinda Gates Foundation door de Grand Challenges Explorations initiatief.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
REAGENTS
Naam van reagens/materiaalBedrijfCatalogusnummer
Mycotrol SE Laverlam4167
Nobele agarSigmaA5431-250G
Penicilline G natriumzoutSigmaP3032-25MU
Petrischaal (100 x 15 mm)Fisher08-757-12
Petrischaal (60 x 15 mm)Fisher08-757-13A
Aardappel dextrose agarDifco213400
Regelmatige bleekvloeistof (NaOCl)CLOROXN/A
Streptomycinesulfaat zoutSigmaS6501-25G
TetracyclineSigmaT3258-25G
Triple quince (NPK)ABOCOLN/A
Triton X-100SigmaX-100
EQUIPMENT
Biologische veiligheidskastNuAireNU-425-600
HemocytometerFisher02-671-10
Leica DM LB microscoopLeicaN/A

Referenties

  1. Vega, F. E., Meyling, N. V., Luangsa-ard, J. J., Blackwell, M. Fungal entomopathogens in Insect Pathology. Vega, F. E., Kaya, H. K. , Elsevier. San Diego. 171-220 (2012).
  2. Vega, F. E. Insect pathology and fungal endophytes. Journal of invertebrate pathology. 98, 277-279 (2008).
  3. Sasan, R. K., Bidochka, M. J. The insect-pathogenic fungus Metarhizium robertsii (Clavicipitaceae) is also an endophyte that stimulates plant root development. American journal of botany. 99, 101-107 (2012).
  4. Elena, G. J., Beatriz, P. J., Alejandro, P. Metarhizium anisopliae (Metschnikoff) Sorokin promotes growth and has endophytic activity in tomato plants. Advances in biological research. 5, 22-27 (2011).
  5. Bing, L. A., Lewis, L. C. Suppression of Ostrinia nubilalis (Hübner)(Lepidoptera: Pyralidae) by endophytic Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin. Environmental entomology. 20, 1207-1211 (1991).
  6. Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. Endophytic Beauveria bassiana in banana (Musa spp.) reduces banana weevil (Cosmopolites sordidus) fitness and damage. Crop protection. 27, 1437-1441 (2008).
  7. Gurulingappa, P., Sword, G. A., Murdoch, G., McGee, P. A. Colonization of crop plants by fungal entomopathogens and their effects on two insect pests when in planta. Biological. 55, 34-41 (2010).
  8. Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. Effect of endophytic Beauveria bassiana on populations of the banana weevil, Cosmopolites sordidus, and their damage in tissue-cultured banana plants. Entomologia experimentalis et applicata. 129, 157-165 (2008).
  9. Ownley, B. H., et al. Beauveria bassiana: Endophytic colonization and plant disease control. Journal of invertebrate pathology. 98, 267-270 (2008).
  10. Ownley, B. H., Gwinn, K. D., Vega, F. E. Endophytic fungal entomopathogens with activity against plant pathogens: ecology and evolution. BioControl. 55, 113-128 (2010).
  11. Akello, J., et al. Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin as an endophyte in tissue culture banana (Musa spp.). Journal of invertebrate pathology. 96, 34-42 (2007).
  12. Gómez-Vidal, S., Lopez-Llorca, L. V., Jansson, H. B., Salinas, J. Endophytic colonization of date palm (Phoenix dactylifera L.) leaves by entomopathogenic fungi. Micron. 37, 624-632 (2006).
  13. Posada, F., Vega, F. E. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte in cocoa seedlings (Theobroma cacao). Mycologia. 97, 1195-1200 (2005).
  14. Tefera, T., Vidal, S. Effect of inoculation method and plant growth medium on endophytic colonization of sorghum by the entomopathogenic fungus Beauveria bassiana. BioControl. 54, 663-669 (2009).
  15. Posada, F., Vega, F. E. Inoculation and colonization of coffee seedlings (Coffea arabica L.) with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales. Mycoscience. 47, 284-289 (2006).
  16. Akello, J., Dubois, T., Coyne, D., Kyamanywa, S. The effects of Beauveria bassiana dose and exposure duration on colonization and growth of tissue cultured banana (Musa sp.) plants. Biological. 49, 6-10 (2009).
  17. Posada, F., Aime, M. C., Peterson, S. W., Rehner, S. A., Vega, F. E. Inoculation of coffee plants with the fungal entomopathogen Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales). Mycological research. 111, 748-757 (2007).
  18. Brownbridge, M., Reay, S. D., Nelson, T. L., Glare, T. R. Persistence of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales) as an endophyte following inoculation of radiata pine seed and seedlings. Biological control. 61, 194-200 (2012).
  19. Posada, F. J., Chaves, F. C., Gianfagna, T. J., Pava-Ripoll, M., Hebbar, P. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as an endophyte in cocoa pods (Theobroma cacao L.). Revista U.D.C.A. actualidad & divulgación científica. 13, 71-78 (2010).
  20. Quesada-Moraga, E., Landa, B. B., Muñoz-Ledesma, J., Jiménez-Díaz, R. M., Santiago-Alvarez, C. Endophytic colonisation of opium poppy, Papaver somniferum, by an entomopathogenic Beauveria bassiana strain. Mycopathologia. 161, 323-329 (2006).
  21. Biswas, C., Dey, P., Satpathy, S., Satya, P. Establishment of the fungal entomopathogen Beauveria bassiana as a season long endophyte in jute (Corchorus olitorius) and its rapid detection using SCAR marker. BioControl. , 1-7 (2011).
  22. Bing, L. A., Lewis, L. C. Occurrence of the entomopathogen Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin in different tillage regimes and in Zea mays L. and virulence towards Ostrinia nubilalis (Hübner). Agriculture, ecosystems & environment. 45, 147-156 (1993).
  23. Akello, J., Sikora, R. Systemic acropedal influence of endophyte seed treatment on Acyrthosiphon pisum and Aphis fabae offspring development and reproductive fitness. Biological. 61, 215-221 (2012).
  24. Reddy, N. P., Ali Khan, A. P., Devi, U. K., Sharma, H. C., Reineke, A. Treatment of millet crop plant (Sorghum bicolor) with the entomopathogenic fungus (Beauveria bassiana) to combat infestation by the stem borer, Chilo partellus Swinhoe (Lepidoptera: Pyralidae. Journal of Asia Pacific. 12, 221(2009).
  25. Quesada-Moraga, E., Muñoz-Ledesma, F. J., Santiago-Alvarez, C. Systemic protection of Papaver somniferum L. against Iraella luteipes (Hymenoptera: Cynipidae) by an endophytic strain of Beauveria bassiana (Ascomycota: Hypocreales). Environmental entomology. 38, 723-730 (2009).
  26. Cherry, A. J., Banito, A., Djegui, D., Lomer, C. Suppression of the stem-borer Sesamia calamistis (Lepidoptera; Noctuidae) in maize following seed dressing, topical application and stem injection with African isolates of Beauveria bassiana. International journal of pest management. 50, 67-73 (2004).
  27. Gurulingappa, P., McGee, P. A., Sword, G. Endophytic Lecanicillium lecanii and Beauveria bassiana reduce the survival and fecundity of Aphis gossypii following contact with conidia and secondary metabolites. Crop protection. 30, 349-353 (2011).
  28. van Schoonhoven, A., Voysest, O. Common beans in Latin America and their constraints in Bean production problems in the tropics. Schwartz, H. F., Pastor-Corrales, M. A. , Second, CIAT. Cali. 33-57 (1989).
  29. De Vos, M., Jander, G. Choice and no-choice assays for testing the resistance of A. thaliana to chewing insects. J. Vis. Exp. (15), e683(2008).
  30. Parsa, S., Sotelo, G., Cardona, C. Characterizing herbivore resistance mechanisms: spittlebugs on Brachiaria spp. as an example. J. Vis. Exp. (52), e3047(2011).
  31. Atamian, H., Roberts, P., Kaloshian, I. High and low throughput screens with root-knot nematodes Meloidogyne spp. J. Vis. Exp. (61), e3629 (2012).

Herprints en machtigingen

Tags

Endofytische kolonisatieBeauveria bassianabladerbesproeiingbodemdrenchingplantinoculatieoppervlaktesterilisatieaardappel-dextrose-agarschimmelgroei
Tot oprichting van Schimmel Entomopathogens als endofyten: Op weg naar Endofytische Biologische bestrijding
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.