Het toenemende gebruik van zebravis als diermodel vereist de ontwikkeling van effectieve methoden voor het leveren van bekende hoeveelheden van verbindingen en oplossingen. De maagsonde hieronder beschreven procedure maakt het mogelijk voor de orale aflevering van de precieze omvang van de oplossing betrouwbaar, veilig en efficiënt op volwassen zebravissen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
De zebravis is een belangrijk geworden in vivo model in het biomedisch onderzoek. Effectieve methoden moeten worden ontwikkeld en gebruikt om verbindingen of agenten leveren oplossingen voor wetenschappelijk onderzoek. Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan volwassen zebravissen zijn onjuist van de variabiliteit van de vrijwillige consumptie door de vis. Een maagsonde procedure werd ontwikkeld om precieze hoeveelheden van infectieuze agentia te leveren bij de zebravis voor studie in het biomedisch onderzoek. Volwassen zebravissen meer dan 6 maanden oud werden verdoofd met 150 mg / L van gebufferde MS-222 en gavaged met 5 pl oplossing met flexibele katheter implantatie slang bevestigd aan een cut 22-G naald. De flexibele buis werd neergelaten in de mondholte van de zebravis tot het uiteinde van de buis gestrekt boven de kieuwen (ca. 1 cm). De oplossing werd vervolgens langzaam geïnjecteerd in het darmkanaal. Deze methode is effectief 88% van de tijd, met vis herstellen uneventfully. Dezeprocedure is ook efficiënt als een persoon kan 20-30 vissen een maagsonde in een uur. Deze methode kan worden gebruikt om precies te beheren middelen voor infectieziekten studies of studies van andere verbindingen in volwassen zebravissen.
Inleiding
Huidige methoden voor het toedienen van verbindingen oraal aan zebravis het toedienen van verbindingen top-bekleed op voer, gemengd in gelatine diëten 1, bioencapsulated in Artemia 2, gemengd met lipide ingekapselde diëten 3, waxspray kralen 4 en via gluten-gebaseerde diëten. 5 Beperkingen van deze methoden van orale toediening omvatten hoge uitloogsnelheden en onvolledige of onvoorspelbare verbinding consumptie door de individuele vissen. Deze variabelen zijn problematisch omdat de besmettelijke ziekte in studies, het kennen van de infectieuze dosis toegediend aan de vis kan zijn van cruciaal belang voor studies....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
1. Voorbereiden van de verdoving Solution
- Bereid een oplossing van 150 mg / l MS-222 systeem in water, hetzij uit een voorraadoplossing of poedervorm.
- Controleer de pH met een pH-meter.
- Buffer met natriumbicarbonaat als nodig totdat de pH tussen 7-7.5.
- Bereid een tank van het systeem water vrij van MS-222 voor de vissen om te herstellen inch De hersteltijd is meestal minder dan 1 minuut.
2. Voorbereiden van de Gavage Apparatus
- Snijd de heldere 22-G implantatie slang aan op een iets meer dan benaderende lengte van de mond naar de darm bol van de vis. Aanvankelijk, raden we verlammin....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Beide geslachten van vis, waaronder zwangere vrouwen werden met succes gavaged (figuur 1). Een succesvolle procedure duurt minder dan een minuut met geen vloeistof gezien het verlaten van de kieuwen of de mond. De slang gaat gemakkelijk, zonder geweld, zonder bloed gezien bij verwijdering van de katheter. De procedure is snel en vereist ongeveer 10 min tot maagsonde 3-4 vis, met een gemiddelde van 30-45 sec per vis.
Zebravis mag niet gavaged met meer dan 5 pl van elke oploss.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Betekenis
Deze techniek is een verbetering en biedt een aantal voordelen ten opzichte van de twee eerder beschreven technieken gavaging volwassen zebravissen. Ten eerste, het gebruik van een spons om de vis te beperken kan een persoon om de procedure uit te voeren, in tegenstelling tot een eerder beschreven techniek waarbij twee mensen. 7 tweede katheter implantatie slang flexibeler dan intraveneuze katheters, die kunnen helpen bij het minimaliseren secundaire trauma door tegen per.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.
Dankbetuigingen
De Rockefeller University Comparative Bioscience Center steun verleend aan dit project. Wij danken Janelle Monnas voor technische ondersteuning.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Uitrusting | |||
| Een spons | |||
| 1-cc luer lock spuit | Becton Dickinson Co | ||
| 22-G Micro-Renathane implantatieslang (gesneden) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G naald (gesneden, indien nodig) | Becton Dickinson Co | ||
| pH-meter | Hanna sonde | ||
| 1 scalpelmesje | |||
| [header] | |||
| Reagens/Materiaal | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
Referenties
- Royes, J. -A. B., Chapman, F. Preparing Your Own Fish Feeds. , Department of Fisheries and Aquatic Sciences, Florida Cooperative Extension Service, Insitute of Food and Agricultural Sciences, University of Florida. (2009).
- Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of th....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
