Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Een muizenmodel van cervicale Spinal Cord Injury Study Post-letsels Respiratory Neuroplasticity

13.1K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/51235

⸱

28 mei 2014

In dit artikel

Samenvatting

Respiratoir falen is de belangrijkste doodsoorzaak na een cervicale dwarslaesie. Met een reproduceerbare, kwantificeerbaar en betrouwbaar preklinische diermodel van ademhalingsfalen veroorzaakt door een gedeeltelijke cervicale letsels zullen helpen om de volgende respiratoire als niet-respiratoire neuroplasticiteit begrijpen en kan getest vermoedelijke reparatiestrategieën.

Samenvatting

Een cervicale dwarslaesie veroorzaakt permanente verlamming, en leidt vaak tot ademnood. Tot op heden zijn nog geen doeltreffende therapieën ontwikkeld te verbeteren / verbeteren van de respiratoire insufficiëntie volgende hoge cervicale dwarslaesie (SCI). Hier stellen we een muizen preklinisch model van hoge SCI bij de cervicale 2 (C2) metamere niveau om diverse post-letselvrije respiratoire neuroplasticiteit te bestuderen. De techniek bestaat uit een chirurgische gedeeltelijke schade aan het C2 niveau, dat een hemiparalysis van het membraan zal induceren door een deafferentatie van het diafragma motoneuronen van de respiratoire centra in de hersenstam. De contralaterale zijde van de schade blijft intact en kan het dier herstel. In tegenstelling tot andere gebieden van communautair belang die de motorische functie (bij de thoracale en lumbale niveau) beïnvloeden, heeft de functie van de luchtwegen geen dierlijke motivatie nodig hebben en de kwantificering van het tekort / herstel kan gemakkelijk worden uitgevoerd (membraan en diafragma zenuw opnames, hele lichaam ventilatie). Deze pre-klinische C2 SCI model is een krachtige, bruikbare en betrouwbare pre-klinisch model te bestuderen verschillende respiratoire als niet-respiratoire neuroplasticiteit gebeurtenissen op verschillende niveaus (moleculaire fysiologie) en diverse vermeende therapeutische strategieën die de ademhaling in kunnen verbeteren testen SCI patiënten.

Inleiding

Ruggenmergtrauma een gemeenschappelijk schade waargenomen in de humane populatie met dramatische incidenten, zoals permanente verlamming. De ernst van het letsel is afhankelijk van het niveau en de mate van de aanvankelijke trauma. Respiratoir falen is de belangrijkste oorzaak van sterfte bij de bovenste cervicale dwarslaesie (SCI) 1. Momenteel is de enige therapeutische behandeling aan de patiënt te plaatsen onder ventilatieondersteuning. Sinds enkele patiënten kunnen worden gespeend de ventilatoire bijstand 2, als gevolg van spontaan herstel die optreedt met post-letsels vertraging, de noodzaak om nieuwe innovatieve niet-invasieve therapieën t....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Dit protocol werd goedgekeurd door de Ethische commissie van de RBUCE-UP stoel of Excellence (Universiteit van Paris Sud, subsidieovereenkomst nr. 246556) en de Universite de Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines.

1. Bereiding van gesteriliseerd chirurgische instrumenten

  1. Reinig de chirurgische instrumenten met laboratorium wasmiddel.
  2. Autoclaaf de instrumenten voorafgaand aan de operatie.
  3. In een chirurgische sessie steriliseren instrumenten door het plaatsen van de uiteinden in een hete kraal sterilisator gedurende 10 minuten bij 180 ° C tussen 2 operaties.

2. Bereiding van Dru....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Omvang van de schade

Het succes en de reproduceerbaarheid van dit experimentele model zijn afhankelijk van de ervaring van elke manipulator / chirurg. De daaropvolgende bedrag van respiratoire herstel (diafragma zenuw activiteit en diafragma activiteit) na een C2 blessure is gecorreleerd met de resterende ventrolaterale gespaard witte stof 21. Aangezien de schade is "handgemaakt" en vereist enige oefening van de chirurg, de omvang van elke schade moet wo.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Technische moeilijkheden van het maken van de C2 Injury Model

De C2 letsel muismodel is een interessant instrument om de luchtwegen na lesional neuroplasticiteit te bestuderen. De stappen die nodig zijn om een ​​reproduceerbaar en betrouwbaar model te produceren zijn talrijk en elk kan hebben voor de resultaten van de studie. Bijvoorbeeld tijdens de intubatie proces uiterste zorg te worden genomen omdat de orotracheale buis een ontsteking van de luchtpijp kan produceren, wat.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs verklaren dat zij geen concurrerende financiële belangen.

Dankbetuigingen

Dit werk wordt ondersteund door financiering van de Europese Unie Zevende Kaderprogramma (FP7/2007-2013) onder subsidieovereenkomst nr. 246556 (Europees project RBUCE-UP), HandiMedEx toegewezen door de Franse Public Investment Board. Marcel Bonay werd gesteund door de Kanselarij des Universites de Paris (Benen Poix), het Fonds de Dotatie Recherche en Sante respiratoire, en het Centre d'Assistance respiratoire à Domicile d'Île de France (CARDIF)

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Dier
Male Sprague Dawley RatJanvier225-250 g
Chirurgische Instrumenten
Student Dumont #5 forcepsFine Science Tool91150-20
Student Standard Pattern ForcepsFine Science Tool91100-12
Mayo-Stille ScissorsFine Science Tool14013-15Gebogen
Student Vannas Spring ScissorsFine Science Tool91500-09Recht
Spring Scissors - 8 mm BladesFine Science Tool15025-10Recht stomp/stompe
Friedman Pearson RongeurFine Science Tool16121-14Gebogen
Dissecting Knife - Fine TipFine Science Tool10055-12Recht
Olsen-Hegar Needle HolderFine Science Tool12002-14Gekarteld
Weitlaner-Locktite RetractorFine Science Tool17012-112x3 stomp
Absorbeerbare chirurgische hechtingenCentravetBYO001Hechtdraadmaat 4-0
Apparatuur
Hot Bead SteriliserFine Science Tool18000-45
Catheter CentravetCAT18816 G
Laryngoscope
Leidraad
Laryngeale spiegelCentravetMIR011
Lactated RingersCentravetRIN020
SpuitCentravet
NaaldCentravet
O2Air LiquidI1001M20R2A001
683 RodentT Ventilator 115/230VHarvard Apparatus55-0000
Stand-Alone VaporizerWPIEZ-155
Thin line verwarmd bedWPIEZ-211
LuchtbusWPIEZ-258
Geneesmiddelen
CarprofenCentravet
RimadylCentravetRIM011
BuprenorphineCentravetBUP001
BaytrilCentravetBAY001
DexmedetomidineCentravetDEX010
AtipamezoleCentravetANT201
Betadine oplossingCentravetVET002
IsofluraanCentravetVET066

Referenties

  1. Frankel, H. L., et al. Long-term survival in spinal cord injury: a fifty year investigation. Spinal Cord. 36, 266-274 (1998).
  2. Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. Progress in spinal cord research - a refined strategy for the Internatio....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

activiteit van de nervus phrenicushemiparalyse van het diafragmaletsel aan de tweede halswervelchirurgische hemilaminectomiegebruik van een ventilator voor knaagdierenhistologische techniekennerve-muscle registratiesgekruiste phrenicusbaan