We tonen de bouw van alcohol damp kamers met behulp van gemakkelijk beschikbare materialen die tegelijk huisvesten 6 muis kooien. We gebruik ervan verder te beschrijven in een muismodel van foetale blootstelling aan alcohol gelijk aan alle 3 trimesters van de zwangerschap bij de mens. Dit paradigma bloot dieren tijdens de dracht en postnatale dagen 1-12.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Bouw van Vapor Chambers gebruikt om muizen bloot te stellen aan alcohol tijdens het equivalent van alle drie trimesters van Menselijke Ontwikkeling
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Blootstelling aan alcohol tijdens de ontwikkeling kan resulteren in een constellatie van morfologische en gedragsafwijkingen die gezamenlijk bekend staan als Foetaal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs). Bij de meest ernstige einde van het spectrum foetaal alcoholsyndroom (FAS), gekenmerkt door groeiachterstand, craniofaciale dysmorphology en neuro tekorten. Onderzoeken met diermodellen, zoals knaagdieren, hebben vele moleculaire en cellulaire mechanismen die betrokken zijn bij de pathofysiologie van FASDs toegelicht. Ethanol toediening aan zwangere knaagdieren is gebruikt om menselijke blootstelling model tijdens het eerste en tweede trimester van de zwangerschap. Derde trimester ethanol verbruik bij de mens is gemodelleerd met behulp van neonatale knaagdieren. Er zijn echter weinig studies met knaagdieren het effect van blootstelling aan ethanol tijdens het equivalent van de drie trimesters van de zwangerschap bij de mens, een patroon van blootstelling dat gebruikelijk is bij zwangere vrouwen gekarakteriseerd. Hier laten we zien hoe damp kamers bouwen van gemakkelijk obtainable materialen die elk plaats bieden aan maximaal zes standaard muis kooien. We beschrijven een dampkast paradigma dat kan worden gemodelleerd blootstelling aan ethanol, met minimaal hanteren gedurende drie trimesters. Onze studies tonen aan dat zwangere dammen ontwikkeld significante metabole tolerantie voor ethanol. Echter, neonatale muizen niet ontwikkelen metabole tolerantie en het aantal foetussen, foetus gewicht, placenta gewicht, aantal jongen / nest, aantal dode jongen / nest, en gewicht van de jongen werd niet significant beïnvloed door blootstelling aan ethanol. Een belangrijk voordeel van dit paradigma is de toepasbaarheid studies met genetisch gemodificeerde muizen. Bovendien, dit paradigma minimaliseert de omgang met dieren, een belangrijke verwarren in foetaal alcohol onderzoek.
Inleiding
Drinken tijdens de zwangerschap kan de foetus schaden, waarbij een aanhoudende veranderingen in vele organen en systemen die de kwaliteit van leven voor de getroffen individuen en hun families aanzienlijk zal dalen. Geschat wordt dat ongeveer 10-30% van de vrouwen drinken tijdens zwangerschap in de VS, met 1-8% drinken in een binge patroon 1,2. Het bereik van de effecten veroorzaakt door blootstelling aan ethanol tijdens de foetale ontwikkeling is gezamenlijk bekend als foetale alcohol spectrum stoornissen (FASDs). Recente schattingen geven aan dat FASDs zijn een belangrijk probleem voor de volksgezondheid met een prevalentie zo hoog als 2-5% in de VS
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierlijke procedures werden goedgekeurd door de Universiteit van New-Mexico Health Sciences Center Institutional Animal Care en gebruik Comite.
1. Vapor Chamber Vergadering
- Cut polycarbonaat platen met een cirkelzaag of decoupeerzaag aan de afmetingen die in de video voor de bovenkant, onderkant, voorkant, achterkant, zijkanten en de deur (figuur 1 en tabel 1).
- Met een cirkelzaag of decoupeerzaag, snijd een opening 8 cm hoog met 16 cm breed in het midden van het voorpaneel.
- Meet en markeer de gaten voor de piano scharnier op de 18 inch met 10 inch polycarbonaat dat de d....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Figuur 2A laat zien dat zowel de zwangere muizen en neonatale nakomelingen werden blootgesteld aan relatief stabiel ethanol damp concentraties in de kamers. Deze varieerde van 4-6 g / dl. Figuur 2B toont de resultaten van de zwangere muizen als een functie van de tijd BEC. BEC werden gemeten met een standaard alcoholdehydrogenase gebaseerde test 48. Op G5, Becs snel steeg tot ~ 60 mM 2 uur na de start van de blootstelling en piekte op het einde van de 4 uur blootstelling peri.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Hier beschrijven we in detail de werkwijzen voor de constructie van damp inhalatiekamers. De materialen en gereedschappen die nodig zijn om de kamers te bouwen zijn verkrijgbaar bij een aantal commerciële leveranciers en de stappen voor de bouw van de kamers zijn relatief eenvoudig. Het systeem dat we hier beschrijven heeft geen in-line terugslagkleppen bevatten een back-flow en menging te voorkomen. We konden geen detecteerbare ethanol te meten in de lucht slechts kamers te suggereren dat we geen vermenging of terugstr.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Ondersteund door National Institutes of Health verleent R01-AA015614, R01-AA014973, T32-AA014127 en K12-GM088021. De auteurs danken Samantha L. Blomquist voor technische bijstand en Drs. Kevin Caldwell en Donald Patrijs voor kritisch evalueren van het manuscript en video.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
```html
```
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Polycarbonaat 1/4" helder 48" x 24" | McMaster-Carr | 8574K23 | 10 |
| Schuimrubberen knop afdichting 3/8"w x 7/32"h | McMaster-Carr | 93085K67 | 10 ft |
| Weld-on #16 | McMaster-Carr | 7515A11 | 3 |
| Pianoscharnier 12" lang | McMaster-Carr | 1658A11 | 2 x 1 ft |
| Klemmen om te klemmen standaard | McMaster-Carr | 5126A26 | 8 |
| PEX-buis 1/2" | McMaster-Carr | 51275K88 | 10 ft |
| Gestraalde Tee buis fitting (Zwart) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K608 | 1 |
| Gestraalde plug fitting (Zwart) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5462K79 | 1 |
| Gestraalde elleboog buis fitting (Zwart) Pkg 10 | McMaster-Carr | 5463K596 | 1 |
| 3/8" Door-Wall Adapters, Buis naar Draadgebundelde Pijp | McMaster-Carr | 5463K851 | 1 |
| Phillips Machine schroef 4-40 | McMaster-Carr | 91772A112 | 1 |
| Machine schroef zeskantmoer 4-40 | McMaster-Carr | 90480A005 | 1 |
| Paneelmontage flowmeter 2-20 | McMaster-Carr | 41945K76 | 3 |
| FLASK, FILTER 1.000 ml 6/PACK | VWR | 89001-800 | 2 |
| Precision Seal Septa | VWR | 89084-490 | 1 |
| VWR Zwarte Rubber Stopper #8 1-gats | VWR | 59581-367 | 1 |
| TUBE TYGON R3603 3/8X9/16 50' | VWR | 89068-556 | 1 |
| TUBE TYGON R3603 1/4X11/16 50' | VWR | 89068-502 | 1 |
| Aerator Steen P2120 | VWR | 32573-007 | 1 |
| 3/8" T-connectors Pk van 20 | VWR | 46600-060 | 1 |
| VWR Disconnectors conisch Pk van 10 | VWR | 46600-110 | 1 |
| 3/8 slang Gestraalde binnen klepkoppeling | Colder Products Company | HFCD17612 | 1 |
| Luchtpomp middelgrote capaciteit | LMI Manufacturers | DB60L | 1 |
| Nexelate Draadrek 36"B X 24"D X 63"H | Global industrial | T9A990135 | 1 |
| Set van (4) 5" Polyurethaan Wiel op Stelvoeten | Global industrial | T9A500591 | 1 |
Referenties
- Centers for Disease Control and Prevention (CDC). World Health Organization Who. Alcohol use and binge drinking among women of childbearing age--United States. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 61 (28), 534-538 (2012).
- Ethen, M. K., et al.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
Meer artikelen verkennen
Alcohol-dampkamersfoetaal alcoholmodel bij muizenethanol-blootstellingsparadigmaconstructie van polycarbonaatkamersluchtstroomregelsysteemblootstelling van drachtige muizenneonatale blootstelling bij muizenmeting van het alcoholgehalte in het bloedafdichting met klemvergrendelingeninlaat- en uitlaatpoorten
