We presenteren een protocol voor het gebruik van een radio-telemetriesysteem cardiovasculaire parameters T4 ruggenmerg doorgesneden ratten acht weken na hersenstam embryonale neurale stamcel transplantatie in de laesie te nemen. Telemetrie is een geavanceerde techniek om de cardiovasculaire functie in bewuste vrij bewegende ruggemerglaesie ratten nauwkeurig te evalueren.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een radio-telemetrische systeem om de cardiovasculaire functie bij ratten met Spinal Cord doorsnijding en embryonale neurale stamcellen Enten Monitor
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Thoracale of cervicale dwarslaesie (SCI) kan leiden tot hart-dysfunctie. Cardiovasculaire parameters bewaken we een geïmplanteerde katheter verbonden met een zender in de femorale slagader van ratten die een T4 ruggenmerg doorsnijding ondergaan met of zonder enten van embryonale hersenstam-afgeleide neurale stamcellen tot expressie groen fluorescent eiwit. In vergelijking met andere methoden zoals canule insertie of staart-manchet, telemetrie voordelig continu bewaken van de bloeddruk en hartslag in vrij bewegende dieren. Het kan ook langdurige meerdere data acquisities. In ruggemerglaesie ratten, werden basale cardiovasculaire gegevens onder ongeremde conditie en autonome dysreflexie in reactie op colorectale uitzetting met succes geregistreerd. Bovendien kan cardiovasculaire parameters voor en na SCI vergeleken in dezelfde rat als een zender geïmplanteerd bij een ruggenmerg doorsnijding. Een beperking van de beschreven Telemetry procedure is dat implantatie in de femorale slagader van de bloedtoevoer naar de ipsilaterale achterbeen kunnen beïnvloeden.
Inleiding
Cardiovasculaire dysfunctie optreedt na ruggenmergletsel (SCI) op een hoog niveau. Dit manifesteert zich in ongeordende bloeddruk en hartslag in rust, orthostatische hypotensie, oefening geïnduceerde hypotensie en autonome dysreflexie gekenmerkt door episodes van hypertensie en bradycardie baroreflex gemedieerde reactie op sensorische stimuli onder de letselniveau 1,2. Deze symptomen interfereren met het dagelijks functioneren van ruggenmerg gewonde patiënten. Het is dus belangrijk om effectieve middelen te stellen voor het onderzoeken van cardiovasculaire veranderingen bij dieren met SCI en experimentele behandelingen.
Om card....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierlijke protocollen werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC). NIH richtlijnen voor het proefdier zorg en veiligheid worden strikt opgevolgd. Dieren met chirurgische procedures werden adequaat behandeld voor het minimaliseren van pijn en ongemak.
1 Spinal Cord Curgery en Cell enten
- Autoclaaf chirurgische instrumenten voor alle operaties. Gebruik Hot Bead Sterilisator (Fine Science Tools) voor ziekteverwekkers en microbiële verontreinigingen van instrumenten tussen procedures op verschillende dieren te verwijderen. Gebruik steriele chirurgische handschoenen, jurk, en gordijnen tijdens ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Met de hierboven beschreven telemetrie techniek we succesvol geregistreerd cardiovasculaire parameters in ruggemerglaesie dieren. Bij dieren met een dwarslaesie alleen, werd MAP aanzienlijk verminderd, terwijl HR toegenomen ten opzichte van naïeve dieren, in overeenstemming met eerdere rapporten 9. Bij dieren met BS-NSC enten, MAP en HR benaderd niveaus gemeten in naïeve dieren (figuur 2). Tijdens colorectale distensie, werd een rat geacht dysreflexic wanneer de schadelijke stimulatie produce.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Traditioneel wordt een vloeistof gevulde canule in de slagader ingebracht en verbonden met een druktransductor cardiovasculaire parameters opnemen als terminal momentopname in elk dier 11. Om continu te controleren cardiovasculaire prestaties voor een lange tijd, zijn radio-telemetrische systemen gebruikt in veel laboratoria. Deze meer verfijnde tool kan de bloeddruk in de bewuste opname, vrij bewegende dieren. Vergeleken met vloeistof gevulde katheters, wordt telemetrie beschouwd als een meer geavanceerde te.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Het werk werd ondersteund door subsidies van NIH/NINDS (NS054883), Craig H. Neilsen Foundation (280072) en de Veterans Administration en de Canadian Spinal Research Organization. We danken het Rat Resource and Research Center, Universiteit van Missouri, Columbia, Missouri, voor het leveren van GFP-ratten.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Fibrinogeen (rat) | Sigma | F6755-25MG | 2 uur bij 37 oC om op te lossen |
| Trombine (rat) | Sigma | T5772-100UN | Oplossen in 10 mM CaCl2 |
| 1% Terg-A-Zyme | Sigma | Z273287 | Enzymatische oplossing voor telemeter schoonmaken |
| Fluorogold | Fluorochrome | Oplossen in gedistilleerd water en licht vermijden | |
| Telemeter (PA-C40) | Data Sciences International | ||
| Telementrie opname en analyse systeem | Data Sciences International | Signaal stimulator, Data Exchange Matrix, ontvangers, Ambient druk referentie monitor | |
| Ballon-getipte katheter | Edward Lifesciences | 111F7-P | Voor colorectale distensie |
Referenties
- Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. J Neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
- Lindan, R., Joiner, E., Freehafer, A. A., Hazel, C. Incidence an....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
