Een stap-voor-stap protocol voor de inter-positionele plaatsing van weefselengineering Vessels (Tevs) in de halsslagader van een schaap met end-to-end anastomose en real-time digitale evaluatie in vivo tot dierenoffers.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Een stap-voor-stap protocol voor de inter-positionele plaatsing van weefselengineering Vessels (Tevs) in de halsslagader van een schaap met end-to-end anastomose en real-time digitale evaluatie in vivo tot dierenoffers.
De ontwikkeling van Weefselmanipulatieproducten Vessels (Tevs) wordt gevorderd door het vermogen om routinematig en effectief implantaat Tevs (4-5 mm in diameter) in een groot diermodel. Een stap voor stap protocol voor onderlinge positionele plaatsing van de TEV en real-time digitale evaluatie van de TEV en natieve halsslagaders wordt beschreven. In vivo opvolging wordt mogelijk gemaakt door de inplanting van stroom sondes, katheters en ultrasone kristallen (geschikt opnametijd veranderingen dynamische diameter van geïmplanteerde Tevs en inheemse halsslagaders) en het moment van de operatie. Eenmaal geïmplanteerd, onderzoekers kunnen arteriële bloedstroom patronen, invasieve bloeddruk en vaatdiameter waardoor parameters zoals polsgolfsnelheid, augmentatie index, polsdruk en compliance te berekenen. Registratie wordt bewerkstelligd via één computerprogramma voor analyse gedurende de duur van het experiment. Dergelijke waardevolle data geeft inzicht in TEV matrix ombouw, zijn resemblanCE om inheemse / sham controles en de algehele TEV prestaties in vivo.
De primaire focus voor de ontwikkeling van Tevs is geweest om een substituut voor autologe transplantatie vervanging bieden bij autologe schepen niet beschikbaar zijn en om donor zicht morbiditeit te beperken. Zo is het aantal coronaire bypass operaties per jaar 350.000 overschreden in de VS en de ideale bron van geschikte transplantaten blijft de linker interne mammaire arterie, links voorste dalende kransslagader en vena saphena 1. Omdat veel mensen die lijden aan vasculaire ziekten misschien niet geschikt zijn slagaders en aders voor autologe transplantatie vervangen, heeft de ontwikkeling van Tevs daarmee uitgegroeid tot een intense gebied van onderzoek decennialang 1-6. Terwijl de engineering en optimalisatie van nieuwe Tevs veel vooruitgang hebben ondergaan, rapportage over de chirurgische technieken gebruikt om de Tevs zelf heeft geen onderwerp van zulke intense discussie te implanteren. Veeleer zijn protocollen betreffende de implantatie van Tevs in diermodellen dat grotendeelstot onderzoekers onderzoeken.
De volgende manuscript wordt gedemonstreerd hoe u Tevs implanteren door gebruik te maken van een end-to-end anastomose aanpak. Deze procedure werd geoptimaliseerd door een specifiek anastomose hechten patroon, stabiliserende hechtdraad techniek optimaliseren longitudinale spanning en de toevoeging van in vivo opvolging instrumentatie. Deze werkwijze staat in tegenstelling tot sommige van de vele variaties die eerder zijn gebruikt. Bovendien is deze procedure wordt beschreven hoe u parameters zoals bloeddruk, TEV diameter / compliance te verwerven en het debiet door de TEV na de operatie tot explantatie. Deze gegevensverzameling een onmisbaar analyse van de TEV terwijl het in het proces van hermodellering.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
OPMERKING: Dit protocol is aan de State University van New York in Buffalo door de Animal Care en gebruik Comite.
1. Pre-operatieve voorbereiding
2. Chirurgische Operatie
3. In Vivo Monitoring
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Meer dan 30 schapen hebben de chirurgische techniek in dit rapport beschreven voor de implantatie van Tevs (in press) 9 ondergaan. Een tabel met een overzicht van de meest recente schapen operaties na protocol optimalisatie zijn weergegeven in tabel 2. Alle schapen hersteld na TEV implantatie zonder levensbedreigende complicaties. In sommige dieren, werd fibrose waargenomen bij natief slagader dichtbij het uiteinde van de inwonende arteriële catheter. Een significante toename van ontsteking m...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Het doel van dit rapport is om een betrouwbaar en reproduceerbaar procedure verstrekken aan implantaat Tevs van interesse in de schapen halsslagader. De inheemse halsslagaders van de dieren die worden gebruikt in dit model waren 0,5-0,75 mm in dikte en 4,5-5 mm buitendiameter. De chirurgische techniek die hier beschreven is succesvol geweest voor het implanteren Tevs variërende geometrieën meten 0,25-1 mm dikte, 5/4 mm buitendiameter en 4 cm lang met succes blijkt effectief tot 3 maanden durende het beoogde eindpunt. ...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Er zijn geen bekendmakingen te melden.
Dit werk werd ondersteund door subsidies van de Nationale Hart en Long Instituut (R01 HL086582) en de New York Stem Cell Science Fund (NYSTEM, Contract # C024316) om STA en DDS Illustraties gebruikt in Jupiter video werden ingevuld door John Nyquist; Medische Illustrator van State University of New York in Buffalo.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Pressure Transducer | Becton Dickinson | P23XL-1 | Aantal: 1+ (1 voor elke slagader). Wordt gebruikt met watergevulde membraandomen. |
| Versterker en transducer box | Gould | 5900 Signal Conditioner Cage | Aantal: 1. Twee transducers en versterkers moeten in de kooi zijn opgenomen. Hoewel dit specifieke apparaat mogelijk niet meer verkrijgbaar is, zullen andere commercieel verkrijgbare druktransducers met een BNC/analoog uitgang communiceren met de Sonometrics apparatuur. |
| T403 Console met TS420 perivascular flowmeter module (x2) | Transonic Systems | T403 module en TS420 (x2) | Aantal: 1. Stroomsondes die het debiet door elk van de halsslagaders meten, worden aangesloten op elk van de TS420-units. |
| Digitale ultrasone meeteenheid | Sonometrics | TR-USB | Aantal: 1 |
| Flow Probe Precision S-Series 4 mm | Transonic Systems Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | Aantal: 2 |
| 1 mm Sonometrics Kristallen | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | Aantal: 2-4 (2 voor elke slagader) |
| Catheter voor implantatie | BD (Becton Dickinson) | 381447 | Aantal: 1+ (1 voor elke slagader). De katheter wordt gesneden en bevestigd aan microbore buis, stilletje wordt gebruikt voor inbrenging. |
| Tygon Microbore Buis | Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulation S-54-HL | Op maat gesneden voor een verlengset |
| Luer Stub Adapter | BD (Becton Dickinson) | 427564 (20 gauge) | Aantal: 1+ (1 voor elke arteriële katheter) |
| Surflo Injectie Plug | Terumo | SR-IP2 | Aantal: 1+ (1 voor elke arteriële katheter) |
| Meadox | PTFE (Teflon) Vilt | 19306 | Op maat gesneden. Het PTFE vilt dat werd gebruikt in onze studies is niet meer verkrijgbaar. Er zijn echter vergelijkbare bedrijven zoals “Surgical Mesh” die gelijkwaardige producten aanbieden. |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.