Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Synthetische Methodologie voor Asymmetric Ferroceen Afgeleid Bio-conjugaat Systems via Solid Phase Resin-gebaseerde Methodologie

9.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52399

⸱

12 maart 2015

 ,  ,  , 
1Department of Chemistry, Texas Christian University

In dit artikel

Samenvatting

De synthese van asymmetrische soorten ferroceen is uitdagend met behulp van oplossingstechnieken. Dit rapport richt zich op de methoden die zijn uitgevoerd om een ferroceen-biotine bioconjugaat te produceren met behulp van eenvoudige en schone reacties die zijn uitgevoerd via vaste-fase synthese. Het is aangetoond dat de incorporatie van een thiolatgroep het vermogen geeft om te immobiliseren op goudoppervlakken.

Samenvatting

Vroege detectie is een sleutel tot een succesvolle behandeling van de meeste ziekten en in het bijzonder noodzakelijk voor de diagnose en behandeling van vele soorten kanker. De meest gebruikte technieken gebruikt worden beeldvormingsmodaliteiten zoals Magnetic Resonance Imaging (MRI), Positron Emissie Topografie (PET) en computertomografie topografie (CT) en zijn optimaal voor het begrijpen van de fysieke structuur van de ziekte, maar slechts eenmaal per vier worden uitgevoerd zes weken door het gebruik van beeldvormende middelen en de totale kosten. Met dit in het achterhoofd, de ontwikkeling van de 'point of care "technieken, zoals biosensoren, die het stadium van de ziekte en / of werkzaamheid van de behandeling in het kantoor van de arts te evalueren en doen dat in een tijdig, zou behandelprotocollen revolutioneren. 1 als een middel voor het verkennen ferroceen gebaseerde biosensoren voor de detectie van biologisch relevante moleculen 2, zijn methoden ontwikkeld om ferroceen biotine-biologische conjugaten die hierin beschreven produceren. Dit rapport zal zich richten op een biotine-ferroceen-cysteïne systeem dat kan worden geïmmobiliseerd op een gouden ondergrond.

Inleiding

Biosensoren zijn kleine apparaten die biomoleculaire herkenning technologie in dienst als platform voor selectieve analyse en worden gebruikt voor hun specificiteit, snelheid en lage kosten. Elektrochemische biosensoren voor de detectie van biomoleculen bij het ​​front van dit veld vanwege hun eenvoud, kosteneffectiviteit en hoge gevoeligheid. 1,3 De algemene anatomie van deze sensoren een elektrode is voorzien van een herkenningsmolecuul specifiek voor de biologische merker plaats . Binding van de biomarker van de herkenningsmolecuul resulteert in een lokale verandering van mogelijke of feitelijke die kunnen worden gedetecteerd door meting. Om de herkenningsdeel datum kan variëren van enzymen, 4-8 antilichamen, 9-12 hele cellen, 13-16 receptoren, 17-20 peptiden 21-23 en DNA-24 en zijn grotendeels gericht op grotere, biologische moleculen. 25-28 Onderzoek inspanningen in deze arena zijn voornamelijk geconcentreerd op immunosensoren wheopnieuw een immunoglobuline wordt geïmmobiliseerd met een redox actieve kern (zoals ferroceen) en gebruikt om een ​​antilichaam van belang te detecteren. Deze studies zijn uitgesloten van klinische toepassingen te wijten aan slechte precisie en tijd het verbruik als gevolg van de complicaties die voortvloeien uit het gebruik van antigeen / antilichamen. 1,3 Groeiende aandacht is gericht op de detectie van kleine moleculen (minder dan 1 kg / mol) van biomedische , voeding en milieu interesse in aanvulling op de nationale veiligheid. 29 De bekendste voorbeelden van biosensor apparaten zijn zelftest glucose monitors, die gezeefdrukt enzym elektroden gekoppeld aan een pocket-size amperometrisch meter hebben. Deze systemen gebruiken typisch een coulometrische werkwijze waarbij de totale hoeveelheid lading die door de glucose oxidatiereactie wordt gemeten over een periode van tijd. Verhandelbare apparaten moeten draagbaar, robuust en met de hand worden gehouden om gebruik facile voor de bevolking te maken in het algemeen.

Redox-tags zoals ferrocene zijn necessary om de elektrochemische detectie van biomarkers of kleine moleculen in oplossing meeste biomarkers zijn niet intrinsiek elektrochemisch actief. 30-38 Ferrocene een organometallische molecule dat een gouden standaard voor elektrochemie, waardoor het een uitstekende keuze voor integratie in elektrochemische biosensoren maakt. -Ferroceen gebaseerde redox-actieve soorten hebben al veel aandacht oogstte vanwege hun kleine formaat, goede stabiliteit, gemakkelijke synthetische toegang, gemakkelijk chemische modificatie, relatieve lipofiliteit, en het gemak van redox-tuning. 3,30-42 Kleine moleculen op basis van de ferrocene kern hebben uitgebreid gebruikt als detectoren van metaalionen en kleine moleculen. 32-38,43 Systems richt grotere soorten zoals biomoleculen hebben de bevestiging van grote antilichamen of immunoglobulinen te ferroceenderivaten die zijn ingebed op een elektrochemische oppervlak benut. 1,3,39 44 In elk geval, de potentiële en actuele intensity van de Fe III / Fe II redoxkoppel werd gewijzigd op moleculaire koppeling, waardoor een nieuwe spectroscopische handgreep die de aanwezigheid van de analyt molecuul. Deze wijziging vloeit voort uit de grote overlap ontstaat tussen de pi-systeem van het cyclopentadienyl ringen en de ijzer d-orbitalen. Als de pi-systeem gemodificeerd, dwz gederivatiseerd of reageerden dan de orbitale interactie beurt verandering. Dit zal de Fe kern beïnvloeden en kan worden waargenomen als een verschuiving in het potentieel van de Fe III / Fe II koppel. 40,45,46 deze eigenschappen dergelijk systeem aantrekkelijk voor gebruik als een van hoeveelheid middel in een immunoassay of elektrochemische biosensor.

Om ferroceen met systemen voor specifieke biosensor capaciteit produceren optimaal een Cp-ring veranderen met de bio-receptor specifiek is voor een doelwitmolecuul en gebruik de andere Cp-ring als moleculaire ketting aan de elektrochemische uitlezing of electrode (Figuur 1). Synthese van deze asymmetrische ferroceenderivaten wordt uitgedaagd door nevenreacties en de vorming van dimere en polymere species gevormd bij intermoleculaire verknoping. 47 echter koppelingschemie produceren van een amidebinding is de meest directe route naar eenvoudige derivaten van ferroceen met biologische componenten bieden peptiden en hun metabolieten. Daarom kan vastefasetechnieken eerst ontwikkeld in de jaren 1950 door Merrifield voor peptidesynthese worden toegepast organometallische verbindingen die ferroceen. Door het gebruik van de orthogonaal gesubstitueerde 1'-Fmoc-amino-ferroceen-1-carbonzuur molecuul, een ferroceen systeem dat een receptor groep (biotine), elektrochemische uitlezing (ferroceen), en immobiliseren-linker component (cysteine) kan bevatten, geconstrueerd en hierin beschreven. De synthese van deze bio-conjugaat wordt besproken, evenals bewijs voor immobilisatie op een gouden ondergrond. Dit werk vertegents de eerste presentatie van een systeem dat bestaat uit biotine, ferroceen en een aminozuur voor immobilisatie op een gouden oppervlak.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Synthese van biotine-Fc-cysteïne (1)

  1. Vaste fase methoden produceren hars-gebonden 1.
    1. Plaats biotine geladen hars (250 mg, 0.145 mmol) in een gefrit spuit en zwellen van de hars door het opstellen dimethylformamide (5 ml) en schudden van de spuit op een lab schudder gedurende 20 min. Verdrijf de oplossing en herhaal dimethylformamide zwelling nog een keer.
    2. Verwijder de Fmoc beschermende groep door toevoeging van 4-6 ml 20% piperidine in dimethylformamide om de injectiespuit gevolgd door 10-15 min schudden. Herhaal de ontscherming procedure voor elke 4-6 ml piperidine. Spoel de hars met een reeks 3x dimethylformamide, 3x dimethylformamide: methanol (1: 1), 3x methanol: dichloormethaan (1: 1), 3x dichloormethaan, ~ 5 ml elk. Doe een ninhydrine test (+) op een kleine steekproef (~ 10) van de kralen succesvolle deprotectie door de aanwezigheid van blauwe bij verhitting bevestigen.
    3. Meng een oplossing die 1'-Fmoc-amino-ferroceen-1-carbonzuur(203.3 mg, 0,4350 mmol), 1-hydroxybenzotriazool hydraat (58.8 mg, 0.413 mmol), diisopropyl carbodiimide (0,0673 ml, 0,435 mmol), diisopropylethylamine (0,0757 ml, 0,435 mmol) en een 4: 1 mengsel van dichloormethaan en dimethylformamide. Trekken deze in de fritted spuit en schud op een lab shaker gedurende 6 uur. Verdrijven vervolgens de oplossing uit de naald en was zoals eerder beschreven.
    4. Voer de ninhydrinetest (-) zoals hierboven beschreven koppeling bevestigen. De ninhydrine test kan nog steeds nuttig bij de bevestiging koppeling ondanks de oranje kleur van de kraal afgeleid van de bevestiging van het ijzer bevattende deel zijn.
    5. Verwijder de Fmoc-groep door de toevoeging van 20% piperidine in dimethylformamide en gewassen zoals hierboven beschreven. De ninhydrine test (+) gebruiken om Fmoc verwijdering te bevestigen.
    6. Bereid een oplossing bestaande uit Fmoc-Cys (Trt) -OH (254,8 mg, 0,4350 mmol), 1-hydroxybenzotriazool hydraat (58,8 mg, 0,4125 mmol), diisopropyl carbodiimide (0,0673 ml, 0,4350mmol), diisopropylethylamine (0,0757 ml, 0,4350 mmol) en een 4: 1 mengsel van dichloormethaan en dimethylformamide. Voeg dit cysteïnekoppeling cocktail de fritted spuit en schud gedurende 6 uur. Was met het eerder beschreven protocol.
    7. Bevestig koppeling met de ninhydrinetest (-), gevolgd door verwijdering van de Fmoc component met 20% piperidine en wassen. Controleer de vrije terminale amine met de ninhydrinetest (+).
  2. Splitsing van 1 van de hars.
    1. Voeg een oplossing van TFA (9.45 ml), water (0,25 ml), 1,2-ethaandithiol (0,25 ml) en triisopropyl- silaan (0,1 ml), het aan de spuit en schud voorzichtig 4 uur.
    2. Verzamel de resulterende rood-bruine oplossing in een Eppendorf buisje en damp de TFA langzaam met een luchtstroom.
    3. Voeg koude diethylether (~ 15 ml) aan de Eppendorf buis precipiteren 1, die zacht schudden zal vormen. Isoleer het product door centrifugatie (1 g, 5 min). Tduivin herhalingscycli diethylether wassingen (~ 60 ml totaal) en de centrifuge te verkrijgen 1 als een rood / bruine vaste stof.

2. Karakterisering en analyse van 1

  1. Controleer of de identiteit overeenkomt met de verbinding en de samenstelling getoond in figuur 2 met 1H (16 scans) en 13C NMR (512 scans) in gedeutereerd methanol (300 ui) en ESI-MS analyse.
    Verwachten dat de volgende resultaten:
    1H NMR spectrum (CD3OD) δ / ppm: 1,407-1,684 (m, 6H), 2,245 (t, 2H), 2,665-3,150 (m, 12H), 4,015 (t, 1H), 4,104 (d, 2H ), 4,274 (q, 1H), 4,426 (d, 2H), 4,479 (q, 1H), 4,595 (t, 1H) en 13C NMR spectrum (CD3OD) δ / ppm: 24,644 (CH2), 25,472 (CH2), 28,051 (CH2) 28,300 (CH2) 35,474 (CH2) 38,698 (CH2) 39,241 (CH2) 39,717 (CH2), 55,340 / 55,538 (Cp-ring), 60,286 (CH), 61,964 (CH), 62,521 / 62,821 (Cp-ring), 66,038 / 66,170 (Cp-ring), 69,153 / 69,328 (Cp-ring), 71,468 / 71,593 (Cp-ring), 76,466 (CH), 171,770 (C = O), 175,361 (C = O).
    ESI-MS (m / z): Gevonden: 639,00 [1 + Na] +, Theoretisch: 639,1 [1 + Na] + en HR-MS (m / z): Gevonden: 617,2049 [1 + H] +, Theoretisch: 617.1622 [1 + H] +.
  2. Voer een HPLC, elementaire analyse om de samenstelling van geïsoleerde 1 bevestigen.
    Voer HPLC chromatogrammen van een C8 omgekeerde fase kolom met 100% MeOH bij een stroomsnelheid van 0,5 ml / min. Opmerking: retentie HPLC tijden waren: 3,198-4,674 min.

3. Immobilisatie van 1 op een Gold Surface

  1. Cut polymeer gesteund goud slides in vierkanten van ~ 0,25 in 2.
  2. Vul een 50 ml beker met DI-water oplossing van 1 (~ 1 mM).
  3. Voeg de gouden dia aan de beker en dek af met een horlogeglas. Alleow het glaasje te incuberen O / N bij RT zonder agitatie.
  4. Verwijder het goud dia uit de oplossing en laat het drogen aan de lucht.
  5. Verkrijgen scanning elektronenmicroscopie beelden met een scanning elektronenmicroscoop (of gelijkwaardig) te observeren geïmmobiliseerd 1.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De hars gebonden vorm 1 wordt getoond in figuur 2. De covalente hechting van het ferroceen component ontstaat een oranje tint aan de harskorrels die persistent met continuwassen en indicatief van een geïmmobiliseerd ijzerhoudend complex tegenover ijzerabsorptie door PEG component van de harsparel. De hars- vorm 1 is identiek in kleur aan de harskorrels. Na verwijdering van de verbinding uit de hars kralen, de zuiverheid en opbrengst (68%) als gevolg van de methode is ve...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De synthese van asymmetrische ferroceenderivaten is een uitdaging in oplossing. Pogingen produceren 1 in oplossing resulteerde in een lage opbrengst van het gewenste product (minder dan 20%). Ook reacties gebruikmaking 1'-amino-ferroceencarbonzuur (sans Fmoc) en hars gebonden biotine resulteerde in onoplosbaar product in overeenstemming met het gepolymeriseerde product gerapporteerd door Baristic et al. en minimale artikel. 47 Dit wordt verder gecompliceerd door ferrocee...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

KG werd gesteund door de RA Welch Stichting subsidie ​​P-1760, TCU Andrews Instituut voor Wiskunde & Science Education (KG), TCU Onderzoek en Creativiteit Activity Grant (KG) en TCU SERC Grant (tot JHS).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Biotin Novatag ResinNovaBiochem8550510001
TORVIQ 10 ml Luer Lock Fritted SyringeFisherNC9299151
piperidineAcrosP/3520/PB05
ninhydrin testSigma-Aldrich60017-1ea
1’-Fmoc-amino-ferrocene-1-carboxylic acidOmm ScientificSpecial Order
N,N′-DiisopropylcarbodiimideSigma-AldrichD125407-5G
Fmoc-Cys(Trt)-OHNovabiochem8520080025
trifluoroacetic acidSigma-AldrichT5408
1,2-ethanedithiolSigma-Aldrich2930
triisopropyl silaneSigma-Aldrich233781
Eppendorf tubes (20 ml)any source
methanolany sourcedroog met moleculaire zeef voor gebruik & bewaar in 100 ml media fles voor gemakkelijk gebruik
dichloromethaneany sourcedroog met moleculaire zeef voor gebruik & bewaar in 100 ml media fles voor gemakkelijk gebruik
dimethylformamideany sourcedroog met moleculaire zeef voor gebruik & bewaar in 100 ml media fles voor gemakkelijk gebruik
centrifugeany source

Referenties

  1. Wang, J. Electrochemical biosensors: towards point-of-care cancer diagnostics. Biosens Bioelectron. 21 (10), 1887-1892 (2006).
  2. Scarborough, J. H., Brusoski, K., Brewer, S., Green, K. N. Solid phase synthesis of ferrocene-biotin bioconjugates and reactivity with avidin. A paradigm for development of electrochemical biosensors. , Texas Christian University. Fort Worth, Texas. (2014).
  3. Zhang, S., Zheng, F., Wu, Z., Shen, G., Yu, R. Highly sensitive electrochemical detection of immunospecies based on combination of Fc label and PPD film/gold nanoparticle amplification. Biosens Bioelectron. 24 (1), 129-135 (2008).
  4. Gobi, K. V., Mizutani, F. Layer-by-layer construction of an active multilayer enzyme electrode applicable for direct amperometric determination of cholesterol. Sensors and Actuators. 80 (3), 272-277 (2001).
  5. Gobi, K. V., Mizutani, F. Amperometric detection of superoxide dismutase at cytochrome c-immobilized electrodes: Xanthine oxidase and ascorbate oxidase incorporated biopolymer membrane for in-vivo analysis. Analytical Sciences. 17 (1), 11-15 (2001).
  6. Gobi, K. V., Sato, Y., Mizutani, F. Mediatorless superoxide dismutase sensors using cytochrome c-modified electrodes: Xanthine oxidase incorporated polyion complex membrane for enhanced activity and in vivo analysis. Electroanalysis. 13 (5), 397-403 (2001).
  7. Shankaran, D. R., Uehara, N., Kato, T. A metal dispersed sol-gel biocomposite amperometric glucose biosensor. Biosensor.., & Bioelectronics. 18 (5-6), 721-728 (2003).
  8. Yamamoto, K., Xu, F., Shi, G. Y., Kato, T. On-line biosensor for detection of glucose, choline and glutamate simultaneously integrated with microseparation system. Journal of Pharmacological Sciences. 91, 211p-211 (2003).
  9. Luppa, P. B., Kaiser, T., Cuilleron, C. Y. Ligand-binding studies of sex hormone-binding globulin with 17alpha-dihydrotestosterone derivatives as ligands using a surface plasmon resonance biosensor. Clinical Chemistry. 47 (6), A9-A9 (2001).
  10. Luppa, P. B., Sokoll, L. J., Chan, D. W. Immunosensors - principles and applications to clinical chemistry. Clinica Chimica Acta. 314 (1-2), 1-26 (2001).
  11. Mallat, E., Barcelo, D., Barzen, C., Gauglitz, G., Abuknesha, R. Immunosensors for pesticide determination in natural waters. Trac-Trends in Analytical Chemistry. 20 (3), 124-132 (2001).
  12. Pemberton, R. M., Hart, J. P., Mottram, T. T. An electrochemical immunosensor for milk progesterone using a continuous flow system. Biosensor.., & Bioelectronics. 16 (9-12), 715-723 (2001).
  13. Pancrazio, J. J., Whelan, J. P., Borkholder, D. A., Ma, W., Stenger, D. A. Development and application of cell-based biosensors. Annals of Biomedical Engineering. 27 (6), 697-711 (1999).
  14. May, K. M. L., Wang, Y., Bachas, L. G., Anderson, K. W. Development of a whole-cell-based biosensor for detecting histamine as a model toxin. Analytical Chemistry. 76 (14), 4156-4161 (2004).
  15. Taylor, C. J., Bain, L. A., Richardson, D. J., Spiro, S., Russell, D. A. Construction of a whole-cell gene reporter for the fluorescent bioassay of nitrate. Analytical Biochemistry. 328 (1), 60-66 (2004).
  16. Philp, J. C., et al. Whole cell immobilised biosensors for toxicity assessment of a wastewater treatment plant treating phenolics-containing waste. Analytica Chimica Acta. 487 (1), 61-74 (2003).
  17. Subrahmanyam, S., Piletsky, S. A., Turner, A. P. F. Application of natural receptors in sensors and assays. Analytical Chemistry. 74 (16), 3942-3951 (2002).
  18. Ryberg, E., et al. Identification and characterisation of a novel splice variant of the human CB1 receptor. Febs Letters. 579 (1), 259-264 (2005).
  19. Cooper, M. A. Advances in membrane receptor screening and analysis. Journal of Molecular Recognition. 17 (4), 286-315 (2004).
  20. Kumbhat, S., et al. A novel receptor-based surface-plasmon-resonance affinity biosensor for highly sensitive and selective detection of dopamine. Chemistry Letters. 35 (6), 678-679 (1246).
  21. Yemini, M., Reches, M., Gazit, E., Rishpon, J. Peptide nanotube-modified electrodes for enzyme-biosensor applications. Analytical Chemistry. 77 (16), 5155-5159 (2005).
  22. Endo, T., Kerman, K., Nagatani, N., Takamura, Y., Tamiya, E. Label-free detection of peptide nucleic acid-DNA hybridization using localized surface plasmon resonance based optical biosensor. Analytical Chemistry. 77 (21), 6976-6984 (2005).
  23. Drummond, T. G., Hill, M. G., Barton, J. K. Electrochemical DNA sensors. Nature Biotechnology. 21 (10), 1192-1199 (2003).
  24. Piunno, P. A. E., Krull, U. J. Trends in the development of nucleic acid biosensors for medical diagnostics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 381 (5), 1004-1011 (2005).
  25. Dechtrirat, D., et al. Electrochemical displacement sensor based on ferrocene boronic acid tracer and immobilized glycan for saccharide binding proteins and E. coli. Biosensor.., & Bioelectronics. 58, 1-8 (2014).
  26. Lacina, K., et al. Combining ferrocene, thiophene and a boronic acid: a hybrid ligand for reagentless electrochemical sensing of cis-diols. Tetrahedron Letters. 55 (21), 3235-3238 (2014).
  27. Takahashi, S., Anzai, J. Recent Progress in Ferrocene-Modified Thin Films and Nanoparticles for Biosensors. Materials. 6 (12), 5742-5762 (2013).
  28. Liu, L., et al. Amplified voltammetric detection of dopamine using ferrocene-capped gold nanoparticle/streptavidin conjugates. Biosensor.., & Bioelectronics. 41, 730-735 (2013).
  29. Shankaran, D. R., Gobi, K. V. A., Miura, N. Recent advancements in surface plasmon resonance immunosensors for detection of small molecules of biomedical, food and environmental interest. Sensors and Actuators B-Chemical. 121 (1), 158-177 (2007).
  30. Szarka, Z., Kuik, Á, Skoda-Földes, R., Kollár, L. Aminocarbonylation of 1,1′-diiodoferrocene, two-step synthesis of heterodisubstituted ferrocene derivatives via homogeneous catalytic carbonylation/coupling reactions. Journal of Organometallic Chemistry. 689 (17), 2770-2775 (2004).
  31. Niu, H. T., et al. Imidazolium-based macrocycles as multisignaling chemosensors for anions. Dalton Trans. (28), 3694-3700 (2008).
  32. Qing, G. -Y., Sun, T. -L., Wang, F., He, Y. -B., Yang, X. Chromogenic Chemosensors forN-Acetylaspartate Based on Chiral Ferrocene-Bearing Thiourea Derivatives. European Journal of Organic Chemistry. (6), 841-849 (2009).
  33. Romero, T., Caballero, A., Espinosa, A., Tarraga, A., Molina, P. A multiresponsive two-arm ferrocene-based chemosensor molecule for selective detection of mercury. Dalton Trans. (12), 2121-2129 (2009).
  34. Zapata, F., Caballero, A., Espinosa, A., Tarraga, A., Molina, P. A selective redox and chromogenic probe for Hg(II) in aqueous environment based on a ferrocene-azaquinoxaline dyad. Inorg Chem. 48 (24), 11566-11575 (2009).
  35. Alfonso, M., Tarraga, A., Molina, P. Ferrocene-based multichannel molecular chemosensors with high selectivity and sensitivity for Pb(II) and Hg(II) metal cations. Dalton Trans. 39 (37), 8637-8645 (2010).
  36. Zapata, F., Caballero, A., Molina, P., Tarraga, A. A ferrocene-quinoxaline derivative as a highly selective probe for colorimetric and redox sensing of toxic mercury(II) cations. Sensors (Basel). 10 (12), 11311-11321 (2010).
  37. Thakur, A., Sardar, S., Ghosh, S. A highly selective redox, chromogenic, and fluorescent chemosensor for Hg2+ in aqueous solution based on ferrocene-glycine bioconjugates). Inorg Chem. 50 (15), 7066-7073 (2011).
  38. Sathyaraj, G., Muthamilselvan, D., Kiruthika, M., Weyhermüller, T., Nair, B. U. Ferrocene conjugated imidazolephenols as multichannel ditopic chemosensor for biologically active cations and anions. Journal of Organometallic Chemistry. 716, 150-158 (2012).
  39. Kwon, S. J., Kim, E., Yang, H., Kwak, J. An electrochemical immunosensor using ferrocenyl-tethered dendrimer. Analyst. 131 (3), 402-406 (2006).
  40. Pinto, A., Hoffmanns, U., Ott, M., Fricker, G., Metzler-Nolte, N. Modification with Organometallic Compounds Improves Crossing of the Blood-Brain Barrier of [Leu(5)]-Enkephalin Derivatives in an In Vitro Model System. Chembiochem. 10 (11), 1852-1860 (2009).
  41. Barisic, L., et al. The first ferrocene analogues of muramyldipeptide. Carbohydr Res. 346 (5), 678-684 (2011).
  42. Brusoski, K., Green, K. N. Novel click derivatives of ferrocene and their applications toward construction of electrochemical biosensors. Abstracts of Papers, 243rd ACS National Meetin.., & Exposition. 2012 Mar 25-29, San Diego, CA, United States, , BIOL-28. (2012).
  43. Bucher, C., Devillers, C. H., Moutet, J. -C., Royal, G., Saint-Aman, E. Anion recognition and redox sensing by a metalloporphyrin–ferrocene–alkylammonium conjugate. New Journal of Chemistry. 28, 1584-1589 (2004).
  44. Tanaka, S., Yoshida, K., Kuramitz, H., Sugawara, K., Nakamura, H. Electrochemical detection of biotin using an interaction between avidin and biotin labeled with ferrocene at a perfluorosulfonated ionomer modified electrode. Analytical Sciences. 15 (9), 863-866 (1999).
  45. Real-Fernandez, F., et al. Ferrocenyl glycopeptides as electrochemical probes to detect autoantibodies in multiple sclerosis patients' sera. Biopolymers. 90 (4), 488-495 (2008).
  46. Husken, N., Gasser, G., Koster, S. D., Metzler-Nolte, N. Four-potential' ferrocene labeling of PNA oligomers via click chemistry. Bioconjug Chem. 20 (8), 1578-1586 (2009).
  47. Barisic, L. Croatica Chemica Acta. 75, 199-210 (2002).
  48. Kirin, S. I., Noor, F., Metzler-Nolte, N. Manual Solid-Phase Peptide Synthesis of Metallocene–Peptide Bioconjugates. Journal of Chemical Education. 84 (1), 108-111 (2007).
  49. Barisic, L., et al. Helically chiral ferrocene peptides containing 1 '-aminoferrocene-1-carboxylic acid subunits as turn inducers. Chemistry-a European Journal. 12 (19), 4965-4980 (2006).
  50. Mahmoud, K., Long, Y. -T., Schatte, G., Kraatz, H. -B. Electronic communication through the ureylene bridge: spectroscopy, structure and electrochemistry of dimethyl 1′,1′-ureylenedi(1-ferrocenecarboxylate). Journal of Organometallic Chemistry. 689 (13), 2250-2255 (2004).
  51. Mahmoud, K. A., Kraatz, H. B. Synthesis and electrochemical investigation of oligomeric ferrocene amides: Towards ferrocene polyamides. Journal of Inorganic and Organometallic Polymers and Materials. 16 (3), 201-210 (2006).
  52. Mahmoud, K. A., Kraatz, H. B. A bioorganometallic approach for the electrochemical detection of proteins: A study on the interaction of ferrocene-peptide conjugates with papain in solution and on au surfaces. Chemistry-a European Journal. 13 (20), 5885-5895 (2007).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Ferrocene biotine conjugaatbiosynthese van conjugatenimmobilisatie op goudoppervlakpeptidekoppelingharszwellingdeprotectiestappenproductisolatieNMR spectroscopiescanningelektronenmicroscopie
Synthetische Methodologie voor Asymmetric Ferroceen Afgeleid Bio-conjugaat Systems via Solid Phase Resin-gebaseerde Methodologie
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleid

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.