Een goedkope, Scalable Behavioral Test voor het meten Ethanol Sedatie Gevoeligheid en Rapid Tolerantie in<em&gt; Drosophila</em

Simran Sandhu; Arnavaz P. Kollah; Lara Lewellyn; Robin F. Chan; Mike Grotewiel

doi:10.3791/52676

Methodenartikel

Een goedkope, Scalable Behavioral Test voor het meten Ethanol Sedatie Gevoeligheid en Rapid Tolerantie in

10K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52676

⸱

15 april 2015

Simran Sandhu¹ , Arnavaz P. Kollah¹ , Lara Lewellyn¹ , Robin F. Chan¹ , Mike Grotewiel¹^,²

¹Department of Human and Molecular Genetics, Virginia Commonwealth University, ²VCU Alcohol Research Center, Virginia Commonwealth University

In dit artikel

Samenvatting

Eenvoudige tests voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij Drosophila vergemakkelijken het gebruik van dit modelorganisme voor het onderzoeken van deze belangrijke ethanol-gerelateerde gedragingen. Hier wordt een relatief eenvoudige, schaalbare test beschreven voor het meten van ethanolgevoeligheid en snelle tolerantie bij vliegen.

Samenvatting

Alcoholgebruik stoornis (AUD) is een ernstig gezondheidsprobleem uitdaging. Ondanks een grote erfelijke component AUD, zijn weinig genen eenduidig betrokken bij hun etiologie. De fruitvlieg Drosophila melanogaster, is een krachtig model voor het verkennen van moleculair genetische mechanismen die ten grondslag liggen aan alcohol gerelateerde gedrag en daarom bezit is van een grote belofte voor het identificeren en begrijpen van de functie van genen die AUD beïnvloeden. Het gebruik van het Drosophila model voor deze soorten onderzoeken afhankelijk van de beschikbaarheid van testen die gedragsreacties ethanol betrouwbaar te meten. Dit rapport beschrijft een test geschikt is voor de beoordeling van ethanol gevoeligheid en snelle tolerantie in vliegen. Ethanol gevoeligheid gemeten in deze assay wordt beïnvloed door het volume en de concentratie van ethanol gebruikt, verschillende eerder beschreven genetische manipulaties, en ook hoe lang het vliegen worden ondergebracht zonder voedsel ogenblik van de proef. Daarentegen ethanol sensitivity gemeten in deze test wordt niet beïnvloed door de kracht van vlieg behandeling, geslacht van de vliegen en suppletie kweekmedium met antibiotica of levende gist. Drie verschillende methoden voor het kwantificeren ethanol gevoeligheid beschreven uiteindelijk toe leidt kenmerken ononderscheidbaar ethanol gevoeligheid resultaten. De schaalbare karakter van deze test, in combinatie met de algehele eenvoud aan de set-up en de relatief lage kosten, maken het geschikt voor kleine en grote schaal genetische analyse van ethanol gevoeligheid en snelle tolerantie in Drosophila.

Inleiding

Alcoholgebruik stoornis (AUD) is een enorm gezondheidsprobleem wereldwijd (beoordeeld in ^1). Hoewel de mechanismen die de ontwikkeling van AUD complex, deze aandoeningen hebben een belangrijke genetische component (bijvoorbeeld ^2). De grote erfelijkheid van AUD en de geconserveerde gedragsreacties naar ethanol in heel veel soorten (beoordeeld in ^3,4) sterke interesse in het gebruik van genetisch model organismen om de betrokkenheid van specifieke genen in-ethanol gerelateerd gedrag in de richting van een beter inzicht in de moleculaire basis van onderzoeken hebben gegenereerd AUD. De fruitvlieg Drosophila melanogaste....