Methodenartikel

Generatie van Scalable, Metaalkleur High-breedteverhouding Nanocomposieten in een Biological Liquid Medium

8.8K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/52901

⸱

8 juli 2015

 ,  ,  ,  , 
1Biophysics Department, Centenary College of Louisiana, 2Department of Chemistry, Louisiana Tech University, 3Department of Integrative Physiology, University of North Texas Health Sciences Center, 4Biomedical Engineering, Louisiana Tech University, 5Institute for Micromanufacturing, Louisiana Tech University

In dit artikel

Samenvatting

Hier presenteren we een protocol om nieuwe, high-aspect ratio biocomposieten synthetiseren onder biologische omstandigheden en in vloeibare media. De biocomposieten schaal van nanometers tot micrometers in diameter en lengte respectievelijk. Koperen nanodeeltjes (CNPs) en kopersulfaat in combinatie met cystine zijn de belangrijkste componenten voor de synthese.

Samenvatting

Het doel van dit protocol is de synthese van twee nieuwe biocomposieten met hoge aspectverhouding structuren beschrijven. De biocomposieten bestaan ​​uit koper en cystine, met ofwel koper nanodeeltjes (CNPs) of kopersulfaat dragen de metallische component. Synthese wordt uitgevoerd in vloeistof onder biologische omstandigheden (37 ° C) en de zelf-geassembleerde samengestelde vorm na 24 uur uitgevoerd. Eenmaal gevormd, deze composieten zijn zeer stabiel in zowel vloeibare media in een gedroogde vorm. De composieten schaal van nano- tot range micro- lengte en van enkele microns tot 25 nm in diameter. Veldemissie scanning elektronen microscopie met energie dispersieve röntgenspectroscopie (EDX) toonden aan dat zwavel aanwezig was in de NP-afgeleide lineaire structuur, hoewel het afwezig het uitgangsmateriaal CNP materiaal, waardoor cystine als bron van zwavel in de definitieve bevestiging nanocomposieten . Tijdens de synthese van deze lineaire nano- en micro-composieten, een breed scala aan lengtes van structures wordt gevormd in de synthese vat. Sonicatie van het vloeistofmengsel na synthese werd aangetoond te helpen bij het beheersen gemiddelde grootte van de structuur van de vermindering van de gemiddelde lengte met verhoogde moment van sonicatie. Aangezien de gevormde structuren zijn zeer stabiel, niet agglomereren, en worden gevormd in de vloeibare fase, kunnen centrifugeren worden gebruikt om te helpen bij het concentreren en scheiden gevormde composieten.

Inleiding

Koper is een zeer reactieve metaal die in de biologische wereld essentieel is in sommige enzymfuncties 1,2, maar in hogere concentraties krachtig toxisch is, ook in de nanopartikelvorm 3,4. De bezorgdheid over kopertoxiciteit is relevanter geworden naarmate CNP's en andere op koper gebaseerde nanomaterialen worden gebruikt, vanwege de verhoogde oppervlakte/massa voor nanostructuren. Zodoende kan zelfs een kleine massa koper, in nanopartikelvorm, lokale toxiciteit veroorzaken vanwege zijn vermogen om de cel te penetreren en te worden afgebroken in reactieve vormen. Sommige biologische soorten kunnen complexen vormen met en metaalionen cheleren, en ze zelfs in biologische structuren opnemen, zoals beschreven is bij zeeschelpen 5. Bij het bestuderen van de potentiële toxische effecten van nanomaterialen 4, werd ontdekt dat na verloop van tijd, en onder biologische omstandigheden die worden gebruikt voor typische celkweek (37 °C en 5% CO2), stabiele koper biocomposites konden worden gevormd met een hoge aspectverhouding (lineaire) structuur.

Door middel van eliminatie werd de eerste ontdekking van deze lineaire biocomposites, die plaatsvond in volledige celkweek media, vereenvoudigd tot een gedefinieerd protocol van essentiële elementen die nodig zijn voor de biocomposites om zichzelf te assembleren. Zelf-assemblage van twee typen zeer lineaire biocomposites werd ontdekt om mogelijk te zijn met twee startmetalen componenten: 1) CNP's en 2) kopersulfaat, met cystine als gemeenschappelijke biologische component. Hoewel complexer, zogenaamde “urchin” en “nanoflower” type koper-bevattende structuren met nanoschaal en microschaal kenmerken zijn eerder gemeld, deze werden geproduceerd onder niet-biologische omstandigheden, zoals temperaturen van 100 °C of hoger 6-8. Voor zover ons bekend is, is de synthese van individuele, lineaire koper-bevattende nanostructuren die schaalbaar zijn in vloeibare fase onder biologische omstandigheden niet eerder beschreven.

Een van de startmaterialen die wordt gebruikt voor de synthese van nanocomposites, namelijk CNP's, is eerder gemeld om zeer toxisch te zijn voor cellen 4. Het is onlangs gerapporteerd dat nadat de nanocomposites zijn gevormd, deze structuren minder toxisch zijn op basis van massa dan de start-NP's 9. Dus, de hier beschreven synthese kan zijn afgeleid van een biologische en biochemische reactie die nut heeft in het stabiliseren van reactieve kopersoorten, zowel in de zin van het transformeren van de NP-vorm in grotere structuren als in het produceren van composieten die minder toxisch zijn voor cellen.

In tegenstelling tot veel andere nanomateriaalvorms die bekend zijn om te aggregaten of klonteren bij interactie met biologische vloeibare media 10,11, vermijden de hier beschreven hooglineaire composieten, eenmaal gevormd, aggregatie, mogelijk vanwege een herverdeling van lading die eerder is gerapporteerd 9. Zoals gedetailleerd in het huidige werk, is deze vermijding van aggregatie handig voor de doeleinden van werken met de structuren eenmaal gevormd, om ten minste 3 redenen: 1) gevormde composietstructuren kunnen worden geconcentreerd met behulp van centrifugatie en vervolgens gemakkelijk opnieuw worden verspreid met behulp van vortex-menging; 2) gevormde structuren kunnen in gemiddelde grootte worden verminderd door sonicatie gedurende verschillende perioden van tijd; en 3) de gevormde lineaire structuren kunnen een extra hulpmiddel bieden voor het vermijden van het recent beschreven “koffie ring effect” 12 en dus een dopant bieden voor het creëren van meer gelijkmatig verdeelde coatings van materialen, vooral die welke sferische deeltjes bevatten.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Planning van Experimenten

  1. Bepaal de hoeveelheid koper nanocomposieten nodig voor synthese. Op basis daarvan kiezen voor een aantal kleine hoeveelheid flesjes (25 cm 2), of grotere flessen, zoals hieronder in de voorbereiding van de materialen aangegeven.
  2. Voor deze synthese, gebruikt een 37 ° C incubator met 5% CO 2 en ten minste 40% vochtigheid. Controleer of dergelijke incubator beschikbaar is en zal niet herhaald worden verstoord tijdens de looptijd van synthese (ongeveer 24 uur).
    VOORZICHTIG: herhaald openen en sluiten van de incubator wordt stellig temperatuurswisselingen die kunnen leiden tot gewijzigde synthese van de nanocomposiet structuren.

2. Voorbereiding van Materialen

  1. Bereid alle materialen vers voorafgaand aan een experiment door toevoegen van vast materiaal oplosmiddelen vlak voor synthese moet beginnen. Het houden van voorraad oplossingen van cystine en koper grondstoffen in vloeibare voor lange tijden before het experiment wordt niet aanbevolen en kan leiden tot wisselende resultaten. Na opening van de leverancier, blijven uitgangsmaterialen drogen wikkelen de bovenkant van de container met Parafilm.
    Opmerking: Het volgende protocol wordt gebruikt als voorbeeld voor reactie in een 25 cm 2 celkweek kolf behulp 7 pl cystine, 6643 uit steriel water en 350 gl van CNPs.
  2. Bereid een 2 mg / ml oplossing van koper nanodeeltjes door het wegen van ten minste 2 mg CNPs. Draag wegwerphandschoenen tijdens deze stap om mogelijk contact van CNPs met de huid te voorkomen. Plaats de nanodeeltjes in een lege steriele 16 ml glazen flacon.
    1. Om de flacon met CNPs, voeg steriel gedeïoniseerd water in het geschikte volume van een 2 mg / ml oplossing te maken en vortex de oplossing gedurende 20 seconden om dispersie van de nanodeeltjes voor synthese begint verschaffen (ten minste 1 ml totaal volume wordt aanbevolen). Laat de flacon meer dan de helft niet vullen met water omdat dit zal remmen mengen door vortexen. CNPs will snel naar de bodem van het flesje en zal donker van kleur (grijs tot zwart) verschijnen.
    2. Ultrasone trillingen de CNP oplossing voor 17 min bij RT om maximale spreiding van CNPs bieden voor aanvang van de synthese. Controleer regelmatig om ervoor te zorgen dat CNPs worden mengen als gevolg van sonicatie. Na een succesvolle sonicatie, CNPs gesuspendeerd blijven in oplossing ten minste 30 minuten en de oplossing wordt donker van kleur.
  3. Weeg voldoende massa van cystine een 72,9 mg / ml oplossing voor de synthese te maken. Aangezien cystine is niet direct oplosbaar in water, plaats de gewogen cystine in een antistatische weegflesje.
    1. Het wegen vat dat cystine, voeg voldoende hoeveelheid steriele, 1 M NaOH, zodat het cystine volledig oplost. Zo lossen 7,29 mg cystine volledig in 100 gl 1 M NaOH, een 72,9 mg / ml oplossing te maken.
    2. Om steriele omstandigheden te behouden, het uitvoeren van deze stap in een steriele stroming weefselkweek kap.
      LET OP: NaOH1 M concentratie bijtend, dus draag wegwerphandschoenen tijdens deze stap om het contact van geconcentreerde NaOH met de huid te voorkomen
  4. Werken in een steriele weefselkweek kap, voeg 7 pl cystine met 6643 pi steriel water om de synthese steriele kolf eerste en laat incubeer gedurende 30 min in de incubator bij 37 ° C met de kolf dop geventileerd (los) om effectieve mengen. Resuspendeer de 2 mg / ml oplossing CNP door vortexen gedurende 30 sec, omdat CNPs zal geregeld na sonicatie stap.
    1. Voeg voldoende CNP oplossing voor de synthese kolf (met behulp van steriele techniek) aan de volgende component ratio's: combineer 1 delen cystine, 50 delen CNPs en 949 delen steriel water in een 25 cm 2 celkweek kolf om de synthese te starten. Bijvoorbeeld, een 7 ml volume synthese combineren 7 pl cystine voorraadoplossing, 350 ui CNPs en 6643 uit steriel water. Plaats de dop op de fles en draai zodat het secure.
    2. Na het combineren van alle componenten voor de synthese, meng in de kolf door zwenken 4-5 keer. Plaats de kolf in de CO 2 incubator en ontlucht de kolf door het losdraaien van de dop zodat er gasuitwisseling in en uit de kolf tijdens de synthese zal zijn.
  5. Laat synthese te draaien in de incubator gedurende ongeveer 24 uur. Tijdens synthese kan men waarnemen, met microscopie en op het oog, vorming van zeer lineaire composieten.
    Opmerking: Het proces van de vorming van de structuur kan plotseling gebeuren in die zin dat structuren aanvankelijk moeilijk te detecteren, vervolgens overgaat verschijning snel toenemende dichtheid. Vorming kan dus gebeuren vóór 24 uur. De werkwijze kan ook worden waargenomen door het oog eenmaal structuren groter en hun dichtheid toeneemt. Hoewel productie van de structuur in de tijd kan worden waargenomen onder de microscoop en op het oog op latere tijdstippen voortdurend onderbreken van de synthesecondities en temperatuur leiden tot slechtesynthese resultaten.
  6. Beëindigen synthese van biocomposieten door stevig aftopping de synthese kolf en opslaan van het vaartuig in de koelkast (4 ° C). Structuren, eenmaal gegenereerd, blijven stabiel in deze vorm voor minstens een jaar. Label de kolf synthesecondities, inclusief componenten benut na de synthese en incubatietijd van de synthese voor de beëindiging.

3. Synthese behulp Kopersulfaat

  1. Het uitvoeren van zelf-assemblage synthese door het vervangen van CNPs met kopersulfaat zout. Met steriele techniek, los ten minste 2 mg kopersulfaat in voldoende hoeveelheid steriel gedeïoniseerd water om een ​​2 mg / ml oplossing te maken. De kopersulfaat kristallen gemakkelijk in oplossing gaan in deze concentratie, maar vortex de flacon indien nodig, en controleer op het oog zodat alle kristallen worden opgelost.
  2. Na de bereiding van de kopersulfaat, voeren synthese zoals eerder beschreven, maar onder vervanging CNPs met kopersulfaat.
    Opmerking: Zelf-assemblerende nanocomposieten koper- sulfaat als uitgangsmateriaal bleken veel consistenter in uiteindelijke vorm dan bij constructies gesynthetiseerd van CNPs zijn.
  3. Sluit de synthese van kopersulfaat biocomposieten als voor CNP composieten (stap 2.6) en bewaar ze op lange termijn bij 4 ° C.

4. karakterisering en behandeling van biocomposieten Post-synthese

  1. Karakteriseren biocomposieten afgeleid van CNPs en van kopersulfaat door wit licht microscopie 9 en door elektronenmicroscopie 9.
    1. Voor de karakterisering en inspectie van biocomposieten post-synthese door wit licht microscopie, gebruiken een omgekeerde microscoop als composieten zal vestigen op de onderkant van de kolf op een paar minuten van het leggen van de kolf vlak, en kan dan in beeld worden gebracht. Gebruik de heldere veld instelling op de microscoop om het contrast tussen biocomposieten en het vloeibare medium te maximaliseren. Composites afgeleid van CNPs en copper sulfaat zullen beide lijken duidelijk te ondoorzichtig in kleur, maar gereageerde CNP aggregaten zal zeer donker van kleur verschijnen.
      1. Een digitale camera op de microscoop om beelden van de composieten te vangen. Een reeks van lengtes van de individuele structuren worden waargenomen.
    2. Voor de karakterisering en inspectie van biocomposieten post-synthese en na opslag bij 4 ° C, laat flesjes om RT te komen gedurende ten minste 15 min als flesjes condensatie aanvankelijk zal vormen na verwijdering uit de koelkast, die effectief zal verduisteren richten tijdens het uitvoeren van microscopie beeldvorming. Na waardoor evenwicht tot RT, veegt de boven- en onderkant van de kolf met een schone papieren handdoek om microscopie beeldkwaliteit te maximaliseren.
    3. Bij het werken met of imaging composieten die zijn opgeslagen op lange termijn, vortex de kolf gedurende 30 sec klompen composieten die vorm, terwijl in de koelkast dissociëren. Na het vortexen, inspecteren de structuren met een omgekeerde microscope zodat aggregaten gedissocieerd en herhaal vortexen indien nodig.
    4. Gebruik omgekeerd wit licht microscopie om de werkzaamheid van de synthese te evalueren voor een gegeven experiment met CNPs. Bijvoorbeeld, document de aanwezigheid of afwezigheid van ongereageerde CNPs in synthese kolven voor CNP-afgeleide biocomposieten van flessen met verschillende parameters zoals de tijd van synthese.
      Opmerking: Individuele CNPs zijn te klein om te observeren met een lichtmicroscoop, maar ongereageerde CNP aggregaten verschijnen als round-shape and donkere objecten, in tegenstelling tot het succes gesynthetiseerde CNP-composieten met een hoge aspectverhouding, lineaire vorm zal hebben, en zal een reeks verschillende lengten. Vermijd het uitvoeren van synthese te lang van een tijd voor de beëindiging, omdat dit resulteert in sterk vertakt "urchin" type structuren, die moeilijk te dispergeren in afzonderlijke structuren eenmaal gevormd zijn.
    5. Gebruik omgekeerd wit licht microscopie om de werkzaamheid te beoordelenvan de synthese voor een gegeven experiment met kopersulfaat. Sinds kopersulfaat gaat volledig in oplossing met behulp van dit protocol, zal de oplossing lijken minder donker dan de oplossing van synthese met behulp CNPs. Noteer de grootte en de omvang van kopersulfaat composieten door vergelijking flessen met verschillende synthesecondities zoals tijd van synthese voor de beëindiging.
      Opmerking: succes gesynthetiseerd composieten een reeks verschillende lengten vertonen. Vermijd het uitvoeren van synthese te lang van een tijd voor de beëindiging, omdat dit resulteert in sterk vertakte aggregaten van composieten, waarvan sommige "urchin-achtige" van structuur zijn en die moeilijk te dispergeren in afzonderlijke structuren eenmaal gevormd zijn .
  2. Om biocomposieten concentreren post-synthese, centrifuge oplossingen van composieten in een centrifugebuis. Voeg 6 ml van ofwel CNP-afgeleide structuren of koper- sulfaat afgeleide structuren een 15 ml centrifugebuis. Centrifugeer gedurende 10 minbij 500 xg bij kamertemperatuur om een ​​pellet te vormen. Voor kleinere volumes, voeg 500 pl structuren in oplossing 0,6 ml sized buizen. Centrifugeer bij 2000 xg bij kamertemperatuur gedurende ten minste 10 min tot een pellet te vormen.
    1. Na centrifugeren gedurende voldoende tijd (ten minste 10 min voor microfuges), slaat de waarneembare pellet op de bodem van de buis waarin de structuren worden geconcentreerd door zorgvuldig verwijderen van de bovendrijvende vloeistof boven de pellet. Biocomposite structuren afgeleid van kopersulfaat verschijnen blauw van kleur en structuren afgeleid van CNPs zijn donkerder (grijs naar zwart).
    2. Voeg meer composieten deze buis en het proces herhalen in dezelfde buis structuren concentreren indien gewenst. Om de geconcentreerde pellets dispergeren, voeg de gewenste hoeveelheid oplossing aan de buis en vortex gedurende 10-30 sec.
  3. Sonificeer structuren eenmaal gevormd, aan de gemiddelde omvang van de populatie (lengte) van de structuren te verplaatsen naar lagere waarden. Plaats structuren in steriel gedemineraliseerd water en ultrasone trillingen gedurende least 10 min. Met deze werkwijze mettertijd constructies gefragmenteerd en kleiner de gemiddelde lengte (zie Figuur 6 van de tekst). Document veranderingen in de samengestelde maten met verschillende sonicatie tijden met behulp van een omgekeerde witte lichtmicroscoop en digitale camera.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Figuur 1 toont een schematisch stroomschema van de synthesestappen de lineaire biocomposieten in dit werk beschreven vormen. CNPs of kopersulfaat als uitgangsmaterialen worden gecombineerd met steriel water om een ​​2 mg / ml te vormen, deze oplossing wordt gemengd en gesoniceerd om een ​​homogene massa te verschaffen, en het koper oplossing wordt vervolgens gemengd in de volgende verhouding synthese: 949 parts steriel water: 50 delen koper mengsel: 1 deel cystine voorraad oplossing. De feitelijke volum...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Terwijl evalueren van potentiële toxische effecten van nanomaterialen zoals CNPs werd waargenomen dat op lange termijn, CNPs omgevormd vanuit een aanvankelijk meer verspreid deeltjesvormige distributie naar een grotere, geaggregeerde vorm (Figuur 2). In sommige gevallen zijn deze zeer geaggregeerde formaties die zijn geproduceerd in de cel kweekschaal, onder biologische omstandigheden, vormden zeer lineaire projecties van de centrale aggregaat denken aan eerder beschreven koperhoudende "egels"...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

Auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs willen de technische assistentie van Alfred Gunasekaran bij elektronenmicroscopiestudies aan het Institute of Micromanufacturing van Louisiana Tech University erkennen, en Dr. Jim McNamara voor hulp bij aanvullende microscopiestudies. Het beschreven werk werd gedeeltelijk ondersteund door Louisiana Board of Regents PKSFI Contract No. LEQSF (2007-12)-ENH-PKSFI-PRS-04 en de James E. Wyche III Endowed Professorship van Louisiana Tech University (aan M.D.).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Mini VortexerVWR (https://us.vwr.com)58816-121
CO2 Incubator Model # 2425-2VWR (https://us.vwr.com)Contacteer leverancierHuidig model catalogus # 98000-360
Eppendorf Centrifuge (gekoelde microcentrifuge)Labnet (http://labnetinternational.com/)C2500-RModel Prism R
Cell Culture Centrifuge Model Z323KLabnet (http://labnetinternational.com/)Contacteer leverancierHuidig model Z206A catalogus # C0206-A
Sonicator (Ultrasoonreiniger)Branson Ultrasonics Corporation (http://www.bransonic.com/)1510R-MTH
WeegschaalSartorius (http://dataweigh.com)Model CP225D vergelijkbaar model CPA225D
Olympus IX51 Inverted Light MicroscopeOlympus (http://olympusamerica.comContacteer leverancier
Olympus DP71 microscoop digitale cameraOlympus (http://olympusamerica.comContacteer leverancier
externe voedingseenheid - wit licht voor Olympus microscoopOlympus (http://olympusamerica.comTH4-100
10X, 20X en 40X microscoopobjectievenOlympus (http://olympusamerica.comContacteer leverancier
Scanning Electron MicroscopeHitachi (http://hitachi-hitec.com/global/em/sem/sem_index.html)model S-4800
Transmission Electron MicroscopeZeiss (http://zeiss.com/microscopy/en_de/products.html)model Libra 120
Table Top Work Station Unidirectional Flow Clean BenchEnvirco (http://envirco-hvac.com)model PNG62675Gebaten voor steriele celcultuurtechniek

Referenties

  1. Klinman, J. P. The copper-enzyme family of dopamine beta-monooxygenase and peptidylglycine alpha-hydroxylating monooxygenase: resolving the chemical pathway for substrate hydroxylation. The Journal of biological chemistry. 281, 3013-3016 (2006).
  2. Uauy, R., Olivares, M., Gonzalez, M. Essentiality of copper in humans. The American journal of clinical nutrition. 67, 952S-959S (1998).
  3. Karlsson, H. L., Cronholm, P., Gustafsson, J., Copper Moller, L. oxide nanoparticles are highly toxic: a comparison between metal oxide nanoparticles and carbon nanotubes. Chemical research in toxicology. 21, 1726-1732 (2008).
  4. Parekh, G., et al. Layer-by-layer nanoencapsulation of camptothecin with improved activity. International journal of pharmaceutics. 465, 218-227 (2014).
  5. Harrington, M. J., Masic, A., Holten-Andersen, N., Waite, J. H., Fratzl, P. Iron-clad fibers: a metal-based biological strategy for hard flexible coatings. Science. 328, 216-220 (2010).
  6. Keyson, D., et al. CuO urchin-nanostructures synthesized from a domestic hydrothermal microwave method. Materials Research Bulletin. 43, 771-775 (2008).
  7. Liu, B., Zeng, H. C. Mesoscale organization of CuO nanoribbons: formation of 'dandelions'. J Am Chem Soc. 126, 8124-8125 (2004).
  8. Peng, M., et al. Controllable synthesis of self-assembled Cu2S nanostructures through a template-free polyol process for the degradation of organic pollutant under visible light. Materials Research Bulletin. 44, 1834-1841 (2009).
  9. Deodhar, S., Huckaby, J., Delahoussaye, M., DeCoster, M. A. High-Aspect Ratio Bio-Metallic Nanocomposites for Cellular Interactions. IOP Conference Series: Materials Science and Engineering. 64, 012014(2014).
  10. Montes-Burgos, I., et al. Characterisation of nanoparticle size and state prior to nanotoxicological studies. Journal of Nanoparticle Research. 12, 47-53 (2010).
  11. Wiogo, H. T., Lim, M., Bulmus, V., Yun, J., Amal, R. Stabilization of magnetic iron oxide nanoparticles in biological media by fetal bovine serum (FBS). Langmuir. 27, 843-850 (2011).
  12. Yunker, P. J., Still, T., Lohr, M. A., Yodh, A. G. Suppression of the coffee-ring effect by shape-dependent capillary interactions. Nature. 476, 308-311 (2011).
  13. Kahler, H., Lloyd Jr, B., Eden, M. Electron Microscopic and Other Studies on a Copper–Cystine Complex. The Journal of Physical Chemistry. 56, 768-770 (1952).
  14. Furia, E., Sindona, G. Complexation of L-cystine with metal cations. Journal of Chemical & Engineering Data. 55, 2985-2989 (2010).
  15. Hawkins, C., Perrin, D. Polynuclear Complex Formation. II. Copper (II) with Cystine and Related Ligands. Inorganic Chemistry. 2, 843-849 (1963).
  16. Hallman, P., Perrin, D., Watt, A. E. The computed distribution of copper (II) and zinc (II) ions among seventeen amino acids present in human blood plasma. Biochem. J. 121, 549-555 (1971).
  17. Jensen, L. S., Maurice, D. V. Influence of sulfur amino acids on copper toxicity in chicks. The Journal of nutrition. 109, 91-97 (1979).
  18. Lee, Y., Choi, J. R., Lee, K. J., Stott, N. E., Kim, D. Large-scale synthesis of copper nanoparticles by chemically controlled reduction for applications of inkjet-printed electronics. Nanotechnology. 19, 415604(2008).
  19. Hume, J., et al. Engineered coiled-coil protein microfibers. Biomacromolecules. 15, 3503-3510 (2014).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Synthese van koper nanodeeltjesvorming van cystine biocomposietschaalbare productie van nanocomposietenveldemissie SEMenergie dispersieve r ntgenspectroscopiegroottebeheersing door sonicatiecentrifugatieconcentratiemethodekarakterisering via witlichtmicroscopie

Gerelateerde artikelen