We presenteren een eenvoudige en onbevooroordeelde olfactorische test bij muizen. Met dit protocol kunnen olfactorische discriminatie, voorkeur, vermijding en gevoeligheid voor een nieuwe geur in vergelijking met water worden beoordeeld in sessies van enkel gedrag. Deze methode is geïndiceerd voor een enkele experimentator en de analyse is gebaseerd op computerondersteunde videoverwerking.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Eenvoudig en Computer-assisted Olfactorische testen voor Muizen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Reukzin is sterk geconserveerd tussen soorten en is vereist voor de reproductie en overleving.
Bij mensen reukzin is één van de betekenissen die is aangetast door veroudering en is een sterke voorspeller van neurodegeneratieve ziekten. Aldus wordt reukzin testen gebruikt als een niet-invasieve diagnostische methode van neurologische tekorten vroeg detecteren. Om de mechanismen die ten grondslag liggen aan olfactorische netwerk gevoeligheid te begrijpen, heeft olfactorische onderzoek in knaagdieren momentum opgedaan in het afgelopen decennium.
Hier is een zeer eenvoudige, efficiënte en reproduceerbare tijd olfactorische testmethode van aangeboren geurwaarneming en gevoeligheid in muizen presenteren we zonder of vooraf voedsel of water beperking. De tests worden uitgevoerd in een vertrouwde omgeving aan de muizen, vereisen slechts de geuren en 2 min sessie geurstof blootstelling. De analyse wordt uitgevoerd, post-hoc computergestuurd ondersteunde commando's ImageJ en kan derhalve, Van begin tot eind uitgevoerd door een onderzoeker.
Dit protocol vereist geen speciale hardware of configuratie nodig en is geïndiceerd voor elk laboratorium geïnteresseerd zijn in het testen van olfactorische perceptie en gevoeligheid.
Inleiding
Reukzin is een van de meest ontwikkelde en belangrijke zintuigen bij zoogdieren. Elke impairment in olfactorische activiteit kan beïnvloeden voedselinname, sociaal gedrag en, in het ergste geval, zelfs overleven. Bij mensen olfactorische verslechtering leeftijdsafhankelijk 1 en als een sterke voorspeller van neurologische aandoeningen 2-6. De olfactorische identificatie-test ontwikkeld door de Universiteit van Pennsylvania vertegenwoordigt momenteel een van de meest gebruikte, niet-invasieve en kwantificeerbaar, diagnostische tests die vroege neurologische tekorten 7 kunnen beoordelen en te voorspellen met een hoge kans op de progress....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Alle dierlijke procedures het in overeenstemming zijn met de EU-Richtlijn 2010/63 / EU betreffende de bescherming van dieren die voor wetenschappelijke doeleinden worden gebruikt en zijn goedgekeurd door de lokale Animal Care Committee (kanton Fribourg, Zwitserland).
1. Dierlijke Voorbereiding
- Proefdieren
- Experimenten uitvoeren van mannelijke volwassen wildtype en transgene muizen (C57BL / 6 achtergrond) van 3-5 maanden. De drie groepen muizen overeen met wildtype nestgenoot controles (groep A, Jagged1 flox / flox 19) en twee voorwaardelijke KO muizenlijnen (groep B, en C Jagged1ncKO, Jagged1gcKO).
- ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De perceptie test meet de aantrekkingskracht pindakaas en vermijding 2-MB zuur. Drie groepen muizen worden getest en de tijd doorgebracht in de "geur omtrek" worden gekwantificeerd ten opzichte van water. In de preferente proef de controlegroep A vertoont significante voorkeur voor de geur in vergelijking met water (8 t = 2,52, p <0,05). Aan de andere kant, groep B geen significante aantrekkingskracht pindakaas te tonen en besteedt meer tijd met water (6 t = 3,22, p <0,05). Zo is he.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
De in dit protocol voorgesteld testen toelaten om verschillende aspecten van aangeboren olfactorische gedrag bij muizen te evalueren: perceptie te geuren, discriminatie tussen geuren versus water en gevoeligheid voor geuren. Dit protocol kan worden toegepast op elke geur dat naar keuze en voorkoming schaal eerder aangetoond 15. Aangezien het protocol is gebaseerd op experimentele activiteit is het belangrijk dat muizen geen motorische beschadiging of angst, die hun beweging kunnen beïnvloeden en verstoren olf.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Er is geen belangenconflict.
Dankbetuigingen
Dit werk wordt gefinancierd door de Swiss National Foundation (31_138429) en Synapsis Foundation voor de ondersteuning van onderzoek naar de ziekte van Alzheimer.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Muisenkooi | Italplast (Italië) | 1144B | 36 cm lengte x 20,5 cm breedte x 13,5 cm hoogte |
| Gespleten houten bedden | Abedd (Oostenrijk) | LTE E-001 | 3 cm hoog |
| Pindakaas | Migros (Zwitserland) | NA | 1:10 |
| 2-Methylbutyric | Sigma Aldrich (Zwitserland) | W269514 | Puur |
| Vrouwelijke urine van vruchtbare vrouwtjes van hetzelfde muisras | NA | NA | Verdunningsreeks |
| Camera | Olympus (VS) | Camedia C-8080 | MOV-bestanden |
| Quicktime voor Java (Windows) | Apple (VS) | NA | video-plugin voor het visualiseren van MOV-bestanden |
| ImageJ voor Windows | NIH (VS) | NA | Videoverwerking/Analyse |
Referenties
- Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20(2014).
- Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of o....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
