Tuning een parallelle gesegmenteerd Flow Column en Multiplexed Detection inschakelen

Summary

Here, we present a protocol for the operation and tuning of parallel segmented flow chromatography columns to enable multiplexed detection.

Abstract

Active flow technology (AFT) is new form of column technology that was designed to overcome flow heterogeneity to increase separation performance in terms of efficiency and sensitivity and to enable multiplexed detection. This form of AFT uses a parallel segmented flow (PSF) column. A PSF column outlet end-fitting consists of 2 or 4 ports, which can be multiplexed to connect up to 4 detectors. The PSF column not only allows a platform for multiplexed detection but also the combination of both destructive and non-destructive detectors, without additional dead volume tubing, simultaneously. The amount of flow through each port can also be adjusted through pressure management to suit the requirements of a specific detector(s). To achieve multiplexed detection using a PSF column there are a number of parameters which can be controlled to ensure optimal separation performance and quality of results; that is tube dimensions for each port, choice of port for each type of detector and flow adjustment. This protocol is intended to show how to use and tune a PSF column functioning in a multiplexed mode of detection.

Introduction

Active Flow Technology Columns

Actieve stroom technologie (AFT) chromatografiekolommen werden onlangs ontwikkeld tot inefficiëntie in scheidingen in verband met stroom heterogeniteit ^1-6 te overwinnen en ook multiplex detectie mogelijk te maken. In dit specifieke communicatie we detail het operationele proces van de parallelle gesegmenteerde stroom (PSF) kolom met multiplex detectie. De belangrijke functionele voordelen van de kolom PSF zijn: (1) de stroom vanaf de radiale centrale gebied van het kolombed wordt geïsoleerd van het perifeer of wandgebied van stroming, (2) het volume van de mobiele fase die moet w....

Protocol

Opmerking: Dit protocol bevat instructies over hoe je een column PSF te gebruiken op een HPLC-systeem in combinatie met meerdere detectoren voor multiplex detectie. Het protocol is geschreven ervan uitgaande dat de lezer heeft basiskennis en ervaring in chromatografie en diverse HPLC detectiemethoden.

Let op: Raadpleeg de veiligheidsinformatiebladen (VIB) voor alle materialen en reagentia voor het gebruik (dwz, MSDS voor methanol). Zorg ervoor dat het gebruik van alle nodige veiligheidsvoorschriften bij de omgang met oplosmiddelen en High Performance Liquid Chromatography (HPLC) eluens. Zorgen voor het juiste gebruik van de techn....

Results

Een gemultiplexte HPLC-analyse werd uitgevoerd met een AFT kolom PSF stand (figuur 1) en ingesteld zoals weergegeven in figuur 2. Dit type installatie kon een koffiemonster gelijktijdig worden geanalyseerd met UV-Vis, DPPH ^• en MS in Total Ion Count (TIC) modus. De verbindingen van de koffie monster die reageerden op DPPH ^• kan vervolgens eenvoudig worden aangepast aan de UV-Vis en MS - TIC antwoorden op basis van de uitlijning van de retentietijd zoals geïllustree.......

Discussion

Deze studie heeft betrekking op de karakterisering en profilering van koffie met behulp van HPLC met multiplex detectie gebruik van een parallelle gesegmenteerde stroom (PSF) kolom. Multiplexed HPLC met PSF kolommen maakt de karakterisering en identificatie van belangrijke chemische entiteiten door het verminderen van de complexiteit gegevens van het monster terwijl het verkrijgen van een grotere molecuul-specifieke informatie binnen een fractie van de tijd die met gebruikelijke multi-detectie werkwijzen. De kolom PSF m.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
HPLC instrument			Multiple detectors of choice for multiplexed detection. Detectors of choice may require additional instrumentation, e.g., pump.
Parallel Segmented Flow HPLC column	Thermo Fisher Scientific	Not Defined	Soon to be commercialized
Methanol	Any brand		HPLC Grade
PEEK tubing	Any brand		Various lengths and i.d.
Column stoppers	Any brand		For blocking unused peripheral ports.
PEEK tube cutter	Any brand
Analytical Scale Balance	Any brand
Stop watch	Any brand
Eluent collection vessels	Any brand		1-2 ml sample vials can be used as eluent collection vessels