Echocardiografische benaderingen en protocollen voor Comprehensive Fenotypische karakterisering van Valvular hart-en vaatziekten in Muizen

Samenvatting

Dit protocol geeft een gedetailleerde beschrijving van de echocardiografische benadering voor uitgebreide fenotypering van de hart- en hartklepfunctie bij muizen.

Samenvatting

Het doel van dit manuscript en bijbehorende video is om een overzicht te geven van de methoden en benaderingen die worden gebruikt voor het beeldvormen van de hartklepfunctie bij knaagdieren, met gedetailleerde beschrijvingen van de geschikte methoden voor anesthesie, de gebruikte echocardiografische vensters, de beeldvormingsvlakken en sondeoriëntaties voor beeldacquisitie, de methoden voor data-analyse en de beperkingen van opkomende technologieën voor de evaluatie van cardiale en klepfunctie. Belangrijk is dat we ook verschillende toekomstige onderzoeksgebieden op het gebied van cardiale en hartklepbeeldvorming benadrukken die kunnen worden benut om inzichten te verkrijgen in de pathogenese van klepziekte in preklinische diermodellen. We stellen voor dat het gebruik van een systematische aanpak voor het evalueren van de cardiale en hartklepfunctie bij muizen kan resulteren in robuustere en reproduceerbare gegevens, evenals het faciliteren van de ontdekking van eerder niet opgemerkte fenotypen bij genetisch gemodificeerde en/of fysiologisch gestreste muizen.

Inleiding

Veroudering is geassocieerd met toenemende verhoging van cardiovasculaire verkalking ^1. Hemodynamisch significant aortaklepstenose treft 3% van de bevolking ouder dan 65 ^2, en patiënten met zelfs een matige aortaklepstenose (pieksnelheid van 3-4 m / s) een 5 jaargebeurtenis overleving van minder dan 40% ^3. Momenteel zijn er geen effectieve behandeling voor de progressie van aortaklep calcificatie remmen en chirurgische aorta klepvervanging de enige beschikbare behandeling van gevorderde aortaklepstenose ^4.

Studies om een dieper begrip van de mechanismen die bijdragen aan de ontwikkeling en progressie van aortaklep calcificatie is een belangrijke eerste stap in de richting van farmacologische en niet-chirurgische methoden aortaklepstenose ^{5, 6} beheren. genetischly-gemanipuleerde muizen hebben een belangrijke rol bij de ontwikkeling van ons begrip van de mechanismen die bijdragen aan een verscheidenheid van ziekten en komen nu op de voorgrond van mechanistische studies gericht op het begrijpen van de biologie van aortaklepstenose ^{6, 7, 8} gespeeld. In tegenstelling tot andere cardiovasculaire ziekten zoals atherosclerose en hartfalen-wanneer standaardprotocollen gaan vasculaire en ventrikelfunctie zijn grotendeels gevestigde-er unieke uitdagingen in verband met in vivo fenotypering van hartklep functie in muizen. Terwijl recente beoordelingen grondige discussies over de voor- en nadelen van tal van imaging en invasieve modaliteiten gebruikt om de klep functie bij knaagdieren ^{9, 10, 11} te beoordelen hebben zorg, tot nu toe, we zijn niet op de hoogte van een publicatie die een compre biedtgerealiseerde, stap-voor-stap protocol voor fenotypering hartklep functie bij muizen.

Het doel van dit manuscript moet de methoden en protocollen beschrijven hartklep functie fenotype bij muizen. Alle methoden en procedures zijn goedgekeurd door de Mayo Clinic Institutional Animal Care en gebruik Comite. Belangrijke onderdelen van dit protocol zijn de diepte van de anesthesie, de evaluatie van de hartfunctie, en de evaluatie van de hartklep functie. We hopen dat dit rapport zal niet alleen dienen om de onderzoekers geïnteresseerd zijn in het nastreven van onderzoek op het gebied van de hartklep en vaatziekten leiden, maar zal ook beginnen met een nationale en internationale dialoog met betrekking tot protocol standaardisatie van gegevens reproduceerbaarheid en validiteit te garanderen in deze snel groeiende veld. Belangrijk is dat succesvolle beeldvorming met behulp van ultrasone systemen met een hoge resolutie vereist een praktische kennis van de beginselen van echografie (en terminologie vaak gebruikt in echografie), een goed begrip van de fundamentele Principles van cardiale fysiologie, en aanzienlijke ervaring met echografie te zorgen voor een nauwkeurige en tijd-efficiënte evaluatie van de hartfunctie bij knaagdieren.

Protocol

1. Bereid de materialen en apparatuur (tabel 1 en figuur 1)

1. Zet het echoapparaat. Voer het dier ID, datum en tijd (voor seriële imaging experimenten) en andere relevante informatie.
2. Gebruik een hoogfrequente ultrasone transducer, 40 MHz voor imaging muizen minder dan ~ 20 g of 30 MHz voor muizen meer dan ~ 20 g.
3. Sluit het platform om het elektrocardiogram (ECG) monitor voor ECG gating van beeldvorming voor bepaalde modaliteiten.
   OPMERKING: Kritisch Dit maakt ook de momentane berekening van de hartfrequentie (HR), die kan worden gebruikt als één van de indices van een juiste hoogte van anesthesie.
4. Verwarm het platform 37 ° C.
   LET OP: Alle in de handel verkrijgbare ultrasound machines hebben een bedieningspaneel dat beeldacquisitie controles en onderzoek beheersmaatregelen voorziet in B-mode, M-modus en Doppler echocardiografie. Een cardiale meetinstrument is ingebed in de machine voor de automatische metingen berekening van gemeenschappelijke echocardiografische parameters van cardiale en valvulaire functies.

2. Bereid de Mouse for Imaging en de inductie van de anesthesie

1. Voorzichtig pak de muis bij zijn staart en stevig vast te houden het dier bij de nek van haar nek.
2. Leid de neus van het dier in de neuskegel. Begin anesthesie stroom bij 1% isofluraan. Zorgen dat het dier verdoofd binnen 3-5 s blootstelling aan het gas.
3. Snel en nauwkeurig lag het dier op het platform in een liggende positie, zorg ervoor dat de voorpoten en achterpoten liggen op de ECG-sensoren van het platform.
4. Voorzichtig zet het dier met plakband op alle vier de ledematen, licht toe te passen plakband op het hoofd in de neuskegel apparaat te stabiliseren, en breng plakband aan de staart te stabiliseren. Zowel de achterpoten en voorpoten moeten plat liggen om een ​​stabiele en duidelijke ECG-signaal overname door de fysiologische imaging-systeem te waarborgen.
5. Controleer de HR. Doe dit met behulp van een imaGing platform met ECG-mogelijkheden of met externe ECG-apparaten. Zorg ervoor dat de uitgangssituatie HR ligt tussen de 600-700 bpm. Zorg ervoor dat de HR niet onder de 450 slagen per minuut valt onder alle omstandigheden.
   OPMERKING: Tijdens de procedure kan de HR dalen licht door narcose, maar het moet boven de 500 slagen per minuut in de meeste gevallen.
6. Pas de anesthesie stroom van kleine stappen dienovereenkomstig (~ 0,1% stappen van elk 15 s totdat een stabiele toestand van de anesthesie is bereikt).
   Opmerking: Een stabiele toestand van anesthesie is een aandoening waarbij de genoemde cardiale parameters gehandhaafd (zie stap 2,5) en het dier niet openlijk reageren op prikkels uit de plaatsing van de sonde op verschillende beeldvormende ramen. Belangrijk is dat deze geen chirurgische vlak van anesthesie, waardoor aanzienlijke cardiodepression in muizen. Voor langdurig beeldvorming sessies wordt de toepassing van dierenarts zalf voor de ogen te voorkomen droogheid bevelen.
7. Controleer de lichaamstemperatuur met een rectale thermometer. Houd de temperatuur tussen 36,5 ° C en 38 ° C.
   Opmerking: In een geschikt milieu-gecontroleerde kamers en een verwarmd platform, de lichaamstemperatuur (rectaal gemeten) blijft constant gedurende de gehele procedure en dus geen storende factor cardiovasculaire hemodynamica tijd.
8. Afscheren het haar van de borst met een elektrische tondeuse voor gebruik met fijn haar. Veeg de borst met een vochtige papieren handdoek. Het dier is klaar voor beeldvorming.
   OPMERKING: Terwijl de chemische verwijdering van het haar ook kan worden uitgevoerd, te voorkomen dat het gebruik van dergelijke verbindingen, zoals ze significante huidirritatie kunnen veroorzaken na verloop van tijd in de lange termijn experimenten. Bovendien kan de juiste toepassing en verwijdering van een dergelijk chemisch-gebaseerde ontharing producten de duur van de blootstelling anesthesie te verlengen met 2-3 min (~ 10-20%). De totale tijd van de inductie van de anesthesie aan de voltooiing van de huid voorbereiding moet minder dan 3 minuten duren.

_title "> 3. Volg de Basic Principles and Guidelines in het verwerven van Cardiac Ultrasound Images

LET OP: Er zijn drie echografie modaliteiten gebruikt bij het verwerven van de beelden: B-mode / 2-D, M-mode, en Doppler (spectrale pulsed-wave Doppler en kleur stroom Doppler imaging). Er zijn twee fundamentele transducer posities gebruikt om beelden van het hart en de hartkleppen te verwerven: de parasternale en apicale vensters (figuur 2).

1. Van elke transducer positie, het verkrijgen van meerdere tomografische beelden van het hart ten opzichte van de lange en korte assen door het handmatig draaien en angulaire beweging van de transducer.
   OPMERKING: Rotatie verwijst naar zwenken of draaien van de transducer vanaf een vaste positie op de borstwand, terwijl angulatie verwijst naar de zij aan zij verplaatsing van de transductor op een vaste plaats op de borstwand. Alle ultrasone sensoren hebben een beeld index marker in de vorm van een groef (inkeping), externe profilering, of de knop.
2. Zorg ervoor dat de echografie signal loodrecht op de beoogde structuur door dienovereenkomstig aanpassend transducer positie.
3. Optimaliseren van de kleurstromingssignalen en pieksnelheid signalen door het richten van de uitgezonden ultrasone bundel evenwijdig aan de stroming. De hoek tussen de ultrasone bundel en de stroom moet minder zijn dan 60 °.
4. Optimaliseer de beeldkwaliteit met de bedieningselementen bedieningspaneel. Alleen op het gebied van verhoor moet vullen de beeldweergave.
   LET OP: Fijn aanpassingen in transducer en platform posities zijn vrijwel altijd noodzakelijk om heldere beelden te verkrijgen. Zelfs tijdens optimale omstandigheden, respiratoire bewegingen, borstwand anatomie (bijvoorbeeld kleine rib afstand), en variatie van de inwendige anatomie (zowel inherente en ziekte-geïnduceerde) kan het akoestische venster te beperken en maken beeldacquisitie zeer uitdagend.
5. Bij het meten van de linker ventrikel dimensies in M-modus en 2-D / B-mode, plaatst u de meting remklauw in de meest continue echo lijn.
6. Pas de Doppler sector kleur eend monstervolume het gebied ondervraging door aanpassing van de sector control, dat zich op het paneel.
   OPMERKING: De kleurcodering regeling Doppler studies geeft de snelheid en richting van de bloedstroom. Doppler signalen die rode zijn vermeld laminaire bloedstroom naar de transducer. Doppler signalen die blauw zijn aangeven laminaire stroming weg van de transducer. A "mozaïek" kleurpatroon geeft gebieden van turbulente of niet-laminaire bloedstroom (die voorkomt bij valvulaire stenose of valvulaire regurgitatie).
7. Neem een ​​minimum van twee 5 s stroken (of 100 frames) van de real-time B-mode / 2D echo van elkaar imaging venster voor offline analyse.
   LET OP: In de handel verkrijgbare echo machines hebben beeldaanwinst instellingen die een vooraf bepaald aantal frames of cine-loop maten vast te leggen. Het beeld overname instellingen kunnen worden gewijzigd zodat langer cine loops kunnen worden verworven. Overname van beelden van hoge kwaliteit vergt veel ervaring en experimenteren. Investigators moet de juiste combinatie van transducer plaatsing en platform hoek beelden van vele meningen en akoestische ramen te verkrijgen te vinden.

4. Evaluatie van de aortaklep (AV) Functie

OPMERKING: Beoordelingen van de aortaklep functie omvatten kwalitatieve evaluaties van de klep (bijvoorbeeld waargenomen cusp dikte, verhoogde echogeniciteit door valvulaire verkalking, en de aanwezigheid of afwezigheid van regurgitatie jets gebruik van kleur Doppler) en kwantitatieve metingen van ventielfunctie (bijv piek transvalvular snelheid en cusp tussenafstand).

1. Begin met het imago van de aortaklep door het selecteren van B-mode beeld acquisitie.
2. Met het dier stevig bevestigd op het platform en de kop afgekeerd van de onderzoeker, kantelt de tafel 15-20 ° naar links. Dit zal het hart naar voren en naar links, dichter bij de borstwand te brengen. Smeer ultrasone gel op de transducer of direct op de eennimal borst.
3. Plaats de transducer parasternaal ongeveer 90 ° loodrecht op de lange as van het hart, met de afbeelding indexmarkering van de transducer wijzend naar achteren (figuur 2). Terwijl in 2D / B-mode, schuif de transducer craniale tot de AV in zicht komt. Dit is de "korte as" Gezien de aortaklep.
   OPMERKING: Een normale aortaklep drie dunne slippen die wijd open tijdens systole en sluit afdoende tijdens diastole zodat er geen regurgitatie van bloed terug naar het linker ventrikel. De slippen erg dun, zeer snel bewegen, en kunnen vaak uitdagend om te visualiseren.
4. Draai de transducer met de klok mee totdat het beeld index marker punten caudale. Let op de aortawortel, aortaklep, linker ventrikel outflow tract, mitralisklep, linker atrium, en een deel van de rechter ventrikel outflow tract op de beeldweergave.
   LET OP: Dit is de "parasternale lange as" uitzicht op de AV. De sonographer moetnagaan of er twee aortaklep knobbels toegankelijk gedurende de hartcyclus in de B-modus beelden, waardoor voor de volgende M-modus beeldvorming en analyse (zie hieronder).
5. Evalueer de aortawortel in deze weergave. vegen voorzichtig heen en weer zodat de aortawortel afbeeldingen bevatten de grootste afmetingen van de aortawortel. Meet de grootste antero-posteriore aspect van de aorta met de elektronische schuifmaat verband met de meetgereedschap ingebed in het apparaat.
6. Zoek de aortaklep in de lange as. Verminder de breedte van de afbeelding, zodat alleen de aortaklep is op de beeldweergave door het aanpassen van het breedte-knop in het controlepaneel. Plaats de M-mode lijn ondervraging bij de kruising van de uiteinden van de aortaklep nauwkeurig vast te aortaklep cusp scheiding.
7. In de M-mode display van de aortaklep, meet de cusp scheidingsafstand (doosvormige verschijning in de systole) met de elektronische schuifmaat verband met de MEASURement hulpmiddel ingebed in de machine.
   Opmerking: Het grootste voordeel van M beeldvormende is de zeer hoge tijdsresolutie, die essentieel is voor de evaluatie van de aortaklep functie. Terwijl de M-modus beelden van het AV met de opvattingen korte en lange as kan worden verkregen, wordt de parasternale lange as view algemeen de voorkeur omdat het afbeeldingsvlak kan de sonograaf de oriëntatie en locatie van de uiteinden van de gemakkelijk te identificeren knobbels tijdens systole.
8. Hoewel nog steeds in de parasternale lange as uitzicht op de aortaklep, drukt u op de kleur Doppler control-toets in het bedieningspaneel. Toepassen kleur Doppler op het gebied van de aortaklep.
   OPMERKING: normale stroming van de linker ventrikel via de aortaklep in systole is naar de transducer en aldus wordt gecodeerd rood.
9. Noteer de aanwezigheid of afwezigheid van aortaklep regurgitatie.
   OPMERKING: Aortaklep regurgitatie is een abnormale stroom die optreedt tijdens diastole en wordt van de omvormers gerichter; aldus wordt gecodeerd blauw.
10. Druk op de pulsed-wave Doppler-control-toets. Met de trackball in het bedieningspaneel, plaatst de gepulseerde golven monstervolume in de proximale aorta ascendens, net boven de aortaklep en zorg ervoor dat de hoek tussen de ultrasone bundel en de bloedstroom is dan 60 ° door het kantelen van de platform en / of de transducer. Indien mogelijk, het verkrijgen van de pieksnelheid over de aortaklep uit de suprasternal notch venster.
11. Meet de pieksnelheid van de spectrale display met de elektronische remklauwen in verband met het meetinstrument ingebed in de machine (Figuur 3C en 3F).
    LET OP: Een mozaïek kleur geeft een hoge stroomsnelheid die waarschijnlijk niet-laminaire stroming patronen bevatten.

5. Evaluatie van de mitralisklep (MV) Functie

OPMERKING: Evaluatie van de mitralisklep functie omvat kwalitatieve evaluaties van de klep (bijvoorbeeld perceived cusp dikte, verhoogde echogeniciteit door valvulaire verkalking, aanwezigheid of afwezigheid van regurgitatie jets gebruik van kleur Doppler) en kwantitatieve metingen van klepfunctie.

1. Plaats de transducer in de apicale positie in B-modus. Plaats de transducer, zodat deze een hoek richting het hoofd van de muis (Figuur 2C). Houd u aan de rechter ventrikel (RV), linker ventrikel (LV), rechter atrium (RA), en linker atrium (LA) op de beeldweergave. Handmatig tilt het platform enigszins zodat het dier zich in een 'head-down "positie om de mitralisklep visualiseren omdat hierdoor in de LV.
   OPMERKING: De apicale 4-kamermuziek is optimaal zicht voor de behandeling bloedsnelheid in de mitralisklep en de tricuspidalisklep, alsmede het weefsel snelheid van de mitrale annulus. Dit is ook een goed zicht op de beweging en de grootte van de RV en septum beoordelen.
2. Vanaf het apicale 4-kamer uitzicht, breng de mitralisklep in beeld door het verminderen van de breedte van het beeld.Op dat de mitrale klepbladen worden weergegeven met twee dunne, mobiele filamenten openen en sluiten tijdens elke cardiale cyclus.
   OPMERKING: mitrale folders van een "normale" muis kan moeilijk te visualiseren als beeldvorming geschiedt bij fysiologische HR (dat wil zeggen,> 450 bpm).
3. Plaats de M-modus cursor over de mitralisklep de dikte van de bladen te beoordelen.
   OPMERKING: De achterste blad is het best weergegeven in systole, wanneer deze loodrecht op de ultrasone stralen (figuur 4).
4. Met behulp van de apicale 4-kamer uitzicht, gelden kleur Doppler het imago van de stroom uit de linkerboezem via de mitralisklep tijdens diastole. Let op voor mitralisklep regurgitatie.
   LET OP: Flow is gericht op de transducer en wordt daarom rood gecodeerd. Regurgitant stroom zal blauw worden gecodeerd en optreedt tijdens systole (Figuur 5).
5. Met behulp van de apicale view lange as, over te schakelen naar gepulste-wave-modus. Verplaats de Doppler monstervolume aan de uiteinden van demitralisklep bijsluiter. Let op de twee toppen van de mitralisklep instroom spectrale display. Als de folders zijn niet goed zichtbaar, gebruik kleur Doppler om regio's te identificeren met heldere rode of mozaïek kleurpatronen en zet het volume monster op dat punt.
   LET OP: De spectrale weergave van de mitralisklep stroom heeft twee pieken in slow HRs (<450 bpm). In normale HRs (> 450 slagen per minuut), de vroeg-(E) en late-vulling (A) stromen gesmolten. De spectrale Doppler weergave van stroom over de mitralisklep wordt gebruikt bij de beoordeling van de linker ventriculaire diastolische functie (zie stap 7,5).

6. Evaluatie van de rechts-zijdige Heart Valve Functie

LET OP: De tricuspid en pulmonic kleppen bestaan ​​uit de rechts-zijdige hartkleppen. De tricuspidalisklep kan gemakkelijk worden gevisualiseerd in de apicale lange as uitzicht, terwijl de pulmonaalklep kunnen worden gevisualiseerd in zowel de parasternale lange en korte as uitzicht.

1. Vanaf het apicale lange as te bekijken, te kantelen of richt de transducer tip uzingen een schommelende beweging, zodat de rechter ventrikel is in het centrum van de beeldweergave. Verminder de breedte van de afbeelding, zodat alleen het rechterventrikel zichtbaar is in de beeldweergave.
2. In hetzelfde beeldvlak, breng de tricuspidalisklep bladen, die zo dun, mobiele filamenten tussen rechteratrium en rechterventrikel en die open en dicht in de loop van elke hartcyclus weergegeven.
3. Toepassen kleur Doppler in het gebied van de tricuspidalisklep. Noot voor de tricuspidalisklep regurgitatie.
   OPMERKING: normale stroming optreedt tijdens diastole, is gericht op de transducer, en daarom wordt gecodeerd rood. Abnormale regurgitant stroming optreedt tijdens systole, wordt van de transducer gericht, en daarom blauw gecodeerd. De piek snelheid van de regurgitant jet wordt gebruikt om rechter ventrikel systolische druk te schatten.
4. Verplaats de transducer en parasternale korte aspositie ter hoogte van de aortaklep. Boven de aortaklep de rechter ventrikel outflage darmkanaal, de pulmonaalklep, het proximale belangrijkste longslagader en de linker en rechter longslagader (figuur 6).
5. Draai de transducer met de klok mee om een ​​gewijzigd parasternale lange-as positie. Vervolgens zet men de transductor iets boven een korte as aanzicht van de longklep verkrijgen.
6. In deze visie passen M beeldvormende de scheidingsafstand van de longklep slippen (figuur 7) te evalueren.
7. Solliciteer kleur Doppler in de regio van de longklep om te beoordelen voor valvulaire regurgitatie (een mozaïek-patroon, met hoge snelheid jet tijdens diastole) en stenose (een mozaïek-patroon, met hoge snelheid jet tijdens systole).
8. Druk op de gepulste-wave control-toets en plaats het monster volume net na de pulmonaalklep.
   OPMERKING: Analyse van de spectrale Doppler weergave van stroom wordt gebruikt om de pulmonale arteriële druk (figuur 8) te schatten.

7. Evaluatie van de hartfunctie

OPMERKING: De beoordeling van de hartfunctie omvat kwalitatieve evaluaties van linker ventriculaire contractiliteit (bijvoorbeeld visuele schatting van de ejectiefractie, de regionale wandbeweging afwijking en de waargenomen dikte van de wanden) en kwantitatieve metingen van de linker ventriculaire functie (bijvoorbeeld de ejectiefractie, linkerventrikelmassa, linker ventriculaire diastolische functie en indices van hartspierprestatie).

1. Verkrijgen van een korte as aanzicht van de LV in 2D / B-modus, waarbij de transducer in de parasternale korte aspositie ter hoogte van de papillaire spieren. Beweeg de transducer op en neer om de LV scannen van de basis naar de top. Let op voor wandbeweging afwijkingen.
2. Vanuit een parasternale korte-as weergave van de linker hartkamer, drukt u op de M-modus op, in het bedieningspaneel. Met de trackball Plaats de M-modus cursor in het midden van de linker ventriculaire holte ter hoogte van de papillaire spieren en obtain M-modus beelden.
3. Meet de linker ventriculaire holte dimensie eind diastole, wanneer de afstand tussen de voorwand en de achterwand is de grootste en in end-systole, waarbij de binnenwaartse beweging van zowel de voorste en achterste wanden maximaal is (figuur 9).
4. Meet de voorste en achterste wanddikte eind diastole en end-systole.
   LET OP: Terwijl de papillairspieren zijn een essentiële mijlpaal om de correcte beeldvorming vliegtuig te verzekeren, wees voorzichtig niet op te nemen in de metingen.
5. Verplaats de transducer tot de apicale venster. Zie stap 5.1. Beoordelen van de diastolische linker ventrikel functie met behulp van pulsed-wave Doppler van de bloedstroom over de mitralisklep in het apicale lange as uitzicht.
6. De volume-monster bij de uiteinden van de mitrale klepbladen. Meet de piek mitralisklep instroom velocity van de spectrale weergave van pulsed-wave Doppler snelheden over de mitralisklep.
7. Plaats het volume monster tussen LV inflow en uitstroom. Let op de mitralisklep en de aortaklep sluiten en openen signalen. Meet de isovolumische ontspanning tijd, isovolumetrische contractie tijd, en linkerventrikelejectiefractie tijd (Figuur 10).
8. Voer tissue Doppler imaging (TDI) van de mitrale annulus in de apicale lengteas view. Druk op de TDI-control-toets en plaats het monster volume op de mediale aspect van de mitrale annulus. Zorg ervoor dat het monster volume niet inbreuk maken op de mitralisklep folders. Houd het Doppler monstervolume grootte tussen 0,21 mm en 0,27 mm. Meet de vroege diastolische snelheid (e) van de mitrale annulus (figuur 11).

8. Final Steps

1. Geef je mening over de verkregen beelden. Vergewissen dat alle vereiste afbeeldingen werden verkregen.
2. Verwijder overtollig ultrasound gel uit de borst van de muis en verwijder voorzichtig de tape waarmee het dier op zijn plaats. Schakel de narcose.
3. Leg het dier op een absorberende papieren handdoek(Niet beddengoed, die kan worden weggezogen of kan de luchtwegen tijdens het herstel te blokkeren). Observeer het dier tot borstligging wordt bereikt. Als de juiste anesthesie wordt toegediend, moet herstel plaatsvinden binnen 30 tot 60 s.

Resultaten

Voorbeelden van beelden die routinematig worden verkregen uit dierlijke cardiale ultrageluid beeldvorming zijn in dit manuscript. Een illustratie van transducer plaatsing op de borst van het dier wordt verstrekt om de lezer een duidelijk inzicht waar de transducent gepositioneerd om de beelden te verkrijgen zoals beschreven geven. Een foto van de ultrasone laboratorium set-up is ook opgenomen om te benadrukken het belang van de juiste apparatuur, met name de ultrasone transducer te gebru...

Discussie

Inductie van anesthesie

Goede inductie en instandhouding van anesthesie is essentieel voor nauwkeurige vaststelling van veranderingen in hartklep en hartfunctie in muizen. Gezien de snelle inductie van de anesthesie opgewekt door isofluraan en de relatief lange wash-out tijd van deze verdoving volgende diepe narcose, hebben we geen gebruik maken van een stand-alone anesthesie kamer voor inductie. In plaats daarvan, zoals in detail hierboven dieren rechtstreeks geleid naar de an...

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
High resolution ultrasound machine	VisualSonics, Fujifilm	Vevo 2100
Isofluraandiffusor (in staat om 1% tot 1,5% isofluraangemengd met 1 L/min 100% O2 te leveren)	VisualSonics, Fujifilm	N/A
Transducers voor kleine muizen (550D) of grotere muizen (400)	MicroScan, VisualSonics, Fujifilm	MS 550D, MS 400
Dierplatform	VisualSonics, Fujifilm	11503
Geavanceerde fysiologische monitoringeenheid	VisualSonics, Fujifilm	N/A
Isofluraan	Terrell	NDC 66794-019-10
Neuskoker en slang verbonden met isofluraandiffusor en 100% O2	Op maat gemaakt binnenshuis	--
Haarscheerapparaat	Andis Super AGR+ vet pack clipper	AD65340
Ultrasoundgel	Parker Laboratories	REF 01-08
Elektrodengel	Parker Laboratories	REF 15-25
Plastertapes	Fisher Laboratories	1590120B
Papieren handdoeken