Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Non-straatverbod EEG radiotelemetrie: Epidurale en Deep intracerebrale Stereotaxische EEG Elektrodeplaatsing

19.4K weergaven

DOI:

10.3791/54216

25 juni 2016

In dit artikel

Samenvatting

Non-straatverbod EEG radiotelemetrie is een waardevolle methodologische benadering om in vivo langdurige electroencephalograms opnemen van vrij bewegende knaagdieren. Deze gedetailleerde protocol beschrijft stereotaxische epidurale en diepe intracerebrale elektroden plaatsing in verschillende hersengebieden om betrouwbare opnames van CNS ritmiek en CNS gedragsstoornissen stadia te verkrijgen.

Samenvatting

Implanteerbare EEG radiotelemetrie is van cruciaal belang in de neurologische kwalificatie van transgene muismodellen van neuropsychiatrische en neurodegeneratieve ziekten als epilepsie. Deze krachtige techniek niet alleen waardevol inzicht in de onderliggende pathofysiologische mechanismen, dwz., De etiopathogenese van CNS verwante ziekten, vergemakkelijkt ook de ontwikkeling van nieuwe translationeel, dwz., Therapeutische benaderingen. Overwegende concurrerende technieken die gebruik maken van de recorder systemen die worden gebruikt in jassen of tethered systemen last van hun niet-fysiologische straatverbod aan semi-straatverbod karakter, radiotelemetric EEG-registraties overwinnen van deze nadelen. Technisch, implanteerbare EEG radiotelemetrie zorgt voor nauwkeurige en zeer gevoelige meting van epidurale en diep, intracerebrale EEG's onder verschillende fysiologische en pathofysiologische omstandigheden. Eerst geven we een gedetailleerd protocol van een ongecompliceerde, succesvol,snelle en efficiënte techniek voor de epidurale (oppervlakte) EEG-registraties resulteert in een hoge-kwaliteit electrocorticograms. Ten tweede, laten we zien hoe diep, intracerebrale EEG-elektroden, zoals implantaten, in de hippocampus (electrohippocampogram). Voor beide benaderingen wordt een geautomatiseerd 3D stereotaxische elektrode implantatiesysteem gebruikt. De radiofrequentie zender zelf wordt geïmplanteerd in een subcutane zak bij muizen en ratten. Bijzondere aandacht moet ook worden besteed aan de pre-, peri- en postoperatieve behandeling van de proefdieren. Preoperatieve voorbereiding van muizen en ratten, geschikte anesthesie en postoperatieve behandeling en pijn worden beschreven.

Inleiding

Radiotelemetrie is een zeer waardevolle methodologische aanpak voor het meten van een verscheidenheid aan gedrags- en fysiologische parameters bij bewustzijn, ongebreidelde dieren van verschillende grootte, met name in het kader van de EEG, ECG, EMG, bloeddruk, lichaamstemperatuur of activiteit metingen 1-7. Theoretisch kan elk species worden geanalyseerd met implanteerbare EEG radiotelemetrie van knaagdieren zoals muizen en ratten katten, honden, varkens en primaten 3,8. Zelfs vissen, reptielen en amfibieën zijn onderhevig aan radiotelemetric onderzoek 9. In de afgelopen twee decennia heeft implanteerbare EEG radiotelemetrie nuttig g....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Ethiek Verklaring: Alle dierproeven werd uitgevoerd volgens de richtlijnen van de lokale en institutionele Raad over Animal Care (Universiteit van Bonn, BfArM, LANUV, Duitsland). Daarnaast werd alle dierproeven uitgevoerd in overeenstemming met superieure wetgeving, bijvoorbeeld uitgevoerd., De Europese Gemeenschappen richtlijn van de Raad van 24 november 1986 (86/609 / EEG) of individuele regionale of nationale wetgeving. Specifiek wordt alles aan gedaan om het aantal gebruikte dieren en hun lijden te minimaliseren.

1. Proefdieren

  1. Selectie van proefdieren en soorten
    1. Voer radiotelemetric studies bij knaagdiere....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Deze sectie illustreert voorbeelden verkregen van het oppervlak en diep, intracerebrale EEG-registraties. In eerste instantie moet worden vastgesteld dat de baseline opnames onder fysiologische omstandigheden is verplicht voorafgaand aan de latere opnames na bijvoorbeeld farmacologische behandeling. Dergelijke basislijnregistratie kan waardevolle informatie over de functionele onderlinge afhankelijkheid van de hersenen ritmiek met verschillende gedrags-staten of slaap / circadia.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Implanteerbare EEG radiotelemetrie van cruciaal belang omdat het een niet-beperkende techniek waarbij proefdieren hun volledige gedragsrepertoire 1,3 voeren. Dit is van groot belang telemetrische aanpak maakt niet alleen spontane EEG-registraties ook opnamen onder cognitieve taken en circadiane analytische opstellingen, zoals T-doolhof, radiale doolhof, water maze, slaapgebrek taken of wanneer een EEG-registratie nodig of nuttig bij complexe cognitieve of motorische activiteit.

Di.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs willen Dr. Christina Ginkel (Duits Centrum voor Neurodegeneratieve Ziekten, DZNE), Dr. Michaela Möhring (DZNE) en Dr. Robert Stark (DZNE) bedanken voor hun hulp bij de fokkerij van dieren en de gezondheidszorg voor dieren. Dit werk werd financieel ondersteund door het Federale Instituut voor Geneesmiddelen en Medische Hulpmiddelen (Bundesinstitut für Arzneimittel und Medizinprodukte, BfArM) in Bonn, Duitsland.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Carprofen (Rimadyl VET - InjektionA2:D43slösung)PfizerPZN 011020820 ml
Binocular surgical magnification microscope Zeiss Stemi 20000000001003877, 4355400000000, 0000001063306, 4170530000000, 4170959255000, 4551820000000, 4170959040000, 4170959050000
Bulldog serrefineF.S.T.18051-2828 mm
Cages (Macrolon)Techniplast1264C, 1290D
Cold light sourceSchott KL2500 LCD9.705 202besteld bij Th.Geyer
Cotton tip applicators (steriel)Carl Roth EH12.1
Dexpanthenol (Bepanthen Wund- und Heilsalbe)BayerPZN: 1578818
Draps (steriele)HartmannPZN 0366787
70% ethanolCarl Roth 9065.5
0.3%/3% waterstofperoxideoplossingSigma9532130% stockoplossing 
Handschoenen (steriele)Unigloves1570
Tandarts glas ionomer cementKentDental /NORDENTA957 321
2% glutaraldehydeoplossingSigmaG6257
Graefe Forceps-gebogen, getandF.S.T.11052-10
Halsey Micro Naaldhouder-WolfraamcarbideF.S.T.12500-1212.5 cm
Op warmte gebaseerde chirurgische instrumenten sterilisatorF.S.T.18000-50
VerwarmingskussenAEG HK5510520010besteld bij myToolStore
High-speed tandheelkundig boorAdeorSI-1708
Iris schaar extra dun F.S.T.14058-099 cm
Inhalatie narcotisch systeem (isofluraan)Harvard Apparatus GmbH34-1352, 10-1340, 34-0422, 34-1041, 34-0401, 34-1067, 72-3044, 34-0426, 34-0387, 34-0415, 69-0230
IsofluraanBaxter 250 mlPZN 6497131
KetaminePfizerPZN 07506004
Lactated Ringer’s oplossing (steriele)BraunL7502
Lexar-Baby Scissors-recht, 10 cmF.S.T.14078-1010 cm
Nissl kleuroplossingArmin BaackBAA31712159
Niet-absorbeerbaar hechtmateriaal 5-0/6-0 (steriele)SABANA (Sabafil)N-63123-45
Covidien (Sofsilk)S1172, S1173
Halsey NaaldhouderF.S.T.12001-1313 cm
Pads (steriele)ReWa Krankenhausbedarf2003/01
0.9% zoutoplossing (NaCl, steriele)BraunPZN:8609255
Schelpjes met handvat (steriele)propraxis2029/10
Standaard ForcepsF.S.T.11000-12, 11000-1412 cm en 14.5 cm lengte
Staal en wolfraam elektroden paryleenkoating FHC Inc., USA)UEWLGESEANND
Stereotaxic frameNeurostar51730Mbesteld bij Stoelting
(Stereo Drive-New Motorized Stereotaxic)
Tapes (steriele)BSN medical GmbH & Co. KG626225
TA10ETA-F20 DSI270-0042-001XRadiofrequentie zender 3.9 g, 
3.9 g, 1.9 ml, ingangsspanningsbereik ± 2.5 mV,
kanaalbandbreedte (B) 1 - 200 Hz, 
nominale bemonsteringssnelheid (f) 1,000 Hz (f = 5B)
temperatuurbereik 34 - 41 °C
gewaarborgde batterijlevensduur 4 maanden
TL11M2-F20EET DSI270-0124-001XRadiofrequentie zender 
3.9 g, 1.9 ml, ingangsspanningsbereik ± 1.25 mV,
kanaalbandbreedte (B) 1 - 50 Hz, 
nominale bemonsteringssnelheid (f) 250 Hz (f = 5B)
temperatuurbereik 34 - 41 °C
gewaarborgde batterijlevensduur 1.5 maanden
Tissue Forceps- 1x2 Teeth 12 cmF.S.T.11021-1212 cm lengte
Wolfraamcarbide iris schaarF.S.T.14558-1111.5 cm
Vibroslicer 5000 MZElectron Microscopy Sciences5000-005
Xylazin (Rompun)BayerPZN: 1320422

Referenties

  1. Kramer, K., et al. The use of radiotelemetry in small laboratory animals: recent advances. Contemp Top Lab Anim Sci. 40, 8-16 (2001).
  2. Kramer, K., et al. The use of telemetry to record electrocardiogram and hea....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Stereotaxische elektrodeplaatsingepidurale EEG registratieintracerebrale EEG elektroden3D stereotaxisch systeemimplantatie van zendersubcutane pocketfixatie met tandcementepidurale referentie elektrodediepe hersenelektrode