Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Onderzoek naar het Georgia (III) Complex van EOB-DTPA en haar

9.6K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/54334

⸱

17 augustus 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

In dit artikel

Samenvatting

Een procedure voor de isolatie van EOB-DTPA en daaropvolgende complexering met natuurlijke Ga (III) en 68Ga wordt hierin voorgesteld, alsmede een grondige analyse van verbindingen en onderzoek op labelingsefficiëntie in vitro stabiliteit en n- octanol / water verdelingscoëfficiënt van het radiogelabelde complex.

Samenvatting

We tonen een methode voor het isoleren van EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (carboxymethyl) -4- (ethoxybenzyl) -undecanedioic acid) vanaf het Gd (III) complex en protocollen voor de bereiding van de nieuwe niet-radioactieve, dwz natuurlijke Ga (III) en radioactief 68Ga complex. De ligand en de Ga (III) complex gekenmerkt door kernmagnetische resonantie (NMR) spectroscopie, massaspectrometrie en elementanalyse. 68Ga werd verkregen met een standaard elutie methode in een 68 Ge / 68Ga-generator. Experimenten om de 68Ga-merkingsrendement van EOB-DTPA bij pH 3,8-4,0 werden geëvalueerd. Opgericht analysetechnieken radio TLC (dunnelaagchromatografie) en radio HPLC (hogedrukvloeistofchromatografie) werden gebruikt om de radiochemische zuiverheid van de tracer bepaald. Als een eerste onderzoek van de lipofiliciteit 68 Ga tracers 'de n- octanol / water distribution coëfficiënt 68Ga species aanwezig in een pH 7,4 oplossing werd bepaald door een extractiewerkwijze. In vitro stabiliteit metingen van de tracer in verschillende media bij fysiologische pH werden uitgevoerd, waaruit verschillende graden van afbraak.

Inleiding

Dinatriumgadoxetinezuur, een algemene naam voor Gd (III) complex van het ligand EOB-DTPA 1, is een veel gebruikte contrastmiddel hepatobiliaire magnetic resonance imaging (MRI). 2,3 Vanwege zijn specifieke opname door hepatocyten en lever hoog percentage van hepatobiliaire uitscheiding het maakt de lokalisatie van focale laesies en levertumoren. 2-5 bepaalde beperkingen van de MRI-techniek (bijvoorbeeld toxiciteit van de contrastmiddelen, beperkte toepasbaarheid bij patiënten met claustrofobie of metalen implantaten) pleiten voor een alternatief diagnostisch hulpmiddel .

Positron emissie tomografie (PET) is een moleculair beeldvormingswerkwijze, waarbij een kleine hoeveelheid van een radioactieve stof (tracer) toegediend, waarna de verdeling in het lichaam wordt opgenomen door een PET-scanner. 6 PET is een dynamische methode die hoge ruimtelijke en temporele resolutie beelden en kwantificering van de resultaten, zonderomgaan met de bijwerkingen van MRI-contrastmiddelen. De informatieve waarde van de metabole verkregen informatie kan verder worden vergroot door combinatie met anatomische data ontvangen van andere beeldvormende methoden, meestal bereikt door hybride beeldvorming met computertomografie (CT) in PET / CT scanners.

De chemische structuur van een tracer geschikt voor PET moet een radioactieve isotoop die als positron emitter omvatten. Positronen hebben een korte levensduur, omdat ze vrijwel direct vernietigen met elektronen van het atoom schelpen van het omringende weefsel. Door vernietiging twee 511 keV gamma-fotonen met tegengestelde bewegingsrichting worden uitgestoten, die worden geregistreerd door de PET-scanner. 7,8 Om een tracer, PET nucliden kunnen covalent worden gebonden aan een molecuul, zoals het geval is in 2-deoxy 2- [18F] fluoroglucose (FDG), de meest intensief gebruikte PET-tracer. 7 kan echter een nuclide vormen ook coördinatieve bindingen met één of meerdere liganden (bv[68 Ga] -DOTATOC 9,10) of worden gebruikt als opgeloste anorganische zouten (bijvoorbeeld [18F] natriumfluoride 11). Geheel, de structuur van de tracer is belangrijk omdat de biologische verdeling, metabolisme en excretie gedrag bepaalt.

Een geschikte PET nuclide moeten gunstige eigenschappen als gunstig positron energie en beschikbaarheid en een halfwaardetijd voldoende voor de beoogde onderzoek combineren. De 68 Ga nuclide is uitgegroeid tot een belangrijke kracht in het gebied van PET in de afgelopen twee decennia. 12,13 Dit is voornamelijk te wijten aan de beschikbaarheid door een generator systeem, die onafhankelijk labeling on-site maakt het mogelijk uit de buurt van een cyclotron. In een generator, de moeder nuclide 68 Ge geabsorbeerd op een kolom waarvan het dochternuclide 68Ga geëlueerd en vervolgens gemerkt met een geschikte chelator. 6,14 Aangezien 68Ga nuclide bestaat als een trivalent kation net als Gd (III) 10,13, chelerende EOB-DTPA met 68 Ga in plaats daarvan zou een complex opleveren met dezelfde totale negatieve lading als gadoxetinezuur. Bijgevolg kan dat 68Ga tracer dezelfde karakteristieke lever specificiteit te combineren met de geschiktheid voor PET-beeldvorming. Hoewel gadoxetinezuur wordt gekocht en toegediend als dinatriumzout, in de volgende context zullen we verwijzen als Gd [EOB-DTPA] en de niet-radioactieve Ga (III) -complex als GA [EOB-DTPA] of 68Ga [ EOB-DTPA] bij het radioactief gemerkte component voor het gemak.

Om hun toepasbaarheid evalueren tracers voor PET, moet radioactieve metaalcomplexen uitvoerig eerst onderzocht in vitro, in vivo of ex vivo experimenten. Om de geschiktheid voor een respectievelijke medisch probleem te bepalen, verschillende tracer kenmerken, zoals biologische verdeling gedrag en de klaring profiel, stabiliteit, orgel specificiteit en cel of tissue opname moeten worden onderzocht. Vanwege hun niet-invasief karakter, zijn in vitro bepalingen vaak voorafgaand aan in vivo experimenten. Algemeen wordt erkend dat DTPA en zijn derivaten beperkt geschikt als chelatoren voor 68Ga door deze complexen ontbreken kinetische inertheid, waardoor relatief snelle afbraak bij toediening in vivo. 14-20 Dit wordt voornamelijk veroorzaakt door apo-transferrine als een concurrent voor 68Ga in plasma. Toch, onderzochten we deze nieuwe tracer met betrekking tot de mogelijke toepassing ervan in hepatobiliaire imaging, waarin diagnostische informatie binnen enkele minuten kan worden geleverd na de injectie 3,4,21-23, daardoor niet per se die langdurige tracer stabiliteit. Hiertoe die we EOB-DTPA uit gadoxetinezuur en aanvankelijk uitgevoerd complexering met natuurlijke Ga (III), die bestaat als mengsel van twee stabiele isotopen, 69 GA en 71 Ga. Het aldus verkregen complex diende als niet-radioactieve standaard voor de volgende chelatie van 68 Ga. We gebruikten gevestigde methoden en tegelijkertijd geëvalueerd hun geschiktheid voor de bepaling van de efficiëntie van 68 Galabeling EOB-DTPA en de lipofiliciteit van de nieuwe 68Ga tracer en de stabiliteit ervan in verschillende media te onderzoeken.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

1. Bereiding van EOB-DTPA en Ga [EOB-DTPA]

Let op: Raadpleeg alle relevante veiligheidsinformatiebladen (VIB) van de gebruikte organische oplosmiddelen, zuren en basen voor gebruik. Voer alle stappen in een zuurkast en het gebruik van persoonlijke beschermingsmiddelen (veiligheidsbril, handschoenen, laboratoriumjas).

  1. Isolatie van EOB-DTPA van gadoxetinezuur
    1. Zet 3 ml 0,25 M gadoxetinezuur injecteerbare oplossing in een kolf. Voeg 500 mg (5,6 mmol) oxaalzuur aan de geroerde oplossing.
    2. Na roeren gedurende 1 uur, filter de suspensie door een frit onder verminderde druk. Was het residu driemaal met 3 ml water, respectievelijk.
    3. Combineer de waterige filtraten en rust de oplossing met een pH-elektrode. Voeg 12 M zoutzuur aan het filtraat totdat de pH ongeveer -0,1.
    4. Verwijder het oplosmiddel in vacuo om een kleurloze rest werd verkregen. Opslaan onder inert gas.
    5. Het residu grondig (ten minste driekeer) met ethylacetaat om de overmaat oxaalzuur verwijderen. Droog het residu onder vacuüm.
    6. Los het residu op in 2 ml water bij kamertemperatuur en vervolgens koelen van de oplossing in een ijsbad. Zonder verwijdering van het ijsbad, voeg 0,5 M waterige natriumhydroxideoplossing druppelsgewijs tot de vorming van een kleurloze vaste stof gluey waargenomen.
    7. Verwijder het water door decanteren. Was de vaste stof twee maal met 1 ml koud water. Droog de ​​vaste stof onder vacuüm om het eerste productfractie verkregen.
    8. Isoleer een tweede productfractie uit de gecombineerde fracties van gedecanteerde water via kolomchromatografie (silica, methanol / water 4/1). 24 Verwijder het oplosmiddel in vacuo.
    9. Indien de aldus verkregen vaste stof is niet zuiver wit, opnieuw op te lossen in 1 ml water, voeg 10 ml ethanol en vervolgens 10 ml diethylether om het product te precipiteren. Filtreer door een frit onder verminderde druk en droog in vacuo.
    10. Combinerenzowel vaste fracties van EOB-DTPA en het uitvoeren van NMR-spectroscopie, 25 massaspectrometrische 26 en 27 elementaire analyses.
  2. Synthese van Ga [EOB-DTPA]
    LET OP: Store vast Ga (III) chloride onder een droge inerte atmosfeer, omdat bij contact met lucht, vocht of vet afbraak plaatsvindt, wat resulteert in bijtende dampen en de vorming van geel, bruin of zwart onzuiverheden.
    1. Bereid een 0,11 M voorraadoplossing door het oplossen van 1,94 g (11,0 mmol) van Ga (III) chloride in 100 ml water. Verdun 1 ml 25% waterige ammonia-oplossing met 4 ml water.
    2. Los op 80 mg (0,15 mmol) EOB-DTPA in een kolf van 10 ml water. Eventueel verhitten het oplosmiddel volledig oplossen te bereiken.
    3. Voeg 1,4 ml (0,15 mmol) van Ga (III) chloride voorraadoplossing. Voorzie de kolf met een roerder en een pH-elektrode. Voeg verdunde waterige ammoniumhydroxideoplossing druppelsgewijs totdat de pH van de oplossing is ongeveer 4,1. Roer bij roOM temperatuur gedurende 30 minuten.
    4. Verwijder het oplosmiddel onder vacuüm. Breng het residu over in een kolf, voorzien van een stillhead met een centrale en parallelle zijhals. Voorzie de centrale hals met een verkoelende vinger en de zijkant hals met een vacuümpomp uitlaat
    5. Verwarm het residu onder verminderde druk (125 ° C, 0,6 mbar). Verwijder regelmatig gesublimeerde ammoniumchloride (zichtbaar als witte bekleding van het glasoppervlak) vanaf het koelvinger en destillatiekop, evenals uit de bovenste delen van de kolf met een licht vochtige doek. Voortzetting van het proces totdat er geen zichtbare vorming van nieuwe sublimeren.
    6. Om laatste sporen van ammonium chloride was het residu driemaal met 0,5 ml hete methanol, respectievelijk. Droog het kleurloze residu onder vacuüm. Voer NMR-spectroscopie, 25 massaspectrometrische 26 en 27 elementaire analyses.

2. Algemene Labeling Procedure

LET OP: Alle experiments inclusief direct of indirect contact met radioactieve stoffen moet worden uitgevoerd door alleen getraind personeel. Gebruik de juiste afscherming apparatuur. Verzamel radioactief afval gescheiden en op te slaan en afvoeren in overeenstemming met de geldende voorschriften.

  1. Elutie van de generator
    Opmerking: Een 40 mCi 68 Ge / Ga generator 68 met de moeder nuclide gebonden als oxide op dodecyl-3,4,5-trihydroxybenzoate silica werd gebruikt. Elutie en zuivering kan handmatig worden uitgevoerd of, zoals in deze procedure, als gecombineerde geautomatiseerd proces met een peristaltische pomp en dispensereenheid.
    1. Bereid oplossingen van 5,5 M, 1,0 M en 0,05 M zoutzuur. Bereid een oplossing van 5,0 M natriumchloride bevattende 25 pl 5,5 M zoutzuur per ml. Bereid een bufferoplossing van pH 4,6 door het combineren van 4,1 g natriumacetaat, 1 ml HCl (30%) en 2,5 ml ijsazijn en het mengsel te verdunnen met water tot 50 ml.
    2. precondition de PS-H + cartridge door langzaam te spoelen met 1 ml 1,0 M zoutzuur en vervolgens 5 ml water.
    3. Elueer het silica kolom van de generator met 4 ml 0,05 M HCl. 12 Plaats het 68Ga-eluaat op het PS-H + cartridge.
    4. Spoel de patroon met 5 ml water en vervolgens drogen met 5 ml lucht. Elueer het 68Ga uit de patroon met 1 ml 5,0 M natriumchlorideoplossing aangezuurd. 28
  2. Labeling van EOB-DTPA met 68 Ga
    1. Los 1 mg (1,9 umol) EOB-DTPA in 1 ml water. Uit deze oplossing neemt 100 pl (0,19 umol) en verdun deze met 9,9 ml water om een ​​19 pM (10 ug / ml) voorraadoplossing van EOB-DTPA bereiden.
    2. Verwijderen 50 pl (gelijk 22-29 MBq) van de oplossing die 68 Ga en in een flesje. Voeg 50 pl (0,5 ug) van een 19 mM voorraadoplossing van EOB-DTPA en 300 pl of buffer om de pH te verhogen tot 4,0. Schud kort en incubeer de oplossing bij kamertemperatuur gedurende 5 min. Verwijder een monster van 1-5 pl en zet HPLC of TLC-analyse.
    3. Voer radio HPLC analyse op een omgekeerde fase (RP) C 18 kolom 29 Gebruik de volgende mobiele fase:. A - water / trifluorazijnzuur (99,9% / 0,1%), B - acetonitril / trifluorazijnzuur (99,9% / 0,1%), gradiënt : 06 min 80% A → 0% A (0,5 ml / min), 610 min 0% A (0,5 ml / min).
    4. Bepaal de piek intensiteiten van de radio HPLC signalen gebied onder de curve. Bereken de labelingsopbrengst als radiochemische zuiverheid (RCP) van de tracer als volgt:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A + A Ga Ga-EOB-DTPA) ∙ 100%
      Een Ga-EOB-DTPA: oppervlakte onder de curve van 68 Ga [EOB-DTPA]
      A Ga: oppervlakte onder de curve van de gratis 68 Ga

3. Labeling Efficiency

  1. Voer procedures etikettering als beschrijvend in doorsnede 2. Gebruik een consistente reeks uitgangspunt vormde van 68Ga-eluaat, bijvoorbeeld 22-29 MBq (40-140 pl, afhankelijk van de versheid van het eluaat).
  2. Voeg de vereiste hoeveelheid bufferoplossing voor de pH op 3,8-4,0 (40-190 pl, afhankelijk van het volume van 68Ga-eluaat). Voeg de vereiste hoeveelheid ligand voorraadoplossing (10-70 pl van een 19 mM oplossing).
  3. Voeg de vereiste hoeveelheid water om het totale volume van elke etikettering sonde aan te passen tot 1,75 ml. Meng goed en laat het monster staan ​​voor 5 minuten bij kamertemperatuur. Voer een HPLC-analyse zoals beschreven in hoofdstuk 2 tot en met de opbrengst etikettering te bepalen.
  4. Voer procedures labeling met hoeveelheden van ligand tussen 0,1 ug en 0,7 ug in stappen van 0,1 ug. Voeren experimenten in triplo voor elke ligand concentratie. Bereken de gemiddelde opbrengst en standaarddeviatie.

4. In vitro stabiliteit

  1. General pROCEDURE en preparaten
    1. Oplossen van een tablet met fosfaat gebufferde zoutoplossing (PBS) in 200 ml gedeïoniseerd water om een ​​PBS-voorraadoplossing met een fosfaatconcentratie van 10 mM te bereiden.
    2. Voer etikettering van 22-29 MBq 68 Ga met 0,5 ul van EOB-DTPA voorraad oplossing, zoals beschreven in paragraaf 2. Afhankelijk van het volume van de 68 Ga eluaat, past u de hoeveelheid buffer, zoals beschreven in paragraaf 3. Zuig monsters van etikettering oplossing met 6-12 MBq tracer om de stabiliteit metingen uit te voeren.
    3. Voer radio TLC analyse van 80 mm silicagel gecoate aluminiumplaten gebruikt 0,1 M waterige natriumcitraat als elutiemiddel en analyseren van de platen met een radioactiviteit TLC scanner. 30 Bepaal de intensiteiten van de signalen TLC gebied onder de curve. Bereken de RCP van de tracer als volgt:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A Ga-vrij + A Ga-EOB-DTPA + A Ga-colloïdaal) ∙ 100%
      Een Ga-EOB-DTPA: oppervlakte onder de curve van 68 Ga [EOB-DTPA]
      Een Ga-vrij: oppervlakte onder de curve van de gratis 68 Ga
      Een Ga-colloïdaal: oppervlakte onder de curve van colloïdaal 68 Ga
    4. Bereken RCP t / RCP 0 voor elk tijdstip. Plot de aldus gestandaardiseerde RCP vs. tijdsverschil sinds het startpunt t = 0 min.
      RCP t = RCP van 68 Ga [EOB-DTPA] op tijdstip t.
      RCP 0 = RCP van 68 Ga [EOB-DTPA] bij t = 0 min.
  2. Stabiliteit in fosfaatgebufferde zoutoplossing (A)
    1. 65 pl labelingoplossing voeg 150 pl PBS stockoplossing en 60 pl natriumhydroxideoplossing (0,1 M) om de pH te verhogen tot 7,4. Meng grondig.
    2. Verwijder een hoeveelheid van 1-5 ul aan TLC-analyse uit te voeren ( 'uitgangspunt'). Onmiddellijk bewaar de oplossing in een incubator bij 37 ° C en verwijderen aliquots TLC analyse daarom op vertegenwoordigentieve tijdstippen gedurende 3 uur.
  3. Stabiliteit ten opzichte overmaat apo -transferrin in PBS (B)
    1. 120 pl labelingoplossing voeg 50 pl PBS voorraadoplossing en 430 gl natriumhydroxideoplossing (0,1 M) om de pH te verhogen tot 7,4. Voeg 40 ul van een oplossing van apo -transferrin (25 mg / ml). Meng grondig.
    2. Verwijder een hoeveelheid van 1-5 ul aan TLC-analyse uit te voeren ( 'uitgangspunt'). Onmiddellijk bewaar de oplossing in een incubator bij 37 ° C en verwijderen aliquots TLC analyse daarom op representatieve tijdstippen gedurende 3 uur.
  4. Stabiliteit in menselijk serum (C)
    1. Aan 500 pl humaan serum voeg 25 ul labelingoplossing en 45 gl natriumhydroxideoplossing (0,1 M) om de pH te verhogen tot 7,4. Meng grondig.
    2. Verwijder een hoeveelheid van 1-5 ul aan TLC-analyse uit te voeren ( 'uitgangspunt'). Onmiddellijk bewaar de oplossing in een Incubator bij 37 ° C en verwijderen aliquots TLC analyse daarom op representatieve tijdstippen gedurende 3 uur.

5. Vaststelling van de verdelingscoëfficiënt LogD

  1. Voer het kenmerken zoals beschreven in hoofdstuk 2. 50 pl labelingoplossing voeg 20 pl PBS voorraadoplossing en 170 gl natriumhydroxideoplossing (0,1 M) om de pH te verhogen tot 7,4.
  2. Terugtrekken 200 ul van deze oplossing en zet het in een plastic V-flacon. Voeg 200 ul van n- octanol. Sluit het flesje en vortex gedurende 2 minuten. Centrifugeer het monster bij 1600 xg gedurende 5 minuten.
  3. Verwijder drievoud van 40 pi uit de n-octanol fase en de waterfase elk en leg ze in een aparte V-flesjes. Wees niet te mengen de lagen.
  4. Meet de activiteit van elk monster in een gamma-teller goed voor 30 sec. Voor elk monster onmiddellijk herhaal de meting twee keer en daarvan berekent het gemiddelde activiteit Ᾱ t in tellingen per minuut (cpm). Noem de aldus gewonnen Ᾱ t, W1, Ᾱ t, W2 en Ᾱ t, W3 (activiteiten in waterige monsters) en Ᾱ t, O1, Ᾱ t, O2, Ᾱ t, O3 (activiteiten n- octanol) langs de respectieve tijdstip t van hun vastberadenheid.
  5. Bepaal het tijdstip van de meting van het laatste monster als t 0. Bepaal en maak een lijst At in de min door het berekenen van At = tt 0. Voer verval gecorrigeerd Ᾱ t, volgens de formule:
    Ᾱ 0 = Ᾱ t · 2 (At / 68 min).
  6. Bereken Ᾱ 0, W als het gemiddelde van Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 en Ᾱ 0, W3 en Ᾱ 0, O als het gemiddelde van Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 en Ᾱ 0, O3. Bereken logD met behulp van de volgende formule:
    logD = log [(Ᾱ 0, O · 40 ug) / (Ᾱ 0, W · 33 ug)].
  7. Voer het hele experiment in drievoud en berekent het gemiddelde logD samen met de standaarddeviatie.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Het ligand EOB-DTPA en de niet-radioactieve Ga (III) complex werden geanalyseerd via 1H en 13C {1H} NMR-spectroscopie, massaspectrometrie en elementanalyse. De in Tabel 1 opgesomde en in Figuren 1-6 resultaten verifiëren de zuiverheid van de stoffen.

Elutie van de 68 Ge / 68 Ga generator leverde oplossingen van 400-600 MBq 68...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

EOB-DTPA is toegankelijk via een meerstapssynthese 33 maar kan evengoed worden geïsoleerd uit beschikbare contrastmiddelen bevattende gadoxetinezuur. Daartoe kan de centrale Gd (III) ionen worden geprecipiteerd met een overmaat oxaalzuur. Na het verwijderen van Gd (III) oxalaat en oxaalzuur het ligand kan worden geïsoleerd door neerslaan in koud water bij pH 1,5. Echter, om opbrengsten kolomchromatografie filtraat verbetering kan worden uitgevoerd in plaats of vervolgtraject. Beide methoden levert het analyti...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs hebben geen dankbetuigingen.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
primovistBayer-0,25 M
gallium(III) chlorideSigma-Aldrich Co.450898
water (deionized)--tap water deionizing equipment by Auma-Tec GmbH
hydrochloric acid 12 MVWR20252.29
sodium hydroxidePolskie Odczynniki Chemiczne S.A.810925429
oxalic acidSigma-Aldrich Co.75688
ethyl acetateBrenntag GmbH10010447
silica gelMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0,063-0,2 mm
TLC silica gel 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
methanolVWR20903.55
ethanolBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468stored over KOH plates
ammonia solution (25%)VWR1133.1
pH electrodeVWR662-1657
stirring and heating unitHeidolph505-20000-00
pumpIlmvac GmbH322002
frit-custom design
NMR spectrometerBruker Coorporation-Ultra Shield 400
mass spectrometerThermo Fisher Scientific Inc.-
elemental analyserHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVector EA 3000 CHNS
deuterated water D2Oeuriso-topD21499,90% D
Material/Equipment required for labeling procedures
68Ge/68Ga generatorITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
pump and dispenser systemScintomics GmbH-Variosystem
hydrochloric acid 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
water (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
sodium chloride (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
sodium acetate (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
glacial acetic acid (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
sodium citrate dihydrateVEB Laborchemie Apolda10782>98,5%
PS-H+ Cartridge (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
PBS buffer (tablets)Sigma-Aldrich Co.79382
human serumSigma-Aldrich Co.H4522from human male AB plasma
flasks, columns, etc.custom design
pH electrodeKnick Elektronische Messgeräte GmbH & Co. KG765-Set
binary pump (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
UV Vis detector (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
radioactive detector (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP columnAdvanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
HPLC glass vialsGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetteEppendorf-
plastic vialsSarstedt AG & Co.6542.007
plastic vialsGreiner Bio-One International GmbH717201
activimeterMED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed 2010
tweezerscustom design
incubatorHeraeus Instruments GmbH51008815
vortex mixerFisons-Whirlimixer
centrifugeHeraeus Instruments GmbH75003360
gamma well counterMED Nuklear-Medizintechnik Dresden GmbH-Isomed 2100
water for chromatographyMerck KGaA1.15333.2500
acetonitrile for chromatographyMerck KGaA1.00030.2500
trifluoroacetic acidSigma-Aldrich91707
TLC radioactivity scannerraytest Isotopenmessgeräte GmbHB00003875equipped with beta plastic detector

Referenties

  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185(2004).
  3. Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
  5. Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
  6. Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
  7. Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
  8. Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
  9. Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
  10. Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
  11. Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
  12. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
  13. Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
  14. Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
  15. Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
  16. Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
  17. Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
  18. Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
  19. Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
  20. Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
  21. Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
  22. Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
  23. Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
  24. Scott, R. P. W. Journal of Chromatography Library. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).
  25. Reichenbaecher, M., Popp, J. Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).
  26. Gross, J. H. Mass Spectrometry: A Textbook. , Springer. (2004).
  27. Ma, T. S., Rittner, R. C. Modern Organic Elemental Analysis. , Marcel Dekker, Inc. (1979).
  28. Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
  29. Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
  30. Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
  31. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
  32. Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13(2012).
  33. Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
  34. 68Ga generator for positron emission tomography. , DE102010037964B3 (2012).
  35. Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates? ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
  36. Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
  37. Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
  38. Beck, W. S. Hematology. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).
  39. Patel, V., Morrissey, J. Practical and Professional Clinical Skills. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).
  40. Bartke, A., Constanti, A. Basic Endocrinology. , 1, CRC Press. (1998).
  41. Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
  42. Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
  43. Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498(2011).
  44. Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
  45. Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Gallium-68 tracerEOB-DTPA-complexradioactieve markeringradio-HPLC-analyseradio-TLC-analysedistributiecoëfficiëntin vitro stabiliteitligandisolatieradiochemische zuiverheid
Onderzoek naar het Georgia (III) Complex van EOB-DTPA en haar
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.