Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Een Repetitive Concussive Head Injury Model in Muizen

11.5K weergaven

DOI:

10.3791/54530

12 oktober 2016

In dit artikel

Samenvatting

Hersenschudding vormt het meest voorkomende type traumatische hersenschade. Daarom kan een repetitief hersenschuddend dierenmodel, dat de belangrijkste kenmerken van een verwonding bij patiënten repliceert, een manier bieden om hersenschudding op een rigoureuze, gecontroleerde en efficiënte manier te bestuderen.

Samenvatting

Ondanks dat de hersenschudding/ lichte traumatische hersenletsel (mTBI) de meest voorkomende vorm van traumatisch hersenletsel is, is er nog steeds een gebrek aan kennis over de blessure en de effecten ervan. Om een beter begrip van hersenschudding te ontwikkelen, worden vaak dieren gebruikt omdat ze een gecontroleerd, rigoureus en efficiënt model bieden. Studies hebben traditionele diermodellen aangepast om mTBI uit te voeren om milde letselernst te stimuleren door de letselparameters te wijzigen. Deze modellen zijn gebruikt omdat ze morfologisch vergelijkbare hersenletsels kunnen produceren met de klinische toestand en een spectrum van letselernst kunnen bieden. Echter, ze zijn beperkt in hun vermogen om de identieke kenmerken van verwondingen bij patiënten te presenteren. Met behulp van een traditioneel impactsysteem kan een repetitief concussiekletsel (rCHI) model mild tot matig mensachtig hersenletsel induceren. De letselernst kan worden bepaald door de periode van bewustzijnsverlies (LOC) te meten met een teken van een tijdelijke stopzetting van de ademhaling. Het rCHI-model is gunstig om te gebruiken vanwege de nauwkeurigheid en eenvoud bij het bepalen van mTBI-effecten en mogelijke behandelingen.

Inleiding

Hersenschudding, ook wel mild traumatisch hersenletsel (mTBI), is de meest veelvuldig voorkomen van traumatisch hersenletsel (TBI) en treft miljoenen mensen in de Verenigde Staten. Hersenschudding kan lastig te diagnosticeren en er is geen specifieke behandeling voor hersenschudding. Er is een groeiende erkenning en enig bewijs dat milde mechanische trauma als gevolg van sportblessures, militaire bestrijding en andere fysiek boeiende bezigheden cumulatief en chronische neurologische gevolgen 1,2 kan hebben. Echter, er is nog steeds een gebrek aan kennis over hersenschudding en hun effecten. De huidige methode beperkt de studies van de pathologie en de beha....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Alle procedures werden uitgevoerd onder protocollen # 201207692 door de Institutional Animal Care en gebruik Comite van de Universiteit van Florida en in overeenstemming met de National Institutes of Health Guide voor de zorg en het gebruik van proefdieren goedgekeurd.

1. Animal Care

  1. Gebruik de 3-4-maanden-oude mannelijke C57BL / 6J muizen. Zorg voor beddengoed, nestmateriaal, voedsel en water ad libitum. Houd de muizen in omgevingstemperaturen geregeld op 20-22 ° C met een constante 12-uur licht / 12 uur donker cycli.

2. Pre-impactie Voorbereiding

  1. Bevestig een op maat gema....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

In dit model (Figuur 1 AC), waren er korte periodes van hijgend en ondiepe ademhaling. Een verlies van bewustzijn (onbewuste) wordt gedefinieerd als een daling van de ademhaling of transiënte beëindiging van de ademhaling voor hervatting van de normale ademhaling. Invloed op het midden van het hoofd veroorzaakt kortdurende bewusteloosheid (7,5 ± 4,7, 7,8 ± 5,5, 10,2 ± 8,8, 9,5 ± 8,0 sec bij iedere stoot afzonderlijk, figuur 1D). Muizenhersenen toonde nor.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

Om hersenletsel morfologisch vergelijkbaar met de klinische toestand na te bootsen, zijn post-hersenschudding symptomen verwacht. Post-hersenschudding symptomen over het algemeen zijn hoofdpijn, duizeligheid, vermoeidheid, geheugen en slaapproblemen, moeite met concentreren evenals angst en depressieve stemming. Aangezien somatische symptomen nog niet meetbaar in diermodellen kunnen zijn, worden de wijzigingen van motorische en cognitieve functies en emotioneel gedrag als criteria voor rationeel hersenschudding evaluati.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben geen financieel belang dat bekendgemaakt moet worden.

Dankbetuigingen

Dit werk werd ondersteund door financiering van een Florida Health-subsidie (Onderzoeksfonds voor hersen- en ruggenmergletsel) (KKW).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
anesthesia machineEagle Eye Anesthesia, IncModel 150 anesthesie
Electromagnetic ImpactorLeicaBiosystemsImpact One Stereotaxic Impactorimpaction uitvoeren
Digital Stereotaxic instrumentLeicaBiosystems39462501muis monteren en positioneringstips
Sicilone rubber-coated metal tipPrecision Tool & Engineering, Gainesvill FLop maat gemaaktimpacttip
Lithium Ion All-in-One TrimmerWAHL Home Products9854-600muishaar scheren
paper clipsop maat gemaaktprobetip
Cotton tipped applicatorsMEDLINEMDS202055hoofd scrubben met saline
Tissue Tek O.C.T.ASKURA FINETEK USA INC4583weefsel inbedding
anti-GFAPDakoCA93013antilichaam voor IHC
anti FerritinSigmaF6136antilichaam voor IHC
VECTASTAIN Elite ABC  kitVector laboratoriesPK-6100IHC detectiesysteem
Permount Mounting MediumFisher ScientificSP15-100
Aperio XT ScanScope scannerLeica Microsystems Inc,dia's scannen
Leica AutoStainer XLLeica the pathology CompanyST2010H&E kleuring
DAB sigmaD3939IHC detectiesysteem

Referenties

  1. Baugh, C. M., et al. Chronic traumatic encephalopathy: neurodegeneration following repetitive concussive and subconcussive brain trauma. Brain Imaging Behav. 6 (2), 244-254 (2012).
  2. McKee, A. C., et al.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Trefwoorden

Muismodelleringelektromagnetisch impactsysteemmodellering van traumatisch hersenletselmeting van bewustzijnsverliesanalyse van astrocytenactivatieferritine immunopositieve cellenstereotaxische framepositioneringkalibratie van impactdiepteprotocol voor repetitief letsel