Dit protocol / manuscript beschrijft een gestroomlijnde werkwijze voor de productie van sporopollenin exine capsules (SEC) van Lycopodium clavatum sporen en voor het laden van hydrofiele stoffen in deze SEC.
Methodenartikel
Dit protocol / manuscript beschrijft een gestroomlijnde werkwijze voor de productie van sporopollenin exine capsules (SEC) van Lycopodium clavatum sporen en voor het laden van hydrofiele stoffen in deze SEC.
Microcapsules verkregen uit plantaardige sporen of pollen zorgen voor een robuust platform voor een breed scala aan micro-inkapseling toepassingen. Sporopollenin exine capsules (SEC) worden verkregen als sporen of pollen worden verwerkt teneinde de interne sporoplasmic inhoud te verwijderen. De verkregen holle microcapsules vertonen een hoge mate van uniformiteit en micromeritic behouden ingewikkelde microstructurele kenmerken in verband met de bepaalde plantensoort. Hierin tonen we een gestroomlijnde werkwijze voor de bereiding van SEC van Lycopodium clavatum sporen en voor het laden van hydrofiele stoffen in deze SEC. De huidige SEC isolatiewerkwijze is onlangs geoptimaliseerd om aanzienlijke vermindering van de verwerkingen die conventioneel worden toegepast in SEC isolatie, en de productie van intacte microcapsules waarborgen. Natuurlijke L. clavatum sporen worden ontvet met aceton, behandeld met fosforzuur, en grondig gewassen om sporoplasmi verwijderenc inhoud. Na ontvetting aceton, heeft één bewerkingsstap gebruikt 85% fosforzuur aangetoond dat alle sporoplasmic inhoud te verwijderen. Door de zure verwerkingstijd beperkt tot 30 uur, is het mogelijk om schone SEC isoleren en voorkomen SEC breken, waarvan is aangetoond dat optreedt met langere verwerkingstijd. Uitgebreid wassen met water, verdunde zuren, verdunde basen, oplosmiddelen en zorgt ervoor dat alle sporoplasmic materialen en chemische residuen adequate afvoer. Het vacuüm ladingstechniek wordt gebruikt om een model eiwit (runderserumalbumine) als representatieve hydrofiele verbinding laden. Vacuüm laden een eenvoudige techniek om verschillende verbindingen geladen zonder het gebruik van agressieve oplosmiddelen of ongewenste chemicaliën die vaak in andere micro protocollen vereist. Op basis van deze isolatie en laden protocollen SEC bieden een veelbelovend materiaal voor gebruik in een breed scala aan micro-inkapseling toepassingen, zoals geneesmiddelen, voedingsmiddelen, cosmetica en persoonlijke verzorging prodducten.
Er is grote belangstelling in natuurlijke plantaardige capsules verkregen uit plantaardige sporen en pollen voor gebruik in micro-inkapseling toepassingen. 15/01 In de natuur, sporen en pollen bieden bescherming voor gevoelige genetisch materiaal tegen barre omstandigheden. De basisstructuur van plantaardige sporen en pollen omvat typisch een buitenste schillaag (exine), een binnenste bekledingslaag (intine) en de interne cytoplasmatische materiaal. De exine bestaat uit een chemisch robuust biopolymeer 1,9,10,13,16 genoemd sporopollenin en de intine bestaat voornamelijk uit cellulosematerialen. 16-18 lege capsules kunnen worden geïsol....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
1. Winning van sporopollenin exine Capsules (SEC) van L. clavatum Sporen
Opmerking: De SEC extractie proces omvat een brandbaar poeder (L. clavatum), hot bijtende zuren, en brandbare oplosmiddelen, waardoor de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen (veiligheidsbril, gezichtsmasker, handschoenen, laboratoriumjas), goedgekeurde risicobeoordeling van het gebruik, en de verwijdering van chemicaliën door bevoegd laboratoriumpersoneel is van essentieel belang.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Gestroomlijnde Extraction Process voor sporopollenin exine Capsules
L. clavatum SEC extractie werd uitgevoerd door drie stappen: (1) Ontvetten middels aceton; (2) acidolyse behulp fosforzuur 85% (v / v); en (3) Uitgebreide SEC wassen gebruikt oplosmiddel. De stroom van de gestroomlijnde SEC extractiewerkwijze wordt getoond in Figuur 1 A -. I kort omvat de werkwijze een ontvetten met a.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
In dit werk, een systematische analyse van de SEC extractie uit L. clavatum sporen wordt gepresenteerd en dit rapport toont aan dat het mogelijk is om een hogere kwaliteit capsules produceren voort als een belangrijke stroomlijning van de bestaande voorkomend protocol. 11 In tegenstelling tot de bestaande protocol die een hoge procestemperatuur (180 ° C) en lange procesduur (7 dagen), 11 de huidige SEC winning processing optimalisatie is primair gericht op het verlagen van de temperatuur e.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dit werk werd ondersteund door de National Research Foundation (NRF-NRFF2011-01) en de National Medical Research Council (NMRC/CBRG/0005/2012).
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Lycopodium clavatum sporen (s-type) | Sigma | 19108-500G-F | |
| Bovine serum albumine | Sigma | A2153-50G | |
| FITC-geconjugeerd BSA | Sigma | A9771-250MG | |
| Fosforzuur (85% w/v) | Sigma | 438081-2.5L | |
| Zoutzuur | Sigma | V800202 | |
| Natriumhydroxide | Sigma | S5881-1KG | |
| Aceton | Sigma | V800022 | |
| Ethanol | AcME | C000356 | |
| De-ioniseerd water | Millipore gezuiverd water | ||
| Kwalitatief filterpapier (kwaliteit nr. 1, katoencellulose) | |||
| Polystyreen microsferen (50 ± 1 µm) | Thermoscientific (CA, USA) | 4250A | |
| Vectashield | Vector labs (CA, USA) | H-1000 | |
| Sticky-slides, D 263 M Schott glas, Nr.1.5H (170 μm, 25 mm x 75 mm) ongesteriliseerde glazen plaat | Ibidi GmbH (München, Duitsland) | 10812 | |
| Commerciële Lycopodium SEC's (L-type) | Polysciences, Inc. (PA, USA) | 16867-1 | |
| Verwarmingsplaten | IKA, Duitsland | ||
| Scanning elektronenmicroscoop | Jeol, Japan | JFC-1600 | |
| Elementaire analyzer | Elementar, Duitsland | VarioEL III | |
| FlowCam: Het benchtop systeem | Fluid Imaging Technologies, USA | FlowCamVS | |
| Confocale laserscanning microscoop | Carl Zeiss, Duitsland | LSM710 | |
| Vriesdroger | Labconco, USA | ||
| UV Spectrometer | Boeco, Duitsland | S220 |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken
Toestemming aanvragen