We hebben een model van pericardiale patch-angioplastiek ontwikkeld dat kan worden gebruikt in zowel aders met een kleine diameter als in slagaders. Dit model kan worden gebruikt om veneuze en arteriële neointimale hyperplasievorming te vergelijken.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Patch angioplastie in het Rat Aorta of Inferior Vena Cava
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Pericardiale pleisters worden vaak gebruikt voor vasculaire chirurgie vaartuigen sluiten. Studies van de neointima hyperplasie die zich vormt op de patch te vergemakkelijken, hebben we een rattenmodel van patch angioplastiek die kunnen worden gebruikt in ofwel een ader of een slagader, waardoor een pleister of patch venoplasty arterioplastie respectievelijk. Technische aspecten van dit model worden besproken. De infra-renale IVC of aorta worden ontleed en vervolgens geklemd proximaal en distaal. Een 3 mm venotomie of arteriotomie uitgevoerd in de infrarenale inferior vena cava of aorta van 6-8 weken oude Wistar ratten. Een runder pericardiale patch (3 mm x 1,5 mm x 0,6 mm) wordt vervolgens gebruikt om de vestiging te sluiten met een 10-0 nylon hechtdraad. Vergeleken met arteriële vlekken, vertonen verhoogde veneuze pleisters neo-intimale dikte op postoperatieve dag 7. Deze nieuwe model van pericardiale patch angioplastie kan gebruikt worden om neointimale hyperplasie op vasculaire biomaterialen onderzocht, evenals de verschillen tussen de arteriële en veneuze vergelijkomgevingen.
Inleiding
Vasculaire chirurgen vaak nauwe bloedvaten met pericardiale pleisters of runderen of varkens, om het risico van restenose 1, 2 verminderen. Arteriële chirurgie, pericardiale patch angioplastie vermindert de snelheid van restenose vergeleken met een primaire sluiting 3, 4. Patch venoplasty wordt ook op dezelfde wijze uitgevoerd om aderen te sluiten, hoewel minder vaak in vergelijking met arteriële procedures 5, 6. Patches typisch ontwikkelen neointima hyperplasie hun luminale oppervlakken; Het mechanisme van de vorming van nieuwe intima onduidelijk, vooral bij de vergelijking van verschillen in de vorming van nieuwe intima tussen de arteriële en veneuze omgevingen. We toonden eerder aan dat pericardiale pleisters aantrekken progenitorcellen in zowel de arteriële en veneuze omgevingen en veneuze patch angioplastiek toont nog eenggressive neointima vorming vergeleken met de arteriële pleisters 7, 8.
In deze studie beschrijven we het rattenmodel van pericardiale patch angioplastiek die gemeenschappelijk is voor zowel het sluiten aders en slagaders en die kunnen worden gebruikt om neointima vorming te bestuderen; Deze werkwijze is een klein diermodel van een operatietechniek vaak gebruikt bij menselijke patiënten. De rat model heeft een grotere diameter dan het muismodel vergemakkelijken technische aspecten van de operatie en betere leercurve voor model.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Goedkeuring door de geschikte Institutional Animal Care en gebruik Comite moet worden verkregen, wat aangeeft dat uw protocol volgt de richtlijnen van het onderzoek dier ethische commissie van uw instelling.
1. Anesthesie en pre-operatieve procedures
- Verdoven mannelijke Wistar ratten, met een gewicht van ongeveer 200 gram, met verdampte 3% isofluraan en 1 l / min zuurstof toegediend in een acryl inductie kamer.
- Bevestig voldoende verdoving door een gebrek aan reactie op een teen en staart knijpen. Plaats zalf op de ogen tot droog voorkomen terwijl de dieren onder narcose. Plaats het elke rat liggende op de kunststof bedieningsplaat en de positie van een silicone masker te leveren verdampte 2-3% isofluraan door continue inademing. Heeft een dier niet onbeheerd achter te laten tot het voldoende bewustzijn heeft herwonnen om borstligging handhaven.
- Terwijl het dragen van steriele handschoenen, verwijder de ventrale buik haar met behulp van een haar remover. Buprenorphine, subcutaan of intraperitoneaal wordt vaak gegeven op dit punt.
2. operatieve ingrepen
- patch venoplasty
- Vóór de operatie, trim de runder pericardiale patch met behulp van een microscissor om een 3 mm afmeting x 1,5 mm x 0,6 mm. Week de vlek in 10 ml gesteriliseerde zoutoplossing 5 min in een celkweek schaal.
- Bereid de incisie site met een actueel antiseptische volgens uw protocol van de instelling en het toepassen van een chirurgisch laken. Gebruik steriele handschoenen en instrumenten om aseptische techniek te handhaven gedurende de operatie. Plaatselijke verdoving kan worden geïnjecteerd in de plaats van de geplande huid incisie.
- Met behulp van een scalpel een middellijn abdominale incisie uitstrekt vanaf het niveau van de zwaardvormig tot net boven het schaambeen.
- Plaats een retractor en eviscerate alle ingewanden uit de buikholte naar de rechterkant. Wikkel de darmen in gaas doordrenkt met een zoutoplossing.
- Expose de infrarenal vena cava (IVC). De plaats waar de pleister implantatie ongeveer 2 mm onder het niveau van de oorsprong van de renale aderen; ontleden de IVC gratis op deze site. Afbinden en verdeel alle lumbale en zijrivier aders in het gebruik van 6-0 nylon hechtingen dit niveau.
- Plaats twee microchirurgie clips in zowel de proximale en distale infarenal IVC. Voer een venotomie met een 25 G naald door aanprikken van de voorste wand van het IVC, en vervolgens uit te breiden tot ongeveer 3 mm met een schaar (figuur 1A).
- Sluit de venotomie met de patch met hardlopen of onderbroken 10-0 nylon hechtingen (Figuur 1B).
- Vul het venoplasty sluiting. Verwijder de distale klem eerste om de patch te ventileren en verwijder vervolgens de proximale klem om de bloedtoevoer naar de IVC te herstellen.
- Bevestig hemostase door het observeren van 30 s zonder compressie. Zet de darmen om hun natuurlijke positie. Sluit de buik met een doorlopende draad volgens erkende protocollen dier.
- patch arterioplastie
- Vóór de operatie, trim de runder pericardiale patch met behulp van een microscissor om een 3 mm afmeting x 1,5 mm x 0,6 mm. Weken in gesteriliseerde zoutoplossing.
- Bereid de incisie met een topisch antisepticum en breng een chirurgische doek. Gebruik steriele handschoenen en instrumenten om aseptische techniek te handhaven gedurende de operatie.
- Met behulp van een scalpel een middellijn abdominale incisie uitstrekt vanaf het niveau van de zwaardvormig tot net boven het schaambeen.
- Plaats een retractor en eviscerate alle ingewanden uit de buikholte naar de rechterkant. Wikkel de darmen in gaas doordrenkt met een zoutoplossing.
- Expose de aorta. De plaats waar de pleister implantatie ongeveer 2 mm onder het niveau van de oorsprong van de nierslagaders; ontleden de aorta gratis op deze site. Afbinden en verdeel alle lumbale slagaders in het gebruik van 6-0 nylon hechtingen dit niveau.
- Klem de infrarenale aorta. Gebruik een 25 G naald op een slagaderincisie door puncturi voerenng de voorste wand van de aorta, en vervolgens uit te breiden tot ongeveer 3 mm met een schaar (figuur 1C).
- Sluit de arteriotomie met de patch met stromend 10-0 nylon hechtingen (figuur 1D). Vul het arterioplastie sluiting. Verwijder de distale klem eerste om de patch te ventileren en verwijder vervolgens de proximale klem om de bloedtoevoer naar de aorta te herstellen.
- Bevestig hemostase door het observeren van 30 s zonder compressie. Zet de darmen om hun natuurlijke positie. Sluit de buik met een doorlopende draad volgens erkende protocollen dier.
3. Postoperatieve Procedures
- Na de sluiting van de buik, stop de narcose. Solliciteer post-operatieve zorg, met inbegrip van analgesie en wondverzorging, in overeenstemming met de instructies wordt aanbevolen door de Institutional Animal Care en gebruik Comite.
- Voor analgesie Gebruik buprenorfine bij 0,1 mg / kg intramusculair minimaal elke 12 uur gedurende 24 uur volgening de chirurgische procedures. Controleer de status van het dier elke dag in het dier kamer, zorgen voor een goede herstel van de peri-operatieve periode, alsmede een adequate behandeling van postoperatieve pijn. Heeft een dier dat een operatie heeft ondergaan om het gezelschap van andere dieren totdat deze volledig is hersteld niet meer terug.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Nadat de patch angioplastie, was er geen trombose in zowel de veneuze (n = 42) of arteriële (n = 24) patch groepen. Overleving op dag 7 was 100% in beide groepen met ofwel een veneuze of arteriële patch.
De pleisters werden geoogst op dag 7 en gekleurd met hematoxyline en eosine, en de neointimale dikte vergeleken 7 zoals eerder beschreven. Vanwege de verschillende morfologische verschil tussen de pleister en de neo...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
We beschrijven een patch angioplastie model in de rat die gebruikt kan worden in zowel aders of slagaders, waardoor een pleister of patch venoplasty arterioplastie respectievelijk. Gebruik van deze pericardiale patch model toonden we agressief en stabiele neointima hyperplasie in de rat IVC venoplasty opzichte van de aorta arterioplastie (figuur 2) 7, 8.
Verschillende technische aspecten zijn opmerkelijk. In de aorta...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Dit werk werd ondersteund in het kader van de National Institutes of Health Subsidies R56-HL095498, R01-HL-095498 (AD), R01-HL128406, de Merit Beoordeling Award I01-BX002336 van het United States Department of Veterans Affairs Biomedisch Laboratoriumonderzoek en Programma ontwikkeling (AD), een Yale Afdeling Heelkunde Ohse award (AD), een Sarnoff Cardiovascular Foundation Fellowship (tot JMS), en door middel van de middelen en het gebruik van de faciliteiten van het Veterans zaken Connecticut Healthcare System (West Haven, CT ). Runder pericardiale pleisters waren royaal door LeMaître Vasculaire Inc. (Burlington, MA).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Bovine pericardial patch | LeMaitre Vascular | ||
| Vascular clamp | Roboz Surgical Instrument Co. | RS-5424 | |
| Clamp applying forceps | Roboz Surgical Instrument Co | RS-5410 | |
| 10-0 Prolene suture | Arosurgical Co. | T05A10N10-13 |
Referenties
- Muto, A., Nishibe, T., Dardik, H., Dardik, A. Patches for carotid artery endarterectomy: current materials and prospects. J Vasc Surg. 50 (1), 206-213 (2009).
- Li, X., et al. Current usage and future directions for the bovine pericardial patch. Ann Vasc Surg. 25 (4), 561-568 (2011).
- Biasi, G. M., Sternjakob, S., Mingazzini, P. M., Ferrari, S. A. Nine-year experience of bovine pericardium patch angioplasty during carotid endarterectomy. J Vasc Surg. 36 (2), 271-277 (2002).
- Papakostas, J. C., et al. Use of the vascu-guard bovine pericardium patch for arteriotomy closure in carotid endarterectomy. Early and long-term results. Ann Vasc Surg. 28 (5), 1213-1218 (2014).
- Ohwada, S., et al. Glutaraldehyde-fixed heterologous pericardium for vena cava grafting following hepatectomy. Hepatogastroenterology. 46 (26), 855-858 (1999).
- Mori, A., et al. Standard hepatic vein reconstruction with patch plasty using the native portal vein in adult living donor liver transplantation. Liver Transpl. 18 (5), 602-607 (2012).
- Bai, H., et al. Pericardial patch venoplasty heals via attraction of venous progenitor cells. Physiological Reports. 4 (12), (2016).
- Li, X., et al. Pericardial patch angioplasty heals via an Ephrin-B2 and CD34 positive cell mediated mechanism. PLoS One. 7 (6), 38844(2012).
- Bai, H., et al. Pretreatment of pericardial patches with antibiotics does not alter patch healing in vivo. J Vasc Surg. 63 (4), 1063-1073 (2016).
- Muto, A., et al. Eph-B4 prevents venous adaptive remodeling in the adult arterial environment. J Exp Med. 208 (3), 561-575 (2011).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
