Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

Meten en Modeling Contractiele Drogen in Human hoornlaag

6.3K weergaven

DOI:

10.3791/55336

1 maart 2017

In dit artikel

Samenvatting

Dit artikel beschrijft een werkwijze voor het kwantificeren van de dynamische drooggedrag en mechanische eigenschappen van het stratum corneum door meten ruimtelijk opgelost in het vlak drogen verplaatsingen van cirkelvormige weefselmonsters gehecht aan een elastomeer substraat. Deze techniek kan worden gebruikt om te meten hoe verschillende chemische behandelingen wijzigen drogen en weefsel mechanische eigenschappen.

Samenvatting

Stratum corneum (SC) is de meest oppervlakkige huidlaag. Het contact met de externe omgeving betekent dat deze weefsellaag wordt onderworpen aan zowel reinigingsmiddelen en dagelijkse variaties in omgevingsvocht; beide kunnen het watergehalte van het weefsel te veranderen. Verlagingen van watergehalte ernstige barrière disfunctie of omgevingen lage luchtvochtigheid kan SC stijfheid veranderen en leiden tot een opbouw van het drogen spanningen. In extreme omstandigheden kunnen deze factoren mechanische breuk van het weefsel. We hebben een hoge doorvoer werkwijze voor het kwantificeren dynamische veranderingen in de mechanische eigenschappen van SC na drogen vastgesteld. Deze techniek kan worden toegepast om veranderingen in de drooggedrag en mechanische eigenschappen van SC met cosmetische cleanser en vochtinbrengende behandelingen kwantificeren. Dit wordt bereikt door het meten van dynamische variaties in ruimtelijk opgelost in het vlak drogen verplaatsingen van cirkelvormige weefselmonsters gehecht aan een elastomeer substraat. In-plane radiale verplaatsingen ACQuired droging worden azimutaal gemiddeld en voorzien van een profiel gebaseerd op een lineair elastische contractiliteit model. Dynamische veranderingen in het drogen van stress en SC elastische modulus kan vervolgens worden gewonnen uit het aangepaste model profielen.

Inleiding

De buitenste laag van de epidermis of stratum corneum (SC) omvat cohesieve corneocyte cellen omgeven door een lipide rijke matrix 1, 2. De samenstelling en de structurele integriteit van SC is essentieel voor een juiste barrière functionaliteit 3, die invasie voorkomt micro-organismen en is bestand tegen zowel mechanische krachten en overmatig water 4. De capaciteit van producten voor persoonlijke verzorging te handhaven of te degraderen huidbarrière functie is van groot belang voor de huid gezondheidszorg en de cosmetische industrie 5....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

Een vrijgestelde goedkeuring (3002-13) voor het uitvoeren van onderzoek met behulp van de-geïdentificeerde weefselmonsters op grond van het Department of Health and Human Services regelgeving, 45 CFR 46,101 (b) (4) werd verleend. Volledige dikte van de huid wordt ontvangen van electieve chirurgie. In dit artikel, het weefsel bron is 66-jarige blanke vrouwelijke borst.

1. Bereiding van elastomeer gecoate Coverslips

  1. In een 20 ml glazen flesje, meng 0,107 g Sylgard 184 verharder met 5,893 g basis. Het totale mengsel massa 6 gram met een base verharder verhouding van 55: 1.
  2. Na mengen met een glasstaaf homogeniteit plaatst....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Figuur 1 (a) toont een representatief fluorescerende beeld van een SC monster bedekt met fluorescerende kralen (deel 3). De overeenkomstige doorgelaten licht beeld van het monster is weergegeven in Figuur 1 (b) bedekt met een koker plot van ruimtelijk opgeloste drogen verplaatsingen die zich vormen na 16 uur drogen bij 25% RH Door de cirkelvormige symmetrie van de monsters, kunnen deze verplaatsingen azimutaal zijn gemiddeld. Figuur 1 (c)

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

In dit artikel beschrijven we een techniek die kan worden gebruikt om het dynamische drooggedrag en mechanische eigenschappen van menselijk SC meten. Eerdere studies hebben aangetoond dat deze techniek kan worden gebruikt om de effecten van de omgevingsomstandigheden en chemische producten vaak gebruikt in cosmetische reinigingsmiddelen en moisturizers op de dynamische drooggedrag van SC 7, 8 kwantificeren. Er zijn een aantal belangrijke stappen in het protocol........

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

De auteurs hebben geen erkenningen.

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Silicone elastomer baseDow-Corning1064291
Silicone elastomer Curing AgentDow-Corning1015311
FluoSpheres Carboxylate 0.1 µm yellow green fluorescent 505/515 Thermo FisherF8803
FluoSpheres Carboxylate 1 µm yellow green fluorescent 505/515 Thermo FisherF8823
FluoSpheres Carboxylate 1 µm nile red fluorescent 535/575 Thermo FisherF8819
Trypsin uit varkenspancreasSigma-AldrichT6567
Trypsine-remmer type II-sSigma-AldrichT9128
(3-aminopropyl)triethoxysilaanSigma-Aldrich440140
NatriumtetraboraatSigma-Aldrich221732
BoorzuurSigma-AldrichB0294
Fosfaat-gebufferd zoutoplossingSigma-AldrichP7059
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimide hydrochlorideSigma-AldrichE7750
Vortexer-mixerVWR58816-123
6 mm diameter ponsSigma-AldrichZ708860
SOLA 6-LCR-SB Lummencor lichtbronNo.3526
Cfi Plan Achro Uw 1X ObjectiefNikon Plan UWMRL00012
CFI Plan Fluor 40X Olie Objectief 1.3 na - 0.20 mm wdNikon Plan FluorMRH01401
Nikon Eclipse Ti-U omgekeerd microscoop NikonMEA53200
Clara-E CameraAndorDR-328G-C02-SIL
Extern focus accessoire E-RFA Ergo DesignNikon99888
Ti-S-E gemotoriseerde stageNikonMEC56110

Referenties

  1. Van Hal, D., Jeremiasse, E., Junginger, H. E., Spies, F., Bouwstra, J. Structure of fully hydrated human stratum corneum: a freeze-fracture electron microscopy study. J. Invest. Dermatol. 106 (1), 89-95 (1996).
  2. Norlén, L., Al-Amoudi, A.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Mechanische eigenschappendroogstresselasticiteitsmodulusfluorescerende bolletjeselastomeersubstraatazimuthale middelinglineair elastisch modelperfusiekamer