De interesse in de studie en toepassing van traditionele kruiden geneeskunde groeit momenteel. In tegenstelling tot moderne medicijnen, waarin chemische ingrediënten zijn bepaald, bevatten kruidenformules sommige onbekende ingrediënten en worden extractieprocessen vereist om de afgifte van hun actieve verbindingen mogelijk te maken. Hoewel veel studies proberen een kleine verbinding te selecteren met een bekende structuur als representatief voor de gehele kruiden- of kruidenformule, kunnen de farmacologische efficiënties noch mechanismen als equivalent 1 , 2 worden beschouwd. Terwijl vingerafdrukken de analyse van de bestanddelen van complexe kruidenformules mogelijk maken, zijn sommige bestanddelen nog niet duidelijk geanalyseerd, wat leidt tot een uitdaging bij het combineren van alle extracten voor studie 3 . De interacties van talrijke bestanddelen / extracten bemiddelen de therapeutische effecten van kruidengeneesmiddelen. Om dit voordeel te behouden, wordt de traditionele extractvorm-decoctIon-wordt nog steeds veel gebruikt in de kliniek. Aangezien de extractieprocedure een grote invloed heeft op de therapeutische werkzaamheid, is een standaard protocol van traditionele waterafkok noodzakelijk, vooral voor in vivo studies 4 , 5 .
Aan de andere kant, bij het onderzoeken van farmacologische mechanismen, is de toediening van kruiddekkingen tijdens in vitro of ex vivo studies ook een uitdaging. Het concept van een geneesmiddel bevattend serum werd voor het eerst in 1988 door Tashino voorgesteld 6 . Sindsdien heeft toenemend aantal onderzoekers het toegepast op kruidengeneeskunde 7 , 8 , 9 . Hoewel de methode van geneesmiddel bevattend serum enkele beperkingen heeft, zoals de invloed van bepaalde componenten van het serum, wordt het nog steeds beschouwd als een methode die de fysiologische omstandigheden nauwlettend nabootst.
De er-xian decoction werd in de vroege jaren 1950 ontwikkeld om de menopauzale symptomen 10 , 11 , 12 , 13 te verlichten. Het is ook toegepast op de behandeling van aplastische anemie 14 , menopauzale osteoporose 15 , 16 , 17 , vroegtijdige ovariale mislukking 18 , borstkanker 19 , eierstokkanker 20 en vertraagde puberteit 21 . Hier presenteren we gedetailleerde protocollen voor de bereiding van zowel de er-xian decoction (EXD) en het geneesmiddel bevattende serum. Daarnaast beschrijven we de toepassing van EXD- en EXD-bevattende serum op muizen-menopauzale osteoporotische modellen.
Een EXD bestaat uit 9 g elk van Curculigo orchioides Gaertn , Herbaa Epimedii Radix Morindae Officinalis en Radix Angelicae Sinensis en 6 g elk van Cortex Phellodendri en Rhizoma Anemarrhenae per volwassen patiënt per dag. De equivalente dosis voor een muis is 0,1418 EXD / kg / dag op basis van de volgende vergelijking 22 : dB = dA * RB / RA * (WA / WB) 1/3 . DA en dB verwijzen naar de dosis per lichaamsgewicht (mg / kg) van respectievelijk de mens en muis. De dosis, in mg / kg, wordt vervangen door het aantal EXD / kg. RA en RB vertegenwoordigen respectievelijk de respectievelijke menselijke lichaamsfactor en muislichaamfactor, die evenredig zijn aan het lichaamsoppervlak (m 2 ) / lichaamsgewicht (kg)) 2/3 (zie tabel 1 ). WA en WB geven het lichaamsgewicht (kg) van de mens en muis aan.