Methodenartikel

De herkenningstest roman-Object voor het onderzoek naar leren en geheugen in muizen

78K weergaven

DOI:

10.3791/55718

30 augustus 2017

In dit artikel

Samenvatting

De herkenningstest object (ORT) is een eenvoudige en efficiënte test voor de evaluatie van leren en geheugen in muizen. De methodologie wordt hieronder beschreven.

Samenvatting

De herkenningstest object (ORT) is een veelgebruikte gedrags assay voor het onderzoek van verschillende aspecten van het leren en geheugen in muizen. De ORT is vrij eenvoudig en kan worden afgerond over 3 dagen: gewenning dag, trainingsdag en testen dag. Tijdens de opleiding is de muis toegestaan om het 2 identieke objecten te verkennen. Op dag van de test, wordt een van de objecten van de opleiding vervangen door een nieuw object. Omdat muizen een aangeboren voorkeur voor nieuwheid, hebben als de muis het vertrouwde object wordt herkend, zal het verteren allermeest zijn tijd op het nieuwe object. Als gevolg van deze aangeboren voorkeur is er geen behoefte aan positieve of negatieve versterking of lang trainingsschema's. De ORT kan daarnaast ook worden gewijzigd voor tal van toepassingen. De retentie-interval kan worden ingekort om te onderzoeken van korte-termijn geheugen of verlengd om de sonde van de lange-termijn geheugen. Farmacologische interventies kan worden gebruikt op verschillende tijdstippen voorafgaand aan de opleiding, na de training, of voorafgaand aan herinneren om te onderzoeken van de verschillende fasen van het leren van (dat wil zeggen, overname, vroeg of laat consolidatie of recall). Over het geheel genomen de ORT is een relatief lage-stress, efficiënte test voor geheugen bij muizen, en is geschikt voor de detectie van neuropsychologische veranderingen na farmacologische, biologische of genetische manipulaties.

Inleiding

Het object herkenningstest (ORT), ook bekend als het nieuwe object herkenningstest (NOR), is een relatief snel en efficiënt middel voor de verschillende fasen van het leren en geheugen testen in muizen. Het was oorspronkelijk beschreven door Ennaceur en Delacour in 1988 en wordt vooral gebruikt in ratten1; echter, het sindsdien met succes aangepast voor gebruik in muizen2,3,4,5,6,7. De test is gebaseerd op zo weinig als drie sessies: een gewenning s....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

alle procedures hier uitgevoerd werden ingediend bij en goedgekeurd door de Animal Care Comité en -gebruik werden uitgevoerd volgens richtlijnen van de NIH.

1. selectie van objecten en experimentele Setup

  1. Selecteer objecten die verschillen genoeg worden gemakkelijk gediscrimineerd door muizen, maar hebben een vergelijkbare mate van complexiteit (structuur, vorm, kleur patronen en helderheid, etc.) oog op het minimaliseren van eventuele geïnduceerde object voorkeur die de resultaten (Zie Ennaceur 2010 voor een uitgebreide beschrijving van het object keuze 7) kan invoerbereikpatroon.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

Een algemene experimentele opstelling voor de ORT is afgebeeld in Figuur 2. Op gewenning dag (T0) muizen zijn geplaatst in de lege arena voor 5 min. vierentwintig uur later, de muizen zijn terug in de kamer met 2 identieke objecten geplaatst en kunnen vrij verkennen voor maximaal 10 min (T1). Op het testen van dag (T2), zijn de muizen weer geplaatst in de arena, maar met één vertrouwd object en één roman object en toegestaan om te verkennen voor maximaal 10 m.......

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De ORT is een efficiënte en flexibele methode voor het bestuderen van leren en geheugen in muizen. Bij het opzetten van een experiment, is het belangrijk om te overwegen een aantal variabelen die de uitkomst kan beïnvloeden. Zoals besproken in de representatieve resultaten, zal de stam van de muis beïnvloeden zowel exploratie-tijd en retentie-interval. Een afname van de exploratie tijd kan scheeftrekken of masker resulteert in een absolute discriminatie analyse2,3

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteur heeft niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Werk aangehaald en eerder gepubliceerde, door de auteur werd gesteund door een subsidie van de National Institute of Mental Health (MH088480). De auteur wil graag bedanken voor haar vroegere mentor, Dr. James O'Donnell voor zijn steun in dat project. Deze publicatie wordt ondersteund door een subsidie van de National Institute of Health (T32 DA007135).

....

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Open Field BoxPanlab/Harvard ApparatusLE800SCBeschikbaar in grijs, wit of zwart
ANY-mazeStoelting Co.60000Gedragsregistratiesysteem
EthoVisionXT 12NoldusGedragsregistratiesysteem; vereist 3-puntstracking
VideocameraElkeDe videocamera moet direct boven het apparaat worden gemonteerd
70% Ethanol Fisher ScientificBP2818-4Voor het starten van de test en tussen de proeven, moet elk object zorgvuldig worden schoongemaakt. Ook de vloer en muren van het apparaat moeten worden schoongemaakt. 

Referenties

  1. Ennaceur, A., Meliani, K. A new one-trial test for neurobiological studies of memory in rats III. Spatial vs. non-spatial working memory. Behav. Brain Res. 51 (1), 83-92 (1988).
  2. Akkerman, S., et al.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

GedragsassayCognitieve StoornisKortetermijngeheugenLangetermijngeheugenFarmacologische InterventieCognitie bij Knaagdieren

Gerelateerde artikelen