Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.

Methodenartikel

De 4-vaartuig Steekproef Aanpak bij Integratieve Studies van Menselijke Placentale Fysiologie

10.2K weergaven

⸱

DOI:

10.3791/55847

⸱

2 augustus 2017

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Obstetrics, Oslo University Hospital, 2Institute of Clinical Medicine, University of Oslo, 3Norwegian Advisory Unit on Women's Health, Oslo University Hospital, 4Department of Fetal Medicine, Oslo University Hospital

In dit artikel

Samenvatting

Wij presenteren een gedetailleerde methode om de menselijke placenta fysiologie in vivo op termijn te bestuderen. De methode combineert bloedmonsterneming van de inkomende en uitgaande vaten op de moeder- en foetale zijkanten van de placenta met ultrasone metingen van volume bloedstroom en placenta weefselmonstering.

Samenvatting

De menselijke placenta is zeer ontoegankelijk voor onderzoek, terwijl het nog steeds in de utero staat . Het huidige begrip van de humane placenta fysiologie in vivo is derhalve grotendeels gebaseerd op dierstudies, ondanks de grote diversiteit tussen de soorten in de anatomie van de placenta, de hemodynamica en de duur van de zwangerschap. De overgrote meerderheid van menselijke placenta studies zijn ex vivo perfusie studies of in vitro trofoblast studies. Hoewel in vitro studies en diermodellen essentieel zijn, is extrapolatie van de resultaten van dergelijke studies naar de menselijke placenta in vivo onzeker. We streven ernaar om menselijke placenta fysiologie in vivo op termijn te bestuderen en een gedetailleerd protocol van de methode te presenteren. Het gebruik van de intraabdominale toegang tot de baarmoeder ader net voor de baarmoeder incisie tijdens de geplande keizersnede verzamelen we bloedmonsters van de inkomende en uitgaande vaten op de moeder- en foetale zijkanten van de placenta. Bij het combineren van conCentratiemetingen uit bloedmonsters met volumeblodstroommetingen, kunnen we de plaatselijke en foetale opname kwantificeren en vrijkomen van een verbinding. Bovendien kunnen plasentale weefselmonsters uit dezelfde moeder-fetusparen metingen inleveren van transportdichtheid en -activiteit en andere aspecten van placentale functies in vivo . Door dit integratieve gebruik van de 4-vaten bemonsteringsmethode kunnen we in vivo een aantal van de huidige concepten van overdracht en metabolisme van de placenta-nutriënten testen, zowel bij normale als pathologische zwangerschappen. Bovendien maakt deze methode de identificatie van door de placenta uitgescheiden stoffen aan de moedercirculatie mogelijk, wat een belangrijke bijdrage kan leveren aan het zoeken naar biomarkers van placenta dysfunctie.

Inleiding

Volgens de National Institutes of Health, USA, is de placenta het minst begrepen orgaan in het menselijk lichaam 1 , 2 , 3 . Het is moeilijk om de menselijke placenta in vivo te openen en te bestuderen zonder onethische risico's op de lopende zwangerschap op te leggen. Studies van placenta functie in de mens zijn daarom grotendeels gebaseerd op in vitro en ex vivo modellen. De meeste van de vorige in vivo studies van placenta transport en metabolisme zijn uitgevoerd in dieren 4 , 5 , 6 . Aangezien de structuur en de functies van de placenta echter sterk verschillen tussen soorten, moet extrapolatie van de resultaten van dieren naar mensen met voorzichtigheid worden gedaan. Slechts een paar kleinere menselijke in vivo onderzoeken hebben de placentale en foetale opname onderzocht en vervoerd onder normale fysiologischeAlle omstandigheden, en niemand heeft de geïntegreerde overdracht van verscheidene verbindingen 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 onderzocht. Deze fundamentele studies illustreren dat in vivo studies van de menselijke placenta haalbaar zijn en dat ze verschillende doeleinden kunnen dienen. In de eerste plaats kunnen huidige concepten van placenta-functies die hoofdzakelijk afkomstig zijn van in vitro , ex vivo en dierstudies in een menselijke omgeving worden getest en aldus nieuw en meer specifiek inzicht verschaffen aan de menselijke placenta. Ten tweede kunnen eigenschappen van de dysfunctionele placenta geassocieerd met afwijkende foetale groei, preeclampsie, moederdiabetes, metabolisch syndroom en andere materiële metabolische stoornissen beter worden gekenmerkt. Ten derde bieden menselijke in vivo studies de mogelijkheid om diagnoses te ontwikkelenTic en predictieve instrumenten van de placenta functie.

Op deze achtergrond streven we naar een uitgebreide verzameling fysiologische gegevens om de menselijke placenta functie in vivo te onderzoeken . Tijdens een geplande keizersnede exploiteren we de intraabdominale toegang tot de baarmoedervlies om bloedmonsters van de inkomende en uitgaande vaten op de moeder- en foetale zijkanten van de placenta te verzamelen (de bemonsteringsmethode met 4 vaten). Deze monsters worden gebruikt om de gepaarde arteriovenous concentratieverschillen van voedingsstoffen en andere stoffen 14 te berekenen. Daarnaast meten we de volumeblodstroom aan beide zijden van de placenta door middel van echografie. Bijgevolg kan placentale en foetale opname van elke verbinding worden gekwantificeerd. Verder is het mogelijk om stoffen die vrijkomen van de placenta aan de materiële en foetale circulaties 15 , 16 , 17 te bepalen . Wanneer combinerenD met klinische parameters van moeder en kind, en analyses van placenta en andere relevante weefsels, heeft deze methode het spannende potentieel om veel aspecten van placenta functies in vivo in dezelfde moederfostusparen te integreren.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

De studie werd goedgekeurd door de gegevensbeschermingsambtenaren van het Universitair Ziekenhuis van Oslo en het regionale comité voor medische en gezondheidsnavorsingsethiek, Zuid-Noorwegen 2419/2011. Alle deelnemers hebben een schriftelijke geïnformeerde toestemming ondertekend bij opname.

1. Voorbereidingen

OPMERKING: een tijdlijn voor de procedures is omschreven in figuur 1 .

figure-protocol-1
Figuur 1 : Flowchart waarin de timing en het personeel betrokken zijn in de 4-vaartmonsteringsprocedure.
Eén kleur vertegenwoordigt één persoon. Gedetailleerde beschrijving van de methode is gegeven in het protocol. Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te bekijken.

  1. Personeel
    1. Zorg ervoor dat alle benodigde medewerkers beschikbaar zijn: een hoogwaardige specialist in fetische geneeskunde die de ultrasone metingen uitvoert, twee verloskundigen die de operatie uitvoeren, een verloskundige en twee verpleegkundigen die de monsters verzamelen, een assistent die de bloedgasanalyses behandelt en een assistent die de Andere monsters achtereenvolgens en direct na de verzameling.
      OPMERKING: bij een meer geavanceerde verzameling van placenta weefsel is een extra persoon verplicht.
  2. uitrusting
    1. Bereid de apparatuur voor, 50 ml ijskoude 1 M fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS), 25 ml koude RNA stabiliserende oplossing en 5 x 0,5 ml optimale snijtemperatuurverbinding (OCT). Benoem de vacutainers en buizen. Zie voorlopige lijst van apparatuur.

2. Moederlijke kenmerken

  1. Noteer de klinische en niet-klinische eigenschappen van de moeder bij opname en herhaal relevante vragen en ikAsurements, inclusief gewicht, op het moment van levering. Noteer de duur van de vastenperiode voorafgaand aan de keizersnede en eventuele hypotensive episodes die tijdens de operatie plaatsvinden.
    Opmerking: Inclusief de minimale materiële klinische dataset die is gerapporteerd in een recente publicatie van Global Gravity CoLaboratory (COLAB). Dit artikel bevat ook enkele zeer belangrijke aspecten bij het kiezen van studiepopulaties en moet worden aangepakt tijdens het plannen van de studie 18 .
  2. Overweeg paternal karakteristieken, inclusief etniciteit, leeftijds- en lichaamsmassa index (BMI).

3. Echografie

  1. Doe het Doppler echografieonderzoek op de dag van de aflevering, met de vrouwen in een vastende toestand. Voer het onderzoek uit tijdens een periode van foetale stoornis, waarbij de vrouw in semi-rugleuning staat, zijt zij een beetje zijdelings tegenover het gebied van belang om de compressie van de aorta en vena cava te vermijden. Monitor de uitvoer inTenslotte door de mechanische en thermische indices op het display.
  2. Naaldvlies
    1. Visualiseer de navelvlies in een sagittale of schuine transectie van de foetale buik. Meet de diameter van het inwendige vaartuig in het rechte gedeelte van de intra-abdominale navelvlies, vóór eventuele zichtbare takken. Gebruik regelmatige B-modus en visualiseer het vat in een loodrechte hoekhoek voor diametermetingen en houd een aantal optimale frames voor latere metingen om het effect van veranderingen in de pulsatiele diameter te minimaliseren.
      1. Herhaal de maten vijf tot tien keer 19 .
    2. Op dezelfde plek gebruik Doppler-echografie en pas de sonde aan om zo weinig mogelijk een inspronghoek te krijgen (altijd <30 °) om de gemiddelde snelheid (TAMX) te meten. Verkrijg de snelheid over een periode van 3 - 5 s (niet-pulserende stroming).
  3. Uterine arterie
    1. Gebruik DopplerEchografie om de uterine arterie te visualiseren als het de buitenste iliac arterie overschrijdt, onmiddellijk nadat het uit de inwendige iliaire slagader vertakt. Stel de sonde op deze site aan om een ​​lage invalshoek te krijgen (altijd <30 °) en meet TAMX. Verkrijg de snelheid als de gemiddelde snelheid van drie hartcycli.
    2. Aangezien het onwaarschijnlijk is om een ​​loodrechte hoek te krijgen op dezelfde plaats als TAMX wordt gemeten, volg het schip distaal om een ​​juiste hoek te krijgen voor diametermetingen zo dicht bij de plaatsen met diametermetingen als haalbaar. Uitsluit de diametermetingen als er zichtbare vaten vertrekken voor deze site, zoals geëvalueerd door Doppler ultrasound.
      1. Gebruik regelmatige B-modus en visualiseer het vat in een loodrechte hoekhoek voor diametermetingen en houd een aantal optimale frames voor latere metingen om het effect van veranderingen in de pulsatiele diameter te minimaliseren.
      2. Herhaal de maten vijf tot tien keer 19 .
      li>
  4. Let op de positie van de placenta.

4. 4-vaten Bloedmonsterneming

OPMERKING: De tijdlijn voor de procedures is omschreven in figuur 1 en een overzicht van de monsters is geïllustreerd in figuur 2 .

figure-protocol-2
Figuur 2 : Schematische illustratie van de Placental Vasculature en de bemonsteringssites.
In de 4-vaten bemonsteringsmethode worden bloedmonsters getrokken uit de baarmoederader, de radiale slagader (als proxy voor de baarmoederartherapie) en de navelstrengaders en ader. Bloedstroom in de baarmoederartherapie en de navelvlies wordt gemeten door middel van echografie. Weefselmonsters uit de placenta worden verzameld. Illustratie: Øystein H. Horgmo, Universiteit van Oslo.5847fig2large.jpg "target =" _ blank "> Klik hier om een ​​grotere versie van deze figuur te zien.

  1. Veiligheidsprocedures
    1. Zorg voor alle medewerkers in het operatie theater met handschoenen, chirurgische scrubpakken, maskers en hoofdkleding.
    2. Breng de chirurgen en onderzoekspersoneel in contact met het operatieveld met chirurgische scrubpakken, maskers, hoofddeksels, jurken en dubbele handschoenen. Glazen zijn optioneel.
    3. Personeel verlenen van de bloedmonsters met handschoenen.
    4. Zorg voor personeel die de placenta monsters verwerkt met handschoenen en chirurgisch masker. Homogenisatie vereist het gebruik van kappen.
  2. Voorbereiding in de operatie theater
    1. Geef een briefing en geef de apparatuur aan aan alle medewerkers die de bemonstering zullen helpen voor het begin van de operatie.
    2. Adresseer de anesthesioloog en anesthesiologieverpleegkundige die zal helpen bij de noodzakelijke perifere arteriële en veneuze toegang en ervoor zorgen datGeen vloeistoffen worden intraveneus gegeven voor het monsterneming.
    3. Geef drie spuiten (10 ml) zonder naalden aan de persoon die bij het antecubitale aderproef en twee spuiten (een 20 ml en een 10 ml) en een bloedgasspuit (met heparine) bij de persoon die bij de radiale slagader helpt, helpen.
    4. Maak twee steriele spuiten (20 ml), vijf steriele spuiten (10 ml), drie "vlindernaalden" en twee bloedgasspuiten voor het operatieveld.
  3. Toegang tot bloedvaten.
    1. Volg de standaard procedure voor de keizersnede om perifere intraveneuze (iv) toegang te waarborgen.
      OPMERKING: De antekubitale ader is de voorkeur omdat het gemakkelijker is om monsters uit deze site te trekken.
    2. Plaats de radiale slagader bij de pols door middel van echografie of door palpatie. Na 0,5 ml subcutane lidocaïne analgesie, plaats een arteriële lijn in de radiale slagader. Verlaat de bemonstering van deze site in geval van drie mislukte invoegingen, ofAls de vrouw pijn ervaart tijdens de invoeging.
      OPMERKING: Voer de chirurgische procedure van keizersnede uit volgens de standaard procedure. Alleen de aanpassingen die nodig zijn voor de bemonsteringsprocedure worden hieronder onderstreept.
  4. Moederbloedmonsters
    OPMERKING: Verkrijg alle drie de bloedmonsters van de moeder (baarmoeder, radiale slagader en antecubitale ader) tegelijk voor de baarmoederinsnijding.
    1. Voor de baarmoederader, na het openen van de buikholte, gebruik een retractor om de buikwand op te heffen en de hoofdtakken van de baarmoedervenen op de anterolaterale zijden van de baarmoeder bloot te leggen. Verkrijg bloed van de baarmoedertakken aan de zijkant als de placenta wanneer mogelijk of gebruik de meest prominente venexplexus als de placenta zich in de baarmoederbalk bevindt.
      1. Voeg een vlindernaald in op een bloedgasspuit in de baarmoedervlies met een hoek van ongeveer 30 graden en bloed door middel van zachte aspiratie om te vermijdenhemolyse. Terwijl u de iv-positie van de vlindernaald zorgvuldig vastzet, vervang de gevulde bloedgasspuit met een 20 ml en een 10 ml spuit achtereenvolgens.
        OPMERKING: Optimale toegang wordt het beste verzekerd wanneer u aan de contralaterale zijde van de gekozen baarmoederader staat.
    2. Voor de radiale slagader aspireren van de intra-arteriële lijn. Gooi de eerste 5 ml weg en haal vervolgens 3 ml in de injectiespuit voor de bloedgasanalyses, gevolgd door 3 ml in twee spuiten (20 + 10 ml).
    3. Voor de antekubitale ader, aspireren voorzichtig van de intraveneuze katheter. Gooi de eerste 5 ml weg en haal dan 30 ml in drie spuiten (10 ml) af.
    4. Voer een laatste inspectie van de steekproefplaats op de baarmoederaf voordat u de buik begint te sluiten.
  5. Voetbloedmonsters
    1. Als het kind geboren is, haal het bloed onmiddellijk uit de navelstreng, zonder de navelstreng te klemmen of de placenta te leveren. Begin witH de spuit voor bloedgasanalyse en volg eventueel met drie 10 ml spuiten.
    2. Wanneer de arteriële monsters zijn bevestigd, klem het koord vast en breng het kind naar de vroedvrouw voordat u het monster uit de navelvlies (bloedgas en 20 + 10 ml injectiespuiten) verzamelt.
      OPMERKING: Verkrijg alle navelmixmonsters binnen enkele seconden van de levering en met de placenta in situ, tenzij het spontaan is losgemaakt.
    3. Volg de Noorse aanbevelingen over de late klemmen. In geval van een verdrietig kind, klem en snijd het snoer meteen en de hand het kind aan de vroedvrouw en de neonatoloog.
  6. Hantering van bloedmonsters
    1. Zet de bloedgasspuiten op ijs terwijl u de rest van de bloedmonsters voorbereidt en analyseer ze binnen 5 minuten in een bloedgasanalysator.
    2. Breng de bloedmonsters onmiddellijk over naar vacutainers en plaats de plasma buizen 1 tot 2 minuten op een tuimelaar voordat u ze op ijs zet. Laat de serumbuizen op de arbeidAtorische bank om 30 minuten te vestigen.
      OPMERKING: Dit is een kritische stap in de procedure die extra aandacht vereist, omdat monsters uit alle vijf locaties tegelijkertijd moeten worden voorbereid om goede kwaliteit te waarborgen.
    3. Centrifugeer de plasmamonsters zo snel mogelijk en binnen 30 minuten bij 6 ° C, 2.500 xg gedurende 20 minuten.
    4. Na 30 minuten centrifugeer de serummonsters bij kamertemperatuur gedurende 10 minuten bij 2.500 x g.
    5. Aliquot de supernatanten zorgvuldig aan 2 ml cryobuizen, waarbij 0,5 ml van de supernatant boven de pellet wordt gelaten om bloedplaatjesvrij plasma te waarborgen.
    6. Bewaar de monsters bij -80 ° C.

5. Inzameling van Placentale Weefsel

  1. Zet de placenta zo spoedig mogelijk na een aflevering op een ijskoelde dissectiebak. Foto en meet de langste diameter en de diameter op 90 graden.
  2. Weeg de placenta.
  3. Noteer het gewicht, de twee diameters, elke gRoss pathologie, aantal vaten in het koord en het tijdsinterval van de aflevering tot wanneer de placenta op ijs was geplaatst.
    OPMERKING: Stuur de placenta naar patologisch onderzoek als klinisch aangegeven.
  4. Plaats de placenta met het moederoppervlak naar boven en identificeer 4 - 5 bemonsteringsplaatsen die willekeurig in elk kwadrant van de placenta zijn gelegen, waarbij gebieden van frank pathologie voorkomen worden. Verwijder de decidua met behulp van een schaar om 3 - 5 mm van het moederoppervlak af te snijden. Verzamel een 1 - 2 cm 3 stuk wild weefsel uit elke site.
  5. Was het verzamelde weefsel zachtjes in 50 ml koude 1M PBS. Verdeel in verschillende stukken van elke steekproefplaats en aliquot.
    Opmerking: De grootte van de placenta-stukken zal afhangen van de geplande analyses.
  6. Voeg aliquots van 0,1 - 0,5 cm 3 weefselmonsters toe aan 5 cryobuizen en snap in vloeibare stikstof.
  7. Voeg kleine stukken van 0,1 - 0,2 cm 3 aan de buis toe met 25 ml RNA stabilisatieoplossing. Opslaan bij 46, C gedurende 24 uur, verwijder de RNA-stabilisatieoplossing en vervang deze. Bevriezen.
  8. Voeg stukken 0,5 cm 3 aan de 5 cryobuizen toe met 0,5 ml OCT, vul de OCT op, meng en vries.
  9. Bewaar de monsters bij -80 ° C tot analyse.
    OPMERKING: Burton et al. Biedt een uitstekend overzicht van de praktische aspecten van de steekproeven, afhankelijk van de geplande analyses. 20 Overweeg het resterende weefsel voor de isolatie van de microveuze en basale membranen te bereiden en om decidueel weefsel te verzamelen door middel van vacuümzuigtechniek. 21 , 22

6. Neonatale kenmerken

  1. Noteer de neonatale eigenschappen, waaronder Apgar-score (1, 5 en 10 min), geslacht, gewicht, lengte, zwangerschapstijd en toegang tot pasgeboren intensieve zorg eenheid (lengte en uitkomst van verblijf).
  2. Overweeg het meten van de neonatale lichaamsamenstelling door antropometrische metingen, luchtverplaatsingMentale plethysmograaf of dubbele röntgenabsorptiometrie. 23 , 24

7. Berekeningen

  1. Veronderstel een soortgelijke bloed samenstelling in de radiale en uterine arterie en bereken het uteroplacente arteriovenous concentratieverschil.
    Uteroplacental arteriovenous concentratieverschil = C A - C V
    Variabel veneuze arteriële concentratieverschil = C v - C a

    Waar C concentreert met abonnementen: A, de radiale slagader; V, de baarmoeder ader; V de navelvlies en a, de navelstrengader.
  2. Bereken de volume bloedstroom, ml / min (Q):
    figure-protocol-3
    Waar D de diameter van het vat is (cm), is TAMX de gemiddelde snelheid van de gemiddelde snelheid en h is de coëfficiënt voor het ruimtelijke bloedsnelheidsprofiel. Gebruik 0,5 als de coëfficiënt voor de navelvlies en0,6 voor de baarmoederslagader 25 , 26 .
  3. Bereken de opname van de placenta en los volgens Fick's principe:

    Uteroplacale opname = ( C A - C V ) x Qm
    Fetale opname =     ( C v - C a ) x Qf

    Abonnementen: m, moeder en f, foetus.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

De bemonsteringsmethode met 4 vaten is van toepassing in de klinische praktijk en we hebben succesvolle bloedmonsters verkregen uit 209 moeder- / zuigelingenparen. In 128 van deze hebben we ook bereikt om de volume bloedstroom te meten. Volledige sampling van 4 vaten en goede kwaliteitsmetingen van zowel moeder- als foetale vaten werden verkregen in 70 moeder-fetusparen ( Figuur 3 ). Daarnaast hebben we tot nu toe bloed- en placenta-monsters verzameld van 30...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

De bemonstering methode van placenta 4-vaten is relevant voor drie hoofddoeleinden. Ten eerste kan het worden gebruikt om te bestuderen hoe specifieke stoffen door de placenta aan de moederzijde worden opgevangen en eventueel overgebracht worden naar de navelstroming en de foetus, zoals aangetoond door onze glucose- en aminozuurstudies. Ten tweede is de methode zeer relevant voor het bestuderen van stoffen die door de placenta zijn geproduceerd en worden vrijgegeven aan de moeder- of foetale circulaties, zoals bli...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dankbetuigingen

Eerst en vooral bedanken we de moeders die deelnamen aan dit project. Vervolgens erkennen we al het personeel dat de bemonsteringsprocedure, de anesthesioloog, de verpleegkundige anesthesioloog en de chirurgische verpleegkundigen heeft geholpen en vergemakkelijkt. Het project zou niet mogelijk zijn geweest zonder financiering van de Regionale Gezondheidsinstantie Zuidoost-Noorwegen en de Noorse Adviesgroep Vrouwengezondheid, Universiteit van Oslo en lokale financiering van het Universitair Ziekenhuis van Oslo.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Maternal body composition
ImpedantieschaalTanitaof vergelijkbaar
Ultrageluidmetingen 
Sequoia 512 echografietoestelAcusonuitgerust met een gebogen transducer met kleur en pulsewave Doppler (frequentiebandbreedte 2 - 6 MHz)
Bloeddempers
Arerial canuleBD Medical682245of vergelijkbaar
20 cc Excentrische Luer Tip Spuit zonder naaldTermoSS-20ESof vergelijkbaar. 3 nodig.
10 cc Excentrische Luer Tip Spuit zonder naaldTermoSS-10ESof vergelijkbaar. 9 nodig.
5 cc 6% Luer Spuit zonder naaldTermoSS-05S1of vergelijkbaar. 2 nodig.
Arterial bloedgas spuit Radiometer Medicalof vergelijkbaar. 4 nodig.
Steriele gevleugelde naald verbonden met flexibele slang, 21 gaugeGreiner Bio-One450081(bedoeld voor eenmalig gebruik). 3 nodig.
Vacutainer buis 6 mL EDTA Greiner Bio-One456043of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie. 10 nodig.
Vacutainer buis 5 mL LH Lithium Heparine SeparatorGreiner Bio-One456305of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie. 5 nodig.
Vacutainer buis 6 mL Serum Clot Activator Greiner Bio-One456089of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie. 5 nodig.
Vacutainer buis 3 mL  9NC Coagulatie natriumcitraat 3,2%Greiner Bio-One454334of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie. 5 nodig.
Cryogene flesjes, 2,0 mLCorning430488of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie, serum/type plasma en ID. 90 nodig.
Gemarkeerde trays om de spuiten te vervoerenom de bloedmonsters in de operatiekamer te vervoeren
Rockervoor zachtjes mengen van de monsters
IJsin een styrofoam doos
Vloeibare stikstofin een geschikte container
Placenta monsters
Metalen lade
IJsin een styrofoam doos
Gekalibreerd weegschaal
Metalen liniaal
1 M Fosfaat gebufferde zoutoplossingSigmaD1408of vergelijkbaar. Verdun 10 M tot  1 M voor gebruik
RNA stabilisatie oplossingSigmaR0901-500ML of vergelijkbaar
Optimale Snij Temperatuur (O.C.T.) compoundvwr361603Eof vergelijkbaar
Cryogene flesjes, 2,0 mLCorning430488of vergelijkbaar. Label met monsterlocatie. inhoud en ID. 10 nodig.
Centrifugebuizen, conische bodem 50 mLGreiner Bio-One227.285of vergelijkbaar. Label met "RNA later", monsterlocatie en ID. 2 nodig.
Vloeibare stikstofin een geschikte container
Fetal body composition
Gekalibreerd weegschaal
Meetlint

Referenties

  1. Jansson, T., Powell, T. L. Role of the placenta in fetal programming: underlying mechanisms and potential interventional approaches. Clin Sci (Lond). 113 (1), 1-13 (2007).
  2. Hanson, M. A., Gluckman, P. D. Early developmental conditioning of later health and disease: physiology or pathophysiology. Physiol Rev. 94 (4), 1027-1076 (2014).
  3. Guttmacher, A. E., Spong, C. Y. The human placenta project: it's time for real time. Am J Obstet Gynecol. 213, 4 Suppl 3-5 (2015).
  4. Battaglia, F. C., Regnault, T. R. Placental transport and metabolism of amino acids. Placenta. 22 (2-3), 145-161 (2001).
  5. Hay, W. W. Placental-fetal glucose exchange and fetal glucose metabolism. Trans Am Clin Climatol Assoc. 117, 321-339 (2006).
  6. Woollett, L. A. Review: Transport of maternal cholesterol to the fetal circulation. Placenta. 32, Suppl 2 218-221 (2011).
  7. Prenton, M. A., Young, M. Umbilical vein-artery and uterine arterio-venous plasma amino acid differences (in the human subject). J Obstet Gynaecol Br Commonw. 76 (5), 404-411 (1969).
  8. Cetin, I., et al. Plasma and erythrocyte amino acids in mother and fetus. Biol Neonate. 60 (2), 83-91 (1991).
  9. Filshie, G. M., Anstey, M. D. The distribution of arachidonic acid in plasma and tissues of patients near term undergoing elective or emergency Caesarean section. Br J Obstet Gynaecol. 85 (2), 119-123 (1978).
  10. Haberey, P. P., Schaefer, A., Nisand, I., Dellenbach, P. The fate and importance of fetal lactate in the human placenta -a new hypothesis. J Perinat Med. 10 (2), 127-129 (1982).
  11. Prendergast, C. H., et al. Glucose production by the human placenta in vivo. Placenta. 20 (7), 591-598 (1999).
  12. Metzger, B. E., Rodeck, C., Freinkel, N., Price, J., Young, M. Transplacental arteriovenous gradients for glucose, insulin, glucagon and placental lactogen during normoglycaemia in human pregnancy at term. Placenta. 6 (4), 347-354 (1985).
  13. Zamudio, S., et al. Hypoglycemia and the origin of hypoxia-induced reduction in human fetal growth. PLoS One. 5 (1), 8551(2010).
  14. Holme, A. M., Roland, M. C., Lorentzen, B., Michelsen, T. M., Henriksen, T. Placental glucose transfer: a human in vivo study. PLoS One. 10 (2), 0117084(2015).
  15. Holme, A. M., Roland, M. C., Henriksen, T., Michelsen, T. M. In vivo uteroplacental release of placental growth factor and soluble Fms-like tyrosine kinase-1 in normal and preeclamptic pregnancies. Am J Obstet Gynecol. 215 (6), 781-782 (2016).
  16. Paasche Roland, M. C., Lorentzen, B., Godang, K., Henriksen, T. Uteroplacental arterio-venous difference in soluble VEGFR-1 (sFlt-1), but not in soluble endoglin concentrations in preeclampsia. Placenta. 33 (3), 224-226 (2012).
  17. Brar, H. S., et al. Uteroplacental unit as a source of elevated circulating prorenin levels in normal pregnancy. Am J Obstet Gynecol. 155 (6), 1223-1226 (1986).
  18. Myatt, L., et al. Strategy for standardization of preeclampsia research study design. Hypertension. 63 (6), 1293-1301 (2014).
  19. Kiserud, T., Rasmussen, S. How repeat measurements affect the mean diameter of the umbilical vein and the ductus venosus. Ultrasound Obstet Gynecol. 11 (6), 419-425 (1998).
  20. Burton, G. J., et al. Optimising sample collection for placental research. Placenta. 35 (1), 9-22 (2014).
  21. Illsley, N. P., Wang, Z. Q., Gray, A., Sellers, M. C., Jacobs, M. M. Simultaneous preparation of paired, syncytial, microvillous and basal membranes from human placenta. Biochim Biophys Acta. 1029 (2), 218-226 (1990).
  22. Staff, A. C., Ranheim, T., Khoury, J., Henriksen, T. Increased contents of phospholipids, cholesterol, and lipid peroxides in decidua basalis in women with preeclampsia. Am J Obstet Gynecol. 180 (3), Pt 1 587-592 (1999).
  23. Catalano, P. M., Thomas, A. J., Avallone, D. A., Amini, S. B. Anthropometric estimation of neonatal body composition. Am J Obstet Gynecol. 173 (4), 1176-1181 (1995).
  24. Ellis, K. J., et al. Body-composition assessment in infancy: air-displacement plethysmography compared with a reference 4-compartment model. Am J Clin Nutr. 85 (1), 90-95 (2007).
  25. Haugen, G., Kiserud, T., Godfrey, K., Crozier, S., Hanson, M. Portal and umbilical venous blood supply to the liver in the human fetus near term. Ultrasound Obstet Gynecol. 24 (6), 599-605 (2004).
  26. Acharya, G., et al. Experimental validation of uterine artery volume blood flow measurement by Doppler ultrasonography in pregnant sheep. Ultrasound Obstet Gynecol. 29 (4), 401-406 (2007).
  27. Wu, X., et al. Glutamate-glutamine cycle and exchange in the placenta-fetus unit during late pregnancy. Amino Acids. 47 (1), 45-53 (2015).
  28. Tuckey, R. C. Progesterone synthesis by the human placenta. Placenta. 26 (4), 273-281 (2005).
  29. Simmons, M. A., Meschia, G., Makowski, E. L., Battaglia, F. C. Fetal metabolic response to maternal starvation. Pediatr Res. 8 (10), 830-836 (1974).
  30. Simmons, M. A., Jones, M. D., Battaglia, F. C., Meschia, G. Insulin effect on fetal glucose utilization. Pediatr Res. 12 (2), 90-92 (1978).
  31. Bujold, E., et al. Evidence supporting that the excess of the sVEGFR-1 concentration in maternal plasma in preeclampsia has a uterine origin. J Matern Fetal Neonatal Med. 18 (1), 9-16 (2005).
  32. Jansson, T., Aye, I. L., Goberdhan, D. C. The emerging role of mTORC1 signaling in placental nutrient-sensing. Placenta. 33, Suppl 2 23-29 (2012).
  33. Cetin, I. Placental transport of amino acids in normal and growth-restricted pregnancies. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 110, Suppl 1 50-54 (2003).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Tags

Bemonstering van vier vatenbloedstroommetingnavelveneuterusarteriekeizersnedeweefselverzamelingplacentaire overdrachtfoetale opnamematerne circulatie
De 4-vaartuig Steekproef Aanpak bij Integratieve Studies van Menselijke Placentale Fysiologie
Neem contact met ons op
Aanbevelen aan de bibliotheek

Privacy

Gebruiksvoorwaarden

Beleidsoverzicht

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Alle rechten voorbehouden.