Hier presenteren we een combinatie van laser Doppler perfusie imaging (LDPI) en lokale bloed stromen en zuurstof verzadiging (SO2), evenals een gestandaardiseerde procedure voor de invoering van ruggenmerg laser Doppler perfusie toezicht (LDPM) voor het meten van spinal cord trauma's op rat.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Met behulp van Laser Doppler Imaging en toezicht voor het analyseren van ruggenmerg microcirculatie in Rat
* These authors contributed equally
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Laser Doppler flowmetrie (LDF) is een noninvasive methode voor het meten van bloed stroom (BF), waardoor het beter voor het meten van microcirculatory veranderingen van het ruggenmerg. In dit artikel was ons doel om het gebruik van zowel Laser Doppler Beeldvorming en toezicht voor het analyseren van de verandering van BF na dwarslaesie. Zowel de laser Doppler-imagescanner en de sonde/monitor wordt voor elke uitlezing werkten. De gegevens van LDPI verstrekt een lokale distributie van BF, die gaf een overzicht van perfusie rond de site van de schade en het toegankelijk voor vergelijkende analyse van BF onder verschillende locaties gemaakt. Door intens de indringende oppervlakte te meten over een periode van tijd, werd een gecombineerde sonde gebruikt om tegelijk meten de BF en zuurstof saturatie van het ruggenmerg, tonen algemene ruggenmerg perfusie en zuurstoftoevoer. LDF zelf heeft een aantal beperkingen, zoals de relatieve flux, gevoeligheid voor beweging en biologische nul signaal. Echter, de technologie is toegepast in de klinische en experimentele studie vanwege de eenvoudige installatie en snelle meting van BF.
Inleiding
Het weefsel van het ruggenmerg is zeer gevacuoliseerd en zeer gevoelig aan hypoxie geïnduceerd door dwarslaesie (SCI). Onze eerdere studies is gebleken dat de doorbloeding van het ruggenmerg aanzienlijk werd verlaagd na hersenschudding schade1,2, die kunnen worden gerelateerd aan het tekort aan motor functie. Recente studies hebben aangetoond dat de integriteit van bloedvaten na SCI goed gecorreleerd zijn met de verbetering van de sensorische motorische functie3 is. Er werd gemeld dat verbeterde vasculariteit witte stof, niet indirect leidt tot verbeterde functie4
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Dierlijke protocollen waarbij proefdieren gevolgd door de National Institutes of Health (NIH) vastgestelde richtsnoeren en door de Animal Care en gebruik Comité van kapitaal medische universiteit zijn goedgekeurd.
De procedures van de invoering van SCI en meten van BF van het ruggenmerg met behulp van laser Doppler apparatuur hieronder beschreven werden gebruikt in een gepubliceerde studie1.
1. voorbereiding voor de operatie
- Bereiden pentobarbital natrium oplossing 3% (m/v) in een zoutoplossing en beheren op de dosis van 35 mg/kg.
Let op: pentobarbital natrium is een geregulee....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
LDPI werd gebruikt voor het meten van BF in het ruggenmerg, die langs de rostraal-caudal as van het ruggenmerg werd gekwantificeerd door de winning van lineaire profielen (Figuur 4). Figuur 5A en 5B van de figuur vertegenwoordigen de flux beeldvorming van het ruggenmerg van de sham-Fractie en SCI groep, respectievelijk. Figuur 5C en figuur 5D
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Een paar details moeten opgemerkt worden bij het uitvoeren van dit protocol. Ten eerste, het proces van anesthesie en chirurgie moet worden uitgevoerd zo snel en elegant mogelijk om te minimaliseren van de geïntroduceerde stress bij het dier. Verklein de verstoring van de resultaten en het dier in een relatief rustige en stabiele staat te houden. Ten tweede moet meer aandacht uitgaan naar het bloeden tijdens de meting met behulp van laser Doppler apparatuur omdat bloed potentieel met de lezing interfereren kon. Tot slot,.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
De auteurs hebben geen bevestigingen.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Laser Doppler Line Scanner | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
| Laser Doppler Monitor | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
| Probe voor Monitor | Moor Instruments | VP3 | Blunt needle end delivery probe |
| Impactor | Precision Systems and Instrumentation | IH-0400 | |
| Phenobarbital natrium | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Buprenorfine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| Spuit | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd | 300841 | |
| Chirurgische hechtnaalden met draad | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (batchnummer) /4-0 | |
| Schaar | Operatie-instrumentenfabriek van Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4# | |
| Mesjes voor schaar | Operatie-instrumentenfabriek van Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20# | |
| Oogheelkundige pincetten | Operatie-instrumentenfabriek van Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
| Hemostatische pincetten | Operatie-instrumentenfabriek van Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
| Benzylpenicilline natrium | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (batchnummer) | |
| 75% alcohol | Dezhou Anjie Gaoke desinfectieproducten Co., Ltd | 150421R (batchnummer) | |
| Jodium | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (batchnummer) | |
| Raad | Laboratoriumdiercentrum, The Academy of Millitery Medical Sciences | Sprague-Dawly (rattenstam) |
Referenties
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
- Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
