Technieken voor het onderzoek naar de anatomie van het visuele systeem van Ant

Summary

Dit artikel beschrijft een reeks van technieken in licht- en elektronenmicroscopie te bestuderen van de interne en externe oog anatomie van insecten. Het gaat hierbij om verschillende traditionele technieken geoptimaliseerd voor werk op mier ogen, gedetailleerde probleemoplossing, en suggesties voor optimalisatie voor verschillende exemplaren en regio's van belang.

Abstract

Dit artikel schetst een suite van technieken in (LM) de lichte microscopie en elektronenmicroscopie (EM) die kan worden gebruikt voor de studie van de anatomie van de interne en externe oog van insecten. Het gaat hierbij om traditionele histologische technieken geoptimaliseerd voor werk op mier ogen en aangepast om te werken in concert met andere technieken zoals Transmissie Electronenmicroscopie (TEM) en scanning elektronen microscopie (SEM). Deze technieken, kunnen hoewel enorm nuttig, moeilijk zijn voor de beginnende microscopist, zodat grote nadruk in dit artikel over probleemoplossing en optimalisatie voor verschillende exemplaren. Wij verstrekken informatie over imaging technieken voor het hele model (foto-microscopie en SEM) en bespreken hun voor- en nadelen. We markeren de techniek die gebruikt wordt bij het bepalen van de diameter van de lens voor het hele oog en bespreken van nieuwe technieken voor verbetering. Tot slot bespreken we technieken die betrokken zijn bij de voorbereiding van monsters voor LM- en TEM, afdelen, kleuring en imaging van deze monsters. We bespreken de horden die één zouden kunnen komen over als voorbereiding van monsters en de beste manier om te navigeren naar hen.

Introduction

Visie is een belangrijke sensorische modaliteit voor de meeste dieren. Visie is vooral belangrijk in het kader van navigatie voor het aanwijzen van doelstellingen, vaststelling van vast te houden aan routes en verkrijgen van kompas informatie^1,2. Insecten detecteren visuele informatie met behulp van een paar samengestelde ogen en, in sommige gevallen één tot drie dorsally geplaatste eenvoudige ogen genoemd ocelli^3,4,5.

De ogen van mieren zijn van bijzonder belang omdat, terwijl de mieren zi....

Protocol

1. model voorbereiding

Opmerking: Het is noodzakelijk om te begrijpen eerst de relatieve locatie van de samengestelde ogen en ocelli aan elkaar en op het hoofd. Dit kan worden bereikt door de verwerving van de beelden van de dorsale weergave van het hoofd. Hiervoor raden we verwerking monsters voor photomicrography of met behulp van SEM technieken. Hieronder zijn de stappen betrokken bij beide processen.

1. Monster collectie
   1. Verzamelen en opslaan van specimens rechtstreeks in 70% ethanol. Verzamel verschillende kasten waar mogelijk.
   2. Exemplaren met de tijd, datum, label en plaats en eventuele and....

Results

De hier beschreven methoden inschakelen gedetailleerde studie van de eenvoudige en samengestelde ogen van mieren. Beeldvorming van de dorsale weergave van het hoofd met behulp van Z-stack photomicrography technieken kan men krijgen een overzicht van de indeling van het visueel systeem (Figuur 1). Dit is een goede voorbereiding voor ontledingen en om te bepalen van de vereiste vectorafbeeldingsbestanden hoek. Deze techniek is ook handig voor metingen zoals oce.......

Discussion

De suite van bovengenoemde methoden, is voorzien van een daadwerkelijk onderzoek naar het optische systeem van mieren en andere insecten. Deze technieken informeren ons begrip van de sampling-resolutie, optische gevoeligheid en potentiële polarisatie gevoeligheid van het oog wordt onderzocht. Deze kennis is een belangrijke basis voor fysiologische en gedragsmatige onderzoek naar hun visuele mogelijkheden. Bovendien, terwijl de hier gedetailleerde methoden hebben gericht op mier visuele systemen, deze technieken kunnen wo.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ant	Myrmecia midas
Stereomicroscope	Leica M205 FA
Sputter coater	Pro Sci Tech
Ethanol	Sigma Aldrich
Petri dish	ProSciTech
Dissecting microscope	Leica MZ6
Insect Pin	ProSciTech
Colourless nail polish	Non branded: from any cosmetic store
Glass slide	ProSciTech
Razor blade	ProSciTech
Foreceps	ProSciTech
Cover slip	ProSciTech
Compound microscope	Leica DM5000 B
Glutaraldehyde	Sigma Aldrich
Paraformalydehyde	Sigma Aldrich
Potassium Chloride (KCl)	Sigma Aldrich
di-Sodium Hydrogen phosphate (Na2HPO4)	Sigma Aldrich
Potassium di-Hydrogen Phosphate (KH2PO4)	Sigma Aldrich
Sodium Chloride (NaCl)	Sigma Aldrich
Osmium tetroxide	Sigma Aldrich
Acetone	Sigma Aldrich
Araldite Epoxy Resin	Sigma Aldrich
Pasteur pipette	Sigma Aldrich
Toluidie Blue	Sigma Aldrich
Hotplate	Riechert HK120