Systematische beoordeling van welzijn in muizen voor Procedures gebruik van algemene anesthesie

Samenvatting

We ontwikkelden een protocol om te beoordelen van welzijn in muizen tijdens procedures met behulp van de narcose. Een aantal gedrags parameters die aangeeft niveaus van welzijn evenals glucocorticoide metabolieten zijn geanalyseerd. Het protocol kan dienen als een algemene steun voor de schatting van de mate van ernst in een wetenschappelijke, dier-gecentreerde manier.

Samenvatting

Wetenschappelijk onderzoek dient in overeenstemming met de 3R principe (vervanging, vermindering, verfijning) ontwikkeld door Russel en Burch, alternatieven voor dierproeven waar mogelijk te gebruiken. Wanneer er geen alternatief voor dierproeven is, moet het totale aantal proefdieren gebruikt het minimum nodig om waardevolle gegevens te verkrijgen. Bovendien moeten passende verfijning maatregelen worden toegepast om te minimaliseren van pijn, lijden en angst bij de experimentele procedure. De categorieën gebruikt voor het classificeren van de mate van pijn, lijden en ellende zijn teruggevorderd, mild, matig of ernstig (EU richtlijn 2010/63). Als u wilt bepalen welke categorieën van toepassing zijn in individuele gevallen, is het van cruciaal belang om wetenschappelijk verantwoorde gereedschappen te gebruiken.

Het protocol van de goed-being-beoordeling hier gepresenteerd is ontworpen voor procedures waarin narcose wordt gebruikt. Het protocol is gericht op de kooi activiteit, de muis grimas schaal en luxe gedrag zoals gravende en nest bouwen van gedrag als indicatoren van welzijn. Het gebruikt ook de gratis verkennend paradigma voor trait anxiety-gerelateerde gedrag. Fecale corticosterone metabolieten als indicatoren van acute stress worden gemeten in de 24 uur na de verdoving periode.

Het protocol biedt wetenschappelijk solide informatie over het welzijn van muizen na narcose. Vanwege haar eenvoud, kan het protocol gemakkelijk worden aangepast en geïntegreerd in een geplande studie. Hoewel het voorziet niet in een schaal om te classificeren nood in categorieën volgens de Europese richtlijn 2010/63 kan het onderzoekers schatten van de mate van ernst van een procedure met behulp van wetenschappelijk verantwoorde gegevens helpen. Het biedt een manier om het verbeteren van de beoordeling van welzijn in een wetenschappelijke, dier-gecentreerde manier.

Inleiding

EU richtlijn 2010/63¹ bepaalt dat het 3R-principe (vervanging, vermindering, verfijning) ontwikkeld door Russel en Burch² worden toegepast wanneer dierlijke proefneming nodig is. Het uiteindelijke doel van de richtlijn van de EU is geleidelijk alle dierproeven, maar de richtlijn erkent dat, sommige dierproeven nog voorlopig, nodig zijn om onderzoek ter bescherming van de gezondheid van mens en dier. Dus, als een dier experiment niet kan worden vervangen door een alternatieve methode, is alleen het minimum aantal proefdieren worden gebruikt om betrouwbare resultaten te verkrijgen. Bovendien moet de hoeveelheid pijn, leed en nood begeleidende experimentele procedures worden geminimaliseerd met behulp van verfijning van de passende maatregelen. EU richtlijn 2010/63 bepaalt dat de ernst van een procedure prospectief moet worden aangemerkt als niet-invordering, lichte, matige of ernstige¹. Zoals classificatie van de ernst wordt besloten op een case-by-case basis, is het belangrijk dat hulpmiddelen voor wetenschappelijk geluid te schatten van de ernst van een bepaalde procedure.

Score sheets zoals voorgesteld door Morton en Griffith³ zijn een essentieel instrument voor het opsporen van afwijkingen van de normale status, met inbegrip van negatieve gevolgen voor welzijn⁴. Score sheets zijn gebruikt om te bepalen met terugwerkende kracht pijn, lijden, en nood veroorzaakt door een experiment en focus op zichtbare veranderingen in de fysische toestand van het individuele dier (b.v., lichaamsgewicht, bont, gait). Hoewel, bijlage VIII van EU-richtlijn 2010/63 geeft voorbeelden van elke categorie Ernst, onderzoekers nog steeds gebrek aan tools te schatten van de mate van ernst van een bepaalde procedure met behulp van wetenschappelijk gebaseerde gegevens.

Het ontbreken van indicatoren waaruit blijkt negatieve welzijn is niet de enige manier om te bepalen wat de status van het dier; de aanwezigheid van indicatoren wijzen op positieve welzijn is ook belangrijk^5,6,7,8. Bijvoorbeeld, dieren luxe gedrag zoals gravende weergeven en nesten gebouw gedrag alleen wanneer aan al hun essentiële behoeften wordt voldaan. Als welzijn wordt verminderd, zijn luxe gedragingen de eerste^5,7dalen. Protocollen worden gebruikt bij de beoordeling van welzijn dient indicatoren verwijzen naar de fysieke, fysiologische, biochemische en psychologische toestanden van dieren teneinde hun welzijn in een gedetailleerde en uitgebreide wijze⁹.

In het kader van verfijning, werd een protocol ontwikkeld aan deze vereisten voldoen en om te beoordelen van de gevolgen van een procedure waarbij narcose op welzijn van muizen¹⁰. Op hetzelfde moment was het doel om te minimaliseren van eventuele extra stress zodat de eenvoudige integratie van het protocol in een gegeven experiment. Het protocol acht gravende gedrag, het gedrag van de kooi zoals activiteit, voedselinname en nesten en trait anxiety-gerelateerde gedrag. Daarnaast bevat het de muis grimas schaal (MGS), en de niet-invasieve analyse van corticosterone metabolieten in ontlasting. Het protocol is ontworpen om de beoordeling van welzijn in een wetenschappelijke en dier-gecentreerde manier en informatie te verstrekken over welzijn die ondersteuning biedt voor de indeling van de mate van ernst. Naast de score sheets, kan nuttige informatie voor de classificatie van de ernst van een procedure bieden. Als het protocol gemakkelijk is uit te voeren en geen uitgebreide apparatuur vereist, kan het worden geïntegreerd in een lopende experiment zonder te beïnvloeden de resultaten van een studie. Opgemerkt moet worden dat het dier onderzoek: rapportage van In Vivo experimenten (aankomen) richtsnoer¹¹ is in acht moeten worden genomen in alle studies met betrekking tot dierproeven, met als doel verbetering van ontwerp, analyse en rapportage.

Protocol

De studie werd uitgevoerd volgens de richtsnoeren van de German Animal Welfare Act en werd goedgekeurd door de autoriteit van de staat Berlijn ("Landesamt für Gesundheit und Soziales", nummer van de vergunning: G0053/15).

Opmerking: Het hoofddoel van dit protocol was te onderzoeken van het effect van herhaalde verdoving op glucocorticoide metabolieten. Een steekproef-grootte-berekening werd uitgevoerd om te bepalen van het aantal dieren worden gebruikt: n ≥ 2 (s / µ₁- µ₂) ײ × (z_α + z_β)². µ₁- µ₂ is het verschil tussen de populatiegemiddelden welke macht en monster grootte berekeningen worden gedaan (α = 5%, β = 80%); z_α = 1.96 en z_β = 0.84 zijn de quantiles van de standaardnormale verdeling. Figuur 1 illustreert de tijdlijn van dit protocol. Als een parameter van het protocol een verschil met het besturingsniveau bevat, het dier moet nauwlettend worden gevolgd en de parameter opnieuw na een passende termijn moet worden gemeten. Bijvoorbeeld als trait anxiety-gerelateerde gedrag wordt verhoogd, moet dit probleem worden getest weer een week later, om te helpen bij het bepalen van de periode tot volledig herstel. Tijdstippen en perioden zijn gedefinieerd in dit protocol kunnen worden aangepast voor gebruik met andere procedures. Bij het wijzigen van tijdstippen, moeten gewenning perioden worden gehouden zoals beschreven in het protocol. Ter beperking van factoren die van de muizen gedrag kunnen beïnvloeden, moeten onderzoeken waarbij meer manipulatie worden uitgevoerd na tests die niet de normale werking van muizen storen. Figuur 2 geeft een overzicht van alle tests van het protocol met een samenvatting scoren vel. Figuur 3 bevat vereenvoudigde schalen van het leerjaar van welzijn, die een overzicht geven van hoe de testresultaten moet interpreteren.

1. fabriekslawaai muizen aan behandeling door experimentator

1. Kunnen muizen aan koeien aan het dier faciliteit voor ten minste 2 weken nadat zij zijn verkregen van een andere faciliteit of een ander leverancier.
2. Huis muizen in groepen en handhaven onder standaardomstandigheden (kamertemperatuur 22 ± 2 ° C, relatieve vochtigheid 55 ± 10%) op een licht: donker cyclus van 12:12 h.
3. Alle groepen voorzien van een tunnel en katoen nestlets als standaard verrijking, en zorgen voor voedsel en water ad libitum.
4. Alle muizen de tunnel en/of kopje behandeling minstens een week vóór de test¹²koeien.
   Opmerking: Het oppakken van muizen door de staart kan leiden tot stress of angst, die op hun beurt van invloed is op welzijn en heeft ook een invloed op de resultaten van dit protocol¹².

2. voorbereiding van de gedrags test kamer en toestellen

Opmerking: Bieden een logeerkamer voor het testen, ideaal in de buurt van de kamer waar de dieren worden gehouden. Het vervoer van de muizen in hun huis kooien aan het testen kamer ten minste 60 min voordat de procedure wordt gevoerd. Indien mogelijk voeren alle tests van dit protocol in dezelfde testen kamer waar de procedure wordt uitgevoerd.

1. Bereiden een observatie kooi gravende gedrag⁸ te testen en om de foto's voor gebruik in de MGS¹³ (Figuur 4).
   1. Gebruik een glazen doos met een vloeroppervlak van ongeveer 220 × 290 mm en een hoogte van 390 mm.
   2. Betrekking hebben op de vloer van dit vak met ongeveer 0.5 cm van het strooisel.
   3. Strooi een handvol gebruikte beddengoed materiaal van de kooi op de top van het nieuwe beddengoed materiaal om nood veroorzaakt door de nieuwe omgeving.
   4. Dienen als voedsel, het dezelfde soort dat wordt normaal gesproken geleverd als voeding en water.
      Opmerking: als mogelijk, gebruik flessen water, omdat muizen water kommen met strooisel kunnen vullen.
2. Bereiden van een kooi (type III: 420 mm × 260 mm × 150 mm) voor de observatieperiode van 24-h, waarvoor de muizen zijn individueel gehuisvest (Figuur 5).
   Opmerking: Om te minimaliseren van de duur van de individuele huisvesting, verzamelen van gegevens voor nest bouwen van gedrag, kooi activiteit, voedselinname en fecale corticosterone metabolieten (FCM) tijdens deze periode.
   1. Plaats nieuwe strooisel in de kooi (ongeveer 0.5 cm diep) en scatter een handvol gebruikte beddengoed materiaal zonder ontlasting van de kooi op de top van het nieuwe materiaal, teneinde de nood.
   2. Bieden een gestandaardiseerde vierkante katoen nestlet van een bepaald gewicht, als milieu verrijking alleen (Zie tabel van materialen)¹⁴.
      Opmerking: Commerciële nestlets kunnen verschillen in gewicht. Daarom we het gewicht van de nestlet beschreven door diaken bewerkt en 2.0 g gebruikt in plaats van 2.7 g¹⁴.
   3. Monteren van de infrarood sensor op de bovenkant van de kooi, bij het gebruik van een infrarood sensor voor het meten van de kooi activiteit (Zie tabel van materialen).
   4. Zorgen voor voedsel, dezelfde soort die gewoonlijk wordt geleverd als dieet, en water ad libitum.

3. muis grimas schaal

Opmerking: Foto's voor de MGS worden genomen in de kooi van de waarneming op drie tijdstippen: (i) 2 dagen vóór de behandeling aan record basislijn MGS niveaus, (ii) 30 min na de ingreep, en (iii) 150 min na de ingreep. Als welzijn aangetast is, verhogen scores op de MGS. Als verhoogde MGS scores nog steeds na 150 min waargenomen worden, extra foto's te nemen in een later stadium.

1. Het gebruik van een HD-camera voor fotografie.
2. Zachtjes overbrengen van de muis in de kooi van de observatie en laat de muis om de koeien aan de nieuwe omgeving voor ten minste 30 min.
3. Continu nemen over 30-40 foto's voor elke keer dat punt binnen 1-2 min.
4. Alle foto's op de scherpe frontaal of zijdelingse foto's selecteren en teruggooi onscherpe foto's of foto's die aantonen dat muis gezichten vanuit andere perspectieven dan frontaal of zijdelingse weergave sorteren.
5. Selecteer willekeurig één foto van elk punt met tijd, (dat wil zeggen 2 dagen voorafgaand aan de procedure, 30 min na de ingreep en 150 min na de ingreep) voor elke muis.
6. Bijsnijden van de foto's om weer te geven alleen het hoofd van de muis, zodat de lichaamshouding niet zichtbaar^{13 is}.
7. Maak een spreadsheet-bestand met één blad voor elke foto en een tabel met inbegrip van de vijf eenheden van gezicht actie van de MGS aan elk taakblad toevoegen.
   Opmerking: Het bestand bevat zowel basislijn foto's als foto's post procedure.
8. Randomize de volgorde van de bladen.
9. Het bestand op een computerscherm voorleggen met drie onafhankelijke personen, die eerder werden opgeleid om de MGS ontwikkeld door Langford et al. gebruiken en hebben hen score van de facial action-eenheden met behulp van een 3-punt-schaal (0 = niet aanwezig zijn, 1 = matig presenteren, 2 = uiteraard aanwezig).
   Opmerking: Scoren is gebaseerd op de volgende parameters¹³: Orbital aanscherping ("vernauwing van de orbitale ruimte, met een strak gesloten ooglid of een oog-squeeze"); neus Ardennen ("afgerond uitbreiding van huid zichtbaar op de brug van de neus"); Wang Ardennen ("convexe weergave van de Wang spier"); oor positie ("oren uit elkaar trok en terug vanuit hun positie van de basislijn of verticale richels die vorm vanwege tips van oren wordt getrokken terug featuring"); Bakkebaard verandering ("verkeer van snorharen vanaf hun basislijn positie hetzij naar achteren, tegen het gezicht of doorsturen, alsof staande op einde; snorharen kunnen ook klomp samen").
10. Analyseren van scores, als volgt (aangepast uit Langford et al. ¹³).
    1. Alle gezicht actie eenheden voor elke foto voor het genereren van de MGS-score gemiddelde.
       Opmerking: Als één van de units gezicht actie kon niet worden gescoord, gemiddeld de resterende eenheden van gezicht actie.
    2. Het gemiddelde voor de basislijn foto's uit het gemiddelde voor de foto's post procedure voor het verkrijgen van een MGS verschil score voor elke muis aftrekken.
    3. Test voor verschillen in de scores van MGS verschil tussen de personen (niet-parametrische test voor verwante monsters).
       Opmerking: Als er een significant verschil (p < 0,05), bepalen of de scores van alle foto's of alleen de scores van een paar foto's tussen de personen verschillen. Als dit waar is, herhaal het scoren van deze foto's. Anders moeten de personen Herhaal de MGS-opleiding en dan de score van de foto's weer.
    4. Gemiddelde de MGS verschil scores verkregen uit de verschillende scorers voor elke muis, als de resultaten van alle personen niet aanzienlijk verschillen.
    5. Gebruik een niet-parametrische statistische toets te vergelijken de MGS verschil scores gemiddeld tussen de studiegroepen.

4. gravende gedrag^8,15,16

1. Bereiden holen door het plaatsen van 140 ± 2 g voedsel pellets normaal geleverd als dieet in een standaard ondoorzichtig plastic water fles (250 mL, lengte 150 mm, diameter 55 mm, 45 mm-diameter van de hals van de fles)⁸.
   Opmerking: Zoals muizen liever breed buizen, holen met een diameter van 68 mm kunnen worden gebruikt zoals beschreven door diaken¹⁶.
2. Plaats het hol gevuld met voedsel pellets in hun kooi 5 dagen vóór de ingreep voor acclimatisatie.
   Opmerking: De regelmatige verstrekking van voedsel eenheid in de kooi niet geleegd moet worden maar ook gevuld met voedsel pellets, moeten blijven zoals muizen worden gebruikt daartoe.
3. Uitvoeren van de test tweemaal, 2 dagen vóór de ingreep (basislijn); ook de laatste 30 min post procedure uit te voeren.
   1. Laat de muis koeien voor minstens 30 min naar de kooi van de observatie waar de foto's voor de MGS werden genomen.
   2. Plaats de kunststof bidon gevuld met voedsel pellets parallel aan de achterwand van de kooi van de observatie.
   3. Weeg voedsel pellets (g) nog in het hol na 2 uur.
4. Bereken het gewicht van voedsel pellets verwijderd uit het hol door muizen ten opzichte van het oorspronkelijke gewicht (%).

5. 24-h observatieperiode

Opmerking: Muizen zijn individueel, zoals beschreven in 2.2 gehuisvest. (Figuur 5), voor een periode van 24 uur per dag, om te meten van voedsel inname, kooi activiteit, nesten gebouw gedrag en FCM niveaus. De 24u observatie tweemaal plaatsvindt: (i) 2 dagen vóór de ingreep voor basislijn niveaus, (ii) op de dag van de procedure.

1. Inname van voedsel
   1. Weeg de muizen op gezette tijden (bijv 2 dagen vóór de anesthesie, onmiddellijk vóór de anesthesie, 2 dagen na verdoving en wekelijks na verdoving), teneinde eventuele veranderingen in lichaamsgewicht (onderdeel van de scorekaart).
      Opmerking: Lichaamsgewicht is vereist voor het berekenen van de voedselinname per gram lichaamsgewicht. Wateropname kan ook worden gemeten tijdens de observatieperiode van 24 uur. Als de inname van voedsel wordt verminderd, kan welzijn worden aangetast.
   2. Het bepalen van het begingewicht van standaard voedseldieet (gram) waarin de eenheid van het voedsel van de kooi (ongeveer 100 g).
   3. Bepalen het gewicht van standaard voedseldieet aan het einde van de observatieperiode van 24 uur.
   4. Scannen van de kant van de kooi onder de eenheid voeding zorgvuldig voor morsen van voedsel en extra voedsel pellets gevonden aan het gewicht van voedsel pellets blijven in de eenheid voeding toe te voegen.
   5. Voedselopname per gewichtseenheid lichaam te berekenen.
2. Kooi activiteit
   Opmerking: De volgende instructies verwijzen naar het gebruik van een infrarood sensor (Zie tabel van materialen), maar de activiteit van de kooi ook met alternatieve programma's kan worden beoordeeld. Afwijking van kooi activiteit van controle niveaus (bijvoorbeeld hypoactivity, hyperactiviteit) kunnen een teken van verminderd welzijn.
   1. Start het programma.
   2. Kies een controle-interval van 1 min en een Acquisitietijd van 24 h, wat betekent dat impulsen per minuut gedurende 24 uur worden opgenomen.
      Opmerking: Als de experimentator de kamer meerdere keren binnenkomt na opname gestart, gebruik uitsluitend gegevens uit perioden, wanneer muizen niet gestoord waren (dat wil zeggen tijdens de donkere periode).
   3. 10-min intervallen van impulsen samenvatten.
   4. Bereken de oppervlakte onder de kromme van de tijd (impulsen × min).
3. Nest gebouw gedrag
   Opmerking: Complexe en hoge nesten kunnen dienen als een indicator van welzijn.
   1. Plaats een vierkante katoen nestlet (Zie Tabel van materialen) met een bepaald gewicht (bijvoorbeeld 2.0 g) in het midden van de kooi.
   2. Score van het nest op een 5-punts schaal (zie hieronder) volgens diaken¹⁴ de volgende ochtend ongeveer 2 uur nadat het lampje op. Weeg alle untorn nestlet stukken die ten minste 5% van het gewicht van de eerste nestlet. Score van de nesten als volgt¹⁴
      1. Toewijzen score van '1' als 90% van de nestlet intact.
      2. Score van "2" toewijzen als er 50-90% intact.
      3. Toewijzen "3" score als 50-90% van de nestlet is versnipperd.
      4. Toewijzen "4" score als meer dan 90% is versnipperd maar nest plat is, en minder dan 50% van de omtrek hoger dan de muis lichaamslengte is wanneer opgerold.
      5. Toewijzen "5" score als meer dan 90% nestlet is versnipperd en nest is hoog, en meer dan 50% van de omtrek is hoger dan de lichaamslengte van een gekrulde van muis.
4. Fecale Corticosterone metabolieten
   Opmerking: Verhogingen van FCM boven het besturingsniveau weerspiegelen acute stress niveaus in de postanesthetic periode van 24 uur.
   1. Verzamelen van alle droge fecale pellets uit de kooi met behulp van Tang aan het einde van de observatieperiode van 24 uur en elimineren van natte pellets besmet met urine.
   2. FCM volgens Palme et al. uitpakken ¹⁷, als volgt.
      1. Droge fecale monsters bij een temperatuur van 60-70 ° C.
      2. Meng fecale monsters met behulp van een mortier.
      3. Schud een aliquoot deel van 0,05 g met 1 mL 80% methanol in een centrifugebuis gedurende 30 minuten op een multi vortex.
      4. Centrifugeer steekproeven bij 2500 x g gedurende 15 minuten.
      5. Pipetteer 0,5 mL van het supernatans dat in een centrifugebuis.
      6. Opslaan van fecale monsters (en uittreksels) ten minste-18 ° C.
      7. Analyseren met behulp van een 5α-pregnane-3b,11b,21-triol-20-one enzym immunoassay (EIA)^18,19 of een ander volledig gevalideerde EIA FCM.
   3. Bereken de procentuele verandering van FCM concentraties ten opzichte van de basislijn FCM concentraties.

6. gratis verkennend paradigma

1. Neem de kooi uit het rek en plaats het op het oppervlak van een tabel aan het einde van de observatieperiode van 24 uur.
2. Plaats een gerasterde kooi top (zonder voedsel of water flessen) in de kooi op een hoek van 45° met de langste zijde van de kooi.
   Opmerking: Niet doen vernietigen het nest, die als een schuilplaats voor de muis fungeert, maar de bovenkant van de kooi boven het nest diagonaal te plaatsen.
3. Monitor of video-record de muizen gedurende 10 minuten op een afstand van circa 1,5 m.
   1. De timer te starten.
   2. Opmerking alle momenten waarop de muis klimt op de bovenkant van de kooi (met alle vier poten op de bovenkant van de kooi) of de bovenkant van de kooi laat (met één of meer poten op de vloer van de kooi).
      Opmerking: Sommige muizen kunnen klimmen op de bovenkant van de kooi en laat het om te wandelen langs de rand van de kooi. Sommige muizen ook achter op de bovenkant van de kooi. Behandel deze gevallen alsof de muizen nog op de bovenkant van de kooi.
4. Evalueren van de parameters na Bert et al. ²⁰.
   1. Analyseren van latentie aan de eerste verkenning (in seconden).
   2. Aantal verkenningen te analyseren.
   3. Analyseren van totale duur (seconden) van exploratie.
      Opmerking: Een hoge latency eerste exploratie, een laag aantal verkenningen en een lage totale duur van exploratie kunt hogere trait-angst niveaus aangeven.

Resultaten

Dit protocol werd oorspronkelijk ontwikkeld voor de beoordeling van welzijn van C57BL/6JRj muizen na een interne ervaring van Isofluraan anesthesie (één 45-min verdoving sessie, n = 13 vrouwtjes) of herhaalde Isofluraan anesthesie (zes 45-min verdoving sessies met 3-4 dagen tussen de sessies van de verdoving, n = 13 vrouwtjes) vergeleken met het welzijn van controle muizen (n = 6 vrouwtjes)¹⁰, die ontvangen geen narcose maar werden getest volgens dezelfde maatregel...

Discussie

Het protocol werd oorspronkelijk ontwikkeld voor de beoordeling van welzijn van C57BL/6JRj muizen die een één verdoving of herhaalde Isofluraan anesthesie ontvangen. De resultaten bevestigen dat tests van luxe gedrag, evenals andere maatregelen (bijvoorbeeld de gratis verkennend paradigma, de MGS, gravende voedselinname) waren gevoelige methoden voor de beoordeling van welzijn. Herhaalde Isofluraan anesthesie veroorzaakt op de korte termijn effecten op trait anxiety-gerelateerde gedrag, MGS en gravende gedrag. B...

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
Isofluran	CP-Pharma Handelsgesellschaft mbH	1214
InfraMot - Sensore Units	TSE Systems	302015-SENS
InfraMot - Control Units	TSE Systems	302015-C/16
InfraMot - Software	TSE Systems	302015-S
Nestlet N	Ancare - Plexx	NES3600
Camera EOS 350D	Canon