Hoge-frequentie echografie beeldvorming van de foetale muis kan imaging resolutie is verbeterd en nauwkeurige niet-invasieve karakterisering van cardiale ontwikkeling en structurele gebreken. Het protocol hierin geschetst is ontworpen om uit te voeren real-time foetale muizen echocardiografie in vivo.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Foetale muis cardiovasculaire Imaging met behulp van een systeem van hoge-frequentie echografie (30 / 45MHZ)
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Aangeboren hartafwijkingen (CHDs) zijn de meest voorkomende oorzaak van morbiditeit van de kindertijd en vroege mortaliteit. Prenatale opsporing van de moleculaire mechanismen van CHDs is van cruciaal belang voor het uitvinden van nieuwe preventieve en therapeutische strategieën. Mutant Muismodellen zijn krachtige instrumenten om nieuwe mechanismen en milieudruk modifiers dat station cardiale ontwikkeling en hun mogelijke wijziging in CHDs te ontdekken. Inspanningen om de causaliteit van deze vermeende leverden geweest is beperkt tot histologische en moleculaire studies in non-survival dierproeven, die toezicht op de essentiële fysiologische en hemodynamische parameters echter vaak afwezig is. Levende imaging technologie is een essentieel instrument om de etiologie van CHDs geworden. In het bijzonder, echografie beeldvorming kan geïnduceerd worden gebruikt zonder operatief bloot de foetussen, waardoor het behoud van hun fysiologie basislijn terwijl de gevolgen van de milieudruk over de hemodynamische en structurele aspecten van cardiale kamer ontwikkeling. Hierin, wij gebruiken het systeem van hoge-frequentie echografie (30/45) te onderzoeken van het cardiovasculaire systeem bij foetale muizen bij E18.5 in utero op de basislijn en in reactie op blootstelling van de prenatale hypoxie. We aantonen de haalbaarheid van het systeem voor het meten van de cardiale kamer grootte, morfologie, ventriculaire functie, foetale hartslag, en navelstreng slagader stroom indexen en hun wijzigingen in de foetale muizen blootgesteld aan systemische chronische hypoxie in utero in echte tijd.
Inleiding
Aangeboren afwijkingen van het hart zijn heterogene structurele gebreken die zich tijdens de vroege ontwikkeling van de cardiale voordoen. Vooruitgang van de huidige operationele procedures die hebben geleid tot aanzienlijke verbeteringen in de overlevingscijfers van zuigelingen met CHDs1,2. Kwaliteit van leven is echter vaak gecompromitteerde secondary met langdurige hospitalisatie en behoeften voor reparatie van chirurgische procedures1,2,3,4,5geë....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De Universiteit van Californië, Los Angeles, Animal Care en gebruik Comité heeft alle procedures weergegeven in dit protocol goedgekeurd. De experimenten werden uitgevoerd als onderdeel van een lopend onderzoek onder actieve dierlijke protocollen die zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité van University of California, Los Angeles, Californië, USA. Dierlijke behandeling en zorg volgden de normen van de gids voor de zorg en het gebruik van proefdieren.
1. voorbereiding van de hoge frequentie echografie Imaging systeem
- Zet de echografie imaging systeem en de fysiologie controle eenheid.
- Sluit ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Statistische analyses van cardiale en hemodynamische indices werden offline uitgevoerd. Het middel 5 opeenvolgende metingen in 3 optimale beelden werden berekend. De gegevens werden uitgedrukt als bedoel ± SEM. Student t-test werd gebruikt voor het afleiden van de interfractiewerkgroep vergelijkingen. Een P -waarde van ≤0.05 werd beschouwd als statistisch significant.
Naar aanleiding van het bovengenoemde proto.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Cardiovasculaire misvormingen en ziekten worden sterk beïnvloed door genetische factoren en milieuelementen19. Wij hebben eerder aangetoond een significant effect van maternale calorie beperking, dat is geïnitieerd tijdens het tweede trimester, op feto-placenta bloedsomloop stroom en foetale hartfunctie9.
Prenatale hypoxie is een andere gemeenschappelijke factor van de stress tijdens de foetale ontwikkeling die enorm de feto-placenta fysiologie e.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
Geen belangenconflict verklaard.
Dankbetuigingen
Wij danken de Dierenfysiologie kern, Afdeling Moleculaire Geneeskunde aan de UCLA voor het verstrekken van technische ondersteuning en open toegang tot het Vevo 2100 echografie biomicroscopy (UBM) systeem. Deze studie werd ondersteund door het hulpprogramma voor het onderzoek van de NIH/kind-gezondheidscentrum (5K12HD034610/K12), de UCLA-Children's Discovery Institute en vandaag en morgen Children's Fund, en David Geffen School of Medicine Research Innovation award naar M. Touma.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Vevo 2100 | VisualSonics, Toronto, Ontario, Canada | N/A | High Freequency Ultrasound Biomicroscopy. De set-up is beschikbaar in de centrale faciliteit voor dierfysiologie, afdeling moleculaire geneeskunde, UCLA. USA |
| inbred mice (c57/BL6) | Charles River Laboratories | N/A | Inbread wild type muisstam |
Referenties
- Touma, M., Reemtsen, B., Halnon, N., Alejos, J., Finn, J. P., Nelson, S. F., Wang, Y. A Path to Implement Precision Child Health Cardiovascular Medicine. Front Cardiovasc Med. 4, 36(2017).
- Triedman, J. K., Newburger, J. W. Trends in Congenital Heart Disease. The Next Decade. Circulati....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
