Cortisol concentratie haaranalyse biedt een alternatief voor traditionele maatregelen van cortisol; echter, om te verzamelen haar monsters van Afro-Amerikanen, wetenschappers moeten cultureel geïnformeerd en bevoegde. Het doel van dit protocol is om aan te tonen van een cultureel geïnformeerd techniek om te verzamelen haar monsters voor cortisol analyse van Afro-Amerikanen.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Verzamelen van haar monsters voor Cortisol haaranalyse in Afro-Amerikanen
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Het hormoon cortisol wordt meestal beoordeeld in speeksel, serum of urine monsters. Meer recentelijk, cortisol is met succes uitgepakt uit haar, inclusief de mens. Het voordeel van haar cortisol concentratie is dat hierin een retrospectieve vertegenwoordiging van hypothalame-hypofyse-bijnier (HPA) as functie na verloop van tijd, heel erg zoals hemoglobine A1C glycemische besturingselement aangeeft. Echter, haar monsters te verkrijgen kan lastig zijn, als gevolg van de culturele overtuigingen en haar zorg praktijken van minderheid deelnemers. Bijvoorbeeld, kunnen Afro-Amerikanen worden aarzelen om monsters te verstrekken. Daarnaast zijn enkele onderzoekers opgeleid om haar monsters verzamelen van Afro-Amerikanen. Het doel van deze paper is te presenteren van een cultureel geïnformeerd protocol om te helpen haar monsters van Afro-Amerikanen krijgen onderzoekers. Ter illustratie van de representatieve resultaten van de uitvoering van dit protocol, worden de geïdentificeerde gegevens van Afro-Amerikanen die aan een gemeenschap gebaseerde studie over chronische stress deelnamen verstrekt. Haar praktijk voorkeuren worden beoordeeld. De deelnemers zijn comfortabele gemaakt door het tonen van foto's van haar monsters voorafgaande aan hun haar knippen. De single twist stam en zachtjes pull-methode wordt gebruikt voor het verzamelen van ongeveer 30-50 onderdelen van haar uit de regio van de posterieure hoekpunt van de hoofdhuid. Dit protocol zal aanzienlijk verbeteren van haar monsters van Afro-Amerikanen.
Inleiding
Het verzamelen van monsters van speeksel, bloed of urine voor cortisol analyse heeft unieke procedurele uitdagingen en deelnemer zwaarder, zoals de procedure moet worden meerdere speeksel monsters, Venapunctie monsters of 24-uurs urine verzameling. Verkrijgen van cortisol van haar monsters is een eenvoudige en aanvaardbaar alternatief voor het gebruik van speeksel, urine of serum monsters1,2. Haar cortisol biedt een retrospectieve weergave van hypothalame-hypofyse-bijnier (HPA) as functie na verloop van tijd. Ongeveer 3 cm van haar verzameld uit de hoofdhuid is gelijk aan het gemiddelde van cortisol release voor het verleden 3 maanden1. Onderzoekers ondervinden echter unieke uitdagingen wanneer u probeert monsters te verzamelen haar over de diverse populaties. Dergelijke uitdagingen zijn religieuze of spirituele overtuigingen inclusief bloot haar (bijvoorbeeldMoslimvrouwen), haar als heilige (Indiaanse groepen), of culturele normen die haar verbinden met normen van schoonheid en zelfbeeld.
In de Afrikaanse Amerikaanse cultuur, met name onder vrouwen, is hoofdhaar een zeer persoonlijke en belangrijke aspect van hun lichaamsbeeld3,4. Verdere, historische ervaringen (bijvoorbeeld, de experimenten Tuskegee) blijven bevorderen van wantrouwen in het onderzoek proces5. Sommige Afro-Amerikaanse folklore en culturele overtuigingen suggereren ook dat het haar monster kan worden gebruikt in rituelen die schade6,7 veroorzaken kunnen. Onderzoekers moeten zich bewust zijn van potentiële uitdagingen waarmee zij kunnen worden geconfronteerd in studies als Afro-Amerikaanse deelnemers wordt gevraagd om haar monsters.
Naast problemen rondom lichaamsbeeld, kunnen de specifieke technieken voor het verzamelen en verwerken van haar monsters van Afro-Amerikanen afwijken van die van Europese Amerikanen6,7. Bijvoorbeeld, Afro-Amerikanen kunnen hebben rechte, dunne, krullend, kinky, grof, of een combinatie van deze haartypes, elk vereisen verschillende technieken te verzamelen en te beveiligen adequaat haar monsters voor verwerking. Recente studies over monsters van Afro-Amerikaanse tieners8, evenals de multi-etnische monsters9, bleek dat de collectie van haar voor cortisol niveau meting aanvaardbaar onder Afrikaanse Amerikaanse deelnemers was. Op dit moment, er zijn geen visuele opleiding procedures ontworpen om onderzoekers te voorzien van de vaardigheden en culturele kennis haar monsters in Afro-Amerikanen te verzamelen. Het doel van deze paper is te presenteren van een cultureel geïnformeerd protocol zodat onderzoekers voldoende haar monsters van Afro-Amerikaanse deelnemers krijgen. Deze methode werd ontwikkeld met de zorgvuldige afweging van lichamelijke, psychosociale en culturele kenmerken relevant voor haar monsters uit Afrikaanse Amerikaanse volwassenen. Tot op heden zijn er geen visuele methoden voor het verzamelen van deze monsters zal, en dit protocol de eerste gids die details juiste haar sample collectie van Afro-Amerikaanse volwassenen. Ter illustratie van de representatieve resultaten van de implementatie van het protocol, worden de geïdentificeerde gegevens gepresenteerd van Afro-Amerikanen die deelnamen aan een gemeenschap gebaseerde studie over chronische stress die 65 jaar boven waren. Zowel mannelijke en vrouwelijke onderzoeksmedewerkers uit een verscheidenheid van raciale achtergrond gecontacteerd potentiële deelnemers uit een lijst van de kliniek gegenereerd en flyers. De primaire proefnemer een Afro-Amerikaanse vrouw, sprak op wijkcentra en senior gesubsidieerde huisvesting appartementen aan oudere volwassen Afrikaanse Amerikanen over de studie is, met inbegrip van een beschrijving van de methoden van haar collectie.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De studie is goedgekeurd door de Universiteit ziekenhuizen Cleveland Medical Center institutionele Review Board, en het protocol volgt de richtsnoeren van de deelnemer bescherming en gegevens veiligheid zoals aangegeven door de Commissie ter beoordeling.
1. Prepareer deelnemer haar monster en haar Sample collectie vragen
- Leggen deelnemer dat het haar monster verzameld minder haren dan dat normaal gesproken verloren gaat in het borstelen elke dag vanaf de achterkant van het hoofd (posterieure vertex). De deelnemer vertellen dat de site voor het monster van haar is verborgen door het omringende haren en dus niet zichtbaar na het verzamelen is. Informeren van de deelnemer dat het monster worden gebruikt voor het meten van een hormoon genaamd cortisol aanwezig in de haren10,11.
- Neem uit de steekproef foto en Toon van de deelnemer de hoeveelheid haar dat zal worden verzameld (30-50 strengen).
Opmerking: Zie afbeelding 1 voor foto van een steekproef van haar. - Vraag de deelnemer de hair care praktijk12 vragen vermeld in tabel 1.
2. het verzamelen van het monster van haar
- Vertellen de deelnemer dat de steekproef wordt verzameld in een privéruimte achter een draagbare partitie, gordijn of een gesloten deur. Verzekeren deelnemers dat, als zij een pruik of haarstukje dragen, hun haren niet wordt gesneden in een gebied waar anderen kunnen zien. Meten van haarlengte van de hoofdhuid tot slot het haar zachtjes te trekken en strak.
- Als het haar is kort (minder dan 3 cm), gaat u als volgt het korte haar protocol in stap 3 (hoewel als het haar minder dan 1 cm lang is, het monster kan niet worden verzameld en, idealiter, het haar ten minste 3 cm lang moet). Volg voor haar langer dan 6 cm, het protocol van de lange haren in stap 4. Anders verder met de volgende stap.
- Ervoor zorgen dat de materialen klaar zijn door het plaatsen van de haren knippen leveringen (een vel aluminiumfolie, zakelijke envelop, salon rang schaar, grote en kleine tand afscheid kam, alcohol preps, schilders tape, permanente marker, latexvrije handschoenen [optional] en haar clips)10 op een ondergrond naast de deelnemer. De schaar schoon en kam met de alcohol prep pad vóór het verzamelen van het monster. Knip een 8 x 10" vel aluminiumfolie te gebruiken voor het monster.
- Zet op latexvrije handschoenen. Neem de kam en deel van het haar horizontaal langs de posterieure hoekpunt van de hoofdhuid tussen de toppen van de oren.
- Neem een clip en het haar vanaf de bovenkant van het gedeelte verplaatsen, dan een andere clip plaatsen aan de onderkant bloot een rechthoek 5 x 10 cm tussen de twee clips van losse haren (ongeveer de grootte van een dek van speelkaarten).
- Vraag de deelnemer als ze liever gebruik van een breed tand of smalle kam door de rechthoek 2-3" van haar. Vraag de deelnemer hoe hij of zij zou willen hebben de resterende haren in de kam weggegooid. Het haar in de kam te geven aan de deelnemer, of, als (en alleen als) de deelnemer verklaart dat it's okay to negeren van de losse haren, verwijderen van de resterende haren uit de kam in een vuilnisbak.
- Pak van ongeveer 30-50 strengen van het haar aan de rechterkant van de rechthoek 2-3" en trek voorzichtig aan en draai het haar uit de buurt van de hoofdhuid in een rollende beweging tussen de vingers.
- Zorg ervoor dat het monster zo dicht bij de hoofdhuid mogelijk doen, maar niet knippen de hoofdhuid wordt verzameld. Gebruik van salon-grade schaar en maak een schoon recht afgesneden.
- Pak het haar monster en zorgen dat het einde van de wortel wordt uitgelijnd tussen zorgvuldig de cut.
- Het haar aan het vel aluminiumfolie koppelen door taping met tape schilder. Hebben geen betrekking op het einde van de hoofdhuid, en gebruik geen schilder tape op haar dat is korter dan of gelijk 3 cm. plaats de losse haren in het midden van de folie gesneden en vouw in een vierkant, ervoor te zorgen dat het haar niet uit de folie valt.
- Neem de markeerdraad en label van het einde van de hoofdhuid op de aluminiumfolie. Premade streepjescodering labels gebruiken om te hechten aan de folie en de envelop.
- Vouw het aluminiumfolie zonder vouwen van de haren op de hoofdhuid einde om te voorkomen dat bed hoofd (verfrommeld en gebogen haren), plaatst u deze in de zakelijke formaat envelop en verzegelen.
- De buitenkant van de envelop van een label met unieke studie van de deelnemer id-nummer, datum en de naam van de primaire onderzoeker, of gebruikt u een streepjescode etiket indien beschikbaar.
- Het monster in een droge ruimte bij kamertemperatuur worden opgeslagen.
3. sample collectie voor kort haar (1-3 cm)
- Voer stap 2.3 en 2.4.
- Na de scheiding, vraag de deelnemer te houden het scheidden haar dicht bij de hoofdhuid. Knippen van de haren langs het deel, terwijl het haar strak met wijsvinger en duim10.
- Losse haren plaats in folie en vouw het veilig. Niet tape het haar om de folie.
- Stappen 2.11 via 2.14.
4. sample collectie voor lang haar (langer dan 6 cm)
- Deel van het haar van links naar rechts op het achterste hoekpunt.
- Gebruik de clips van haar te houden terug het extra haar.
- Maak een twist van haar en houd stevig met de wijsvinger en de duim dus niet te laten vallen van de monster10.
- Een schoon recht afgesneden zo dicht bij de hoofdhuid mogelijk maken Verzamelen 30-50 strengen van het haar.
- Indien de deelnemer dun haar is, dan 2-3 kleine gebieden (1 cm uit elkaar) dwars door het posterieure hoekpunt te verbergen van de site van het deelstuk uitmaakt.
- Stappen 2.10 via 2.14.
5. voorbeeld Processing
- De pakketten van de folie met het haar monster bij kamertemperatuur voor onbepaalde tijd tot analyse worden opgeslagen.
Opmerking: Haar cortisol is extreem stabiel in haar en kan worden opgeslagen voor jaren. In feite, heeft cortisol in haar monsters van gemummificeerd blijft11gemeten. - Het analyseren van haar cortisol als eerder gepubliceerde12. Monsters kunnen bij kamertemperatuur 's nachts worden verzonden.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
In onze studie, eenentwintig Afro-Amerikanen (gemiddelde leeftijd = 75; SD = 6,9; 85% wijfje) ingestemd om deel te nemen. Vier deelnemers (19%) weigerde te bieden een steekproef van haar en twee (9,5%) kon niet een monster te verstrekken omdat hun haren te kort was. Een totaal van 15 haar monsters werden verkregen en verwerkt (tabel 2). De lengte van de haren monsters die werden verwerkt varieerde van 1 cm tot 4,8 cm. technische problemen opgenomen monsters waren slecht u...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Essentiële stappen in het haar collectie protocol opnemen mits een voorbeeld van hoe veel haren zullen worden genomen, tonen de voorbeeldsite (posterieure vortex), gebruik van de één stam twist en trek voorzichtig methode, en het veiligstellen van het monster met de schilder tape weg van de einde van de hoofdhuid. Door zachtjes draaien en trekken van het monster, het krullend haar is verlengd en de hoofdhuid einde uitlijning wordt gehandhaafd. Dit vermindert de laboratorium tijd die nodig is om de uiteinden van de hoofdh...
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De gedrags immunologie en endocrinologie laboratorium is aangewezen als een laboratorium of Excellence door Salimetrics, LLC.
Dankbetuigingen
Deze publicatie werd mogelijk gemaakt door de klinisch en translationeel wetenschap Collaborative van Cleveland; KL2TR000440 van het National Center for Advancing translationeel Wetenschappen (NCATS) onderdeel van de National Institutes of Health; en NIH routekaart voor medisch onderzoek. Dr. Jodi Fords werk op dit gebied wordt gefinancierd door de nationale instituten van gezondheid National Institute on Drug Abuse (1R21DA034960) en de Ohio Universiteit Staatsinstituut voor bevolking onderzoek zaad verlenen financiering van het National Institute of Child Health en Ontwikkeling (2P2CHD058484). De inhoud is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijk de officiële standpunten van de National Institutes of Health. Dr. Laudenslager van werk op dit gebied wordt gefinancierd door een contract van de Patient-Centered resultaten Research Institute (CE-1304-6208), een subsidie van de overheid voor kinderen en gezinnen (90 YR 0058) en een subsidie van het ontwikkelings Psychobiologie Onderzoeksgroep Endowment Fund van de afdeling Psychiatrie, Universiteit van Colorado Denver Anschutz medische Campus.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Salon grade scissors | Cricket | S-3 550 | Carded Professional Hair Shear, 5.5 inch |
| Large tooth comb | Goody | Geen catalogusnummer__Goody Stylista Rake Comb | Link naar bedrijfswebsite http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_Stylista_Rake_Comb?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 |
| Small tooth comb | Goody | Geen catalogusnummer_ Goody Start.Style.Finish. Link naar bedrijfswebsite http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Combs?colId=d11c04a1-1dd3-4848-a313-046fc6c109ec&c_id=35a36c88-d359-4104-a53c-dfbfd8452780 | |
| Alcohol preps | Kendall Webcol Alcohol Preps | Geen catalogusnummer. Kendall Webcol Alcohol Preps | https://www.buyemp.com/product/kendall-webcol-alcohol-preps |
| Schilderstape | 3M Scotch | ScotchBlue ORIGINAL Schilderstape | https://www.scotchblue.com/3M/en_US/scotchblue/products/painters-tape/ |
| Permanente stift | Sharpie | Zwarte Sharpie fijne punt | http://www.sharpie.com/sharpie/fine/SHFineBlackFine.html |
| Non-latex handschoenen | Protégé | 93997 | Protege®Nitrile poedervrije onderzoekshandschoenen http://aureliagloves.com/product/protege/ |
| Haarclips | Goody | Goody Start.Style.Finish. Curl Clips | http://www.goody.com/Products/Styling_Tools/Goody_StartStyleFinish_Curl_Clips |
| Envelop | Office Depo | 330808 | Office Depot® Merk gesluierde enveloppen, 9" x 12", Bruin, Doos van 100 |
| Folie vellen | Choice | 1229105 | Doos van 500 vellen Food Service Interfolded Pop-up folie vellen |
| Voorgewogen 2 ml cryovial | Wheaton, Millville, NJ, USA | W985902 | |
| 100% isopropanol | Spectrum | I1275 | 67-63-0 | |
| Vloeibare stikstof | Ohio State Unversity Stores | Gas Cylinder Warehouse | http://osustores.osu.edu/prodservices/liquidnitrogen.aspx |
| Roestvrijstalen kogellager | McMasterCarr | 9291K42 | https://www.mcmaster.com/#standard-stainless-steel-balls/=1acqby0 |
| Speciaal gemalen aluminium cassettes | FisherScientific | Retsch 20.745.0001 | |
| HPLC-kwaliteit methanol | FisherScientific | A452N1-19 | https://www.fishersci.com/shop/products/methanol-hplc-fisher-chemical-6/p-216129 |
| Microcentrifugebuisje | Eppendorf North America | 22363352 | https://online-shop.eppendorf.us/US-en/Laboratory-Consumables-44512/Tubes-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html?_ga=2.36544352.1776616592.1511283212-1254533852.1511283212 |
| Cortisol ELISA Kit | Salimetrics LLC, State College, PA, USA | 1-3002 (5PK 1-3002-5) | https://www.salimetrics.com/assay-kit/cortisol-salivary-elisa-eia-kit |
| Centrifuge voor de microcentrifugebuis | Beckman Coulter | Microfuge 20 serie | http://centrifugebybeckman.com/?page_id=727/?pi_ad_id=creative?utm_term=microfuge |
Referenties
- Sauve, B. K. G., Walsh, G., Tokmakejian, S., Van Uum, S. H. Measurement of cortisol in human hair as a biomarker of systemic exposure. Clin Invest Med. 30 (5), 183-191 (2007).
- Wright, K. D., Hickman, R., Laudenslager, M. L. Hair cortisol analysis: a promising biomarker of HPA activation in older adults. Gerontologist. 55, Suppl 1 140-145 (2015).
- Awad, G. H., et al. Beauty and body image concerns among African American college women. J Black Psychol. 41 (6), 540-564 (2015).
- Capodilupo, C. M., Kim, S. Gender and race matter: the importance of considering intersections in Black women's body image. J Couns Psychol. 61 (1), 37-49 (2014).
- Miracle, V. A. The Belmont Report: the triple crown of research ethics. Dimens Crit Care Nurs. 35 (4), 223-228 (2016).
- Fishman, B. M., Bobo, L., Kosub, K., Womeodu, R. J. Cultural issues in serving minority populations: emphasis on Mexican Americans and African Americans. Am J Med Sci. 306 (3), 160-166 (1993).
- Webb, J. Y. Louisiana voodoo and superstitions related to health. HSMHA Health Rep. 86 (4), 291-301 (1971).
- Ford, J. L., Boch, S. J., McCarthy, D. O. Feasibility of hair collection for cortisol measurement in population research on adolescent health. Nurs Res. 65 (3), 249-255 (2016).
- Wosu, A. C., et al. Hair cortisol in relation to sociodemographic and lifestyle characteristics in a multiethnic US sample. Ann Epidemiol. 25 (2), 90-95 (2015).
- Laudenslager, M. L. Hair collection and shipping instructions. , Available from: http://www.ucdenver.edu/academics/colleges/medicalschool/departments/psychiatry/Research/biel/Pages/Overview.aspx (2016).
- Webb, E., et al. Assessing individual systemic stress through cortisol analysis of archaeological hair. J Archaeolog Sci. 37 (4), 807-812 (2010).
- Russell, E., et al. Toward standardization of hair cortisol measurement: results of the first international interlaboratory round robin. Ther Drug Monit. 37 (1), 71-75 (2015).
- Bosley, R. E., Daveluy, S. A primer to natural hair care practices in black patients. Cutis. 95 (2), 78-80 (2015).
- Loussouarn, G. African hair growth parameters. Brit J Derm. 145 (2), 294-297 (2001).
- Hoffman, M. C., Karban, L. V., Goodteacher, A., Laudenslager, M. L. Chemical processing and shampooing impact cortisol measured in human hair. Clin Invest Med. 37 (4), 252-257 (2014).
- Ramirez, J., Elmofty, M., Castillo, E., DeRouen, M., Shariff-Marco, S., Allen, L., et al. Evaluation of cortisol and telomere length measurements in ethnically diverse women with breast cancer using culturally sensitive methods. J Community Genet. 8, 75-86 (2017).
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
Meer artikelen verkennen
