Hier, we laten zien hoe optische phantoms agarose gebaseerde nabootsen van weefsel worden gemaakt en hoe hun optische eigenschappen worden bepaald met behulp van een conventionele optische systeem met een bolfotometer.
Method Article
* These authors contributed equally
Hier, we laten zien hoe optische phantoms agarose gebaseerde nabootsen van weefsel worden gemaakt en hoe hun optische eigenschappen worden bepaald met behulp van een conventionele optische systeem met een bolfotometer.
Dit protocol wordt beschreven hoe u agarose gebaseerde weefsel nabootsen fantomen en laat zien hoe om te bepalen hun optische eigenschappen met behulp van een conventionele optische systeem met een bolfotometer. Meetinstallaties voor de overname van de diffuse reflectie en de totale doorlatingsfactor spectra worden geconstrueerd met een breedband witte lichtbron, een lichtgeleider, een achromatische lens, een bolfotometer, een monsterhouder, een optische vezel sonde, en een meerkanaals spectrometer. Een acryl schimmel, bestaande uit twee rechthoekige acryl stukken en een U-vormige acryl stuk is gebouwd om te maken een epidermale phantom en een dermale phantom met volbloed. De toepassing van een natrium-dithioniet (Na2S2O4)-oplossing op de dermale phantom in staat stelt de onderzoeker naar deoxygenate hemoglobine in rode bloedcellen in de dermale phantom verspreid. De inverse Monte Carlo simulatie met de diffuse reflectie en de totale doorlatingsfactor spectra gemeten door een spectrometer met een bolfotometer is uitgevoerd om te bepalen van de absorptie coëfficiënt spectrum µeen(λ) en de verminderd verstrooiing coëfficiënt spectrum µs' (λ) van elke laag phantom. Een twee-lagen phantom nabootsen van de diffuse reflectie van menselijke huidweefsel wordt ook aangetoond door het opstapelen van de epidermale phantom op de dermale phantom.
Optische fantomen zijn objecten nabootsen van de optische eigenschappen van biologische weefsels en hebben op grote schaal gebruikt op het gebied van de biomedische optica. Ze zijn zo ontworpen dat de optische eigenschappen, zoals licht verstrooiing en absorptie coëfficiënten, met die van levende menselijke en dierlijke weefsels overeenkomen. Optische phantoms worden meestal gebruikt voor de volgende doeleinden: het lichte transport in biologische weefsels, kalibreren van een nieuw ontwikkelt optisch systeemontwerp, evaluatie van de kwaliteit en de prestaties van bestaande systemen, vergelijken van de prestaties simuleren tussen systemen, en het vermogen van de optische methodes te kwantificeren van de optische eigenschappen1,2,3,4,5te valideren. Daarom, gemakkelijk-aan-get stoffen, een eenvoudige productie-procédé, een hoge reproduceerbaarheid en een optische stabiliteit zijn vereist voor het maken van optische fantomen.
Verschillende soorten optische phantoms met verschillende basismaterialen zoals waterige suspensie6, gelatine gel7, agarose gel8,9,10, polyacrylamidegel11, hars12, 13,14,15,16, en kamer-temperatuur-vulcanizing siliconen17 zijn gemeld in de vorige literatuur. Er werd gemeld dat gelatine en alginaat-gebaseerde gels nuttig voor optische phantoms met heterogene structuren18 zijn. Alginaat phantoms hebben een geschikte mechanische en thermische stabiliteit voor de evaluatie van de effecten van de photothermal zoals laser ablatie studies en hyperthermie laser gebaseerde studies18. Agarose gel hebben de mogelijkheid om het fabriceren van de heterogene structuren en hun mechanische en fysische eigenschappen zijn stabiel voor een lange tijd18. Hoge zuiverheid agarose gel hebben een zeer lage turbiditeit en een zwakke optische absorptie. Daarom zou de optische eigenschappen van agarose gebaseerde phantoms gemakkelijk worden ontworpen met het juiste licht verstrooiing en het absorberen van agenten. Onlangs, styreen-ethyleen-butyleen-styreen (SEBS) blok copolymeren19 en PVC (polyvinylchloride) gels20 hebben gemeld als interessante phantom materialen voor optische en photoacoustic technieken.
Polymeer microsferen7,12,21,22, titanium-oxide poeder1en lipide emulsies23,24,25,26 zoals melk en lipide emulsie zijn gebruikt als gemachtigden van de verstrooiing van licht, terwijl zwarte inkt27,28 en moleculaire kleurstoffen29,30 als lichte absorptieflessen worden gebruikt. Diffuse reflectie spectra van de meeste levende organen worden gedomineerd door de absorptie van zuurstofrijk en gedeoxygeneerd hemoglobine in rode bloedcellen. Daarom hemoglobine oplossingen31,32 en volbloed8,9,10,33,36 worden vaak gebruikt als lichte absorptieflessen in de Phantoms voor een diffuse reflectie spectroscopie en multispectrale beeldbewerking.
De in dit artikel beschreven methode wordt gebruikt voor het maken van een optische phantom nabootsen het licht vervoer in biologische weefsels en te karakteriseren van de optische eigenschappen. Als voorbeeld, een twee-lagen optische phantom nabootsen optische eigenschappen van menselijke huidweefsel wordt aangetoond. De voordelen van deze methode ten opzichte van alternatieve technieken zijn de capaciteit om te vertegenwoordigen diffuse reflectie spectra van levende biologische weefsels in de zichtbaar voor nabij-infrarood golflengte gebied, evenals de eenvoud te maken, met behulp van gemakkelijk beschikbaar materialen en conventionele optische instrumenten. Daarom zullen de optische phantoms gemaakt volgens deze methode nuttig is voor de ontwikkeling van optische methodes op basis van diffuse reflectie spectroscopie en multispectrale beeldvorming.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
1. bouw van een conventionele Diffuse reflectie en totale doorlatingsfactor spectroscopische systeem
Opmerking: Bouw van de meetsystemen voor de diffuse reflectie en de totale doorlatingsfactor spectra met behulp van een breedband witte lichtbron, een lichtgeleider, een achromatische lens, een bolfotometer, een monsterhouder, een optische vezel en een meerkanaals-spectrometer. De rol van de lichtvanger is de spiegelende reflectie om onderdeel te verwijderen uit het spectrum van de reflectie. De monsterhouder van de bolfotometer bestaat uit een montageplaat en een Zwaluwstaart en verende klem vergadering die in het bezit van het monster tegen de poort. De Zwaluwstaart en verende klem vergadering zijn verwijderd uit de monsterhouder en een hand-en-klare kubieke voetstuk van piepschuim is aangesloten op de montageplaat in plaats daarvan. De indelingen van de optische onderdelen, wordt weergegeven in Figuur 1a en 1b, kunnen worden verwezen naar voor de bouw-procedure voor de metingen van het diffuse reflectie en de totale doorlatingsfactor metingen, respectievelijk.
2. voorbereiding van een acryl schimmel
Opmerking: Een acryl schimmel die uit twee rechthoekige acryl stukken en een U-vormige acryl stuk bestaat is gebouwd om te maken een enkelgelaagde gel phantom. Figuur 2 kan worden bedoeld voor deze constructie-procedure.
3. bereiding van basismateriaal
4. voorbereiding van de huid-het nabootsen van optische Phantoms
Opmerking: Een koffie-oplossing wordt gebruikt om na te bootsen het absorptiespectrum van melanine. De koffie oplossing bevat een bruin pigment, melanoidin genaamd. Het absorptiespectrum van melanoidin is gelijkaardig aan die van melanine10gemeld.
5. verwerving van de Diffuse reflectie Spectra
6. verwerving van de totale doorlatingsfactor Spectrum
7. de schatting van de absorptie en licht-verstrooiing eigenschappen
Opmerking: Een set van het spectrum van diffuse reflectie en de totale doorlatingsfactor spectrum is opgeslagen op de harde schijf van een personal computer en off line geanalyseerd. Een inverse Monte Carlo simulatie8,38,39,40 wordt vervolgens uitgevoerd voor het inschatten van de absorptie coëfficiënt spectrum µeen(λ) en de verlaagde verstrooiing coëfficiënt spectrum µs'(λ). In deze inverse Monte Carlo simulatie, de geschatte verstrooiing coëfficiënt µs, in de veronderstelling dat de anisotropie factor g is ingesteld op 0, wordt beschouwd als de verminderde verstrooiing coëfficiënt µs' . Zowel de reflectie en de lichtdoorlatendheid gegevens worden gebruikt voor een enkele simulatie uitvoeren. De gedetailleerde algoritme gebruikt in dit protocol is gemeld in de vorige literatuur8,39. Wij geschat de absorptie coëfficiënt spectrum µeen(λ) en de verlaagde verstrooiing coëfficiënt spectrum µs'(λ) van een epidermale laag uit een set van de diffuse reflectie spectrum en de totale doorlatingsfactor spectrum verkregen van de epidermale laag. Op dezelfde manier, we geschat µeen(λ) en µs'(λ) van een dermaal laag uit een set van het spectrum van diffuse reflectie en het spectrum van de totale doorlatingsfactor verkregen de dermale laag.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Figuur 3 toont de representatieve geschatte spectra van de coëfficiënt verlaagd verstrooiing en de d'absorption acoustique voor de epidermale phantom en de dermale phantom. De resultaten afgebeeld in Figuur 3 worden de gemiddelden van tien metingen van de reflectiecoëfficiënt zowel doorlating spectra. De verminderde verstrooiing coëfficiënt µs' heeft een spectrum van brede verstrooiing, vertonen een h...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
De meest kritische stap in dit protocol is de temperatuurregeling van het basismateriaal. De temperatuur te handhaven het basismateriaal varieerden van 58 tot 60 ° C. Als de temperatuur meer dan 70 ° C is, treedt er een denaturatie van zowel de lipide-emulsie en de volbloed. Dientengevolge, zal de optische eigenschappen van de phantom verslechteren. Als de temperatuur lager dan 40 ° C, het basismateriaal ununiformly gegeleerde zal worden en dus de licht verstrooiing en absorptie-agenten in de phantom ongelijkmatig zullen...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
De auteurs hebben niets te onthullen.
Onderdeel van dit werk werd ondersteund door een Grant-in-Aid voor Scientific Research (C) van de Japanse maatschappij voor de promotie van wetenschap (25350520, 22500401, 15 K 06105) en het US-ARMY ITC-PAC Project voor onderzoek en ontwikkeling (FA5209-15-P-0175, FA5209-16-P-0132).
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 150-W halogeenlamp lichtbron | Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan | LA-150SAE | |
| Lichtgeleider | Hayashi Watch Works Co., Ltd, Tokyo, Japan | LGC1-5L1000 | |
| Integrerende bol | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA | RT-060-SF | |
| Poortadapter | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA | PA-050-SMA-SF | |
| Lichtval | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA | LTRP-100-C | |
| Spectralon wit standaard met 99% diffuse reflectie | Labsphere Incorporated, North Sutton, NH, USA | SRS-99-020 | |
| Optische vezel | Ocean Optics Inc., Dunedin, Florida, USA | P400-2-VIS-NIR | |
| Miniatuur glasvezelspectrometer | Ocean Optics Inc., Dunedin, Florida, USA | USB2000 | |
| Achromatische lens | Chuo Precision Industrial Co.,Ltd, Tokyo, Japan | ACL-50-75M | |
| Intralipid | Fresenius Kabi AB, Uppsala, Sweden | Intralipid 10% | |
| Koffie (Blendy Mocha Blend Regular Coffee) | Ajinomoto AGF, Inc. Tokyo, Japan | Niet beschikbaar | |
| Vol bloed | Nippon Bio-Test Laboratories Inc. Saitama, Japan | 0103-2 | |
| Agarose | Nippon Genetics Co., Ltd, Tokyo, Japan | NE-AG02 | |
| Kookverwarming | TOSHIBA CORPORATION Tokyo, Japan | HP-103K |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission