Voorbereiding, de Procedures en de evaluatie van Platelet-Rich Plasma injectie in de behandeling van artrose van de knie

Samenvatting

Artrose van de knie is vaak te zien in de orthopedische afdeling. We introduceren in detail de gehele knie artrose behandelingsproces met platelet-rich plasma injectie, met inbegrip van voorbereiding, procedures, en de evaluatie.

Samenvatting

Knie artrose (KOA) is één van de meest voorkomende ziekten in de orthopedische afdeling. Bestaande niet-chirurgische behandelingen hebben een beperkt effect op het herstel van kraakbeen en bot regeneratie. Platelet-rich plasma (PRP) is een autologe bioactieve stof die kan repareren letsel van het kraakbeen en bot regeneratie effectief te versnellen. Rapportage van PRP-protocollen van de voorbereiding in klinische studies is echter uiterst inconsistent, met de meerderheid van de studies verstrekken van onvoldoende informatie om het protocol te worden overgenomen. We beschrijven een herhaalbare methode voor te bereiden PRP visueel, de behandeling van KOA met PRP intra-articulaire injectie en methoden voor de evaluatie van de resultaten. PRP opgesteld met behulp van handmatige dubbele centrifugeren. De PRP laag werd gewonnen uit perifeer bloed en gebruikt voor knie gezamenlijke holte injectie. Evaluaties opgenomen evaluaties van trombocyt concentraties en klinische resultaten. Voorbereiding van PRP door handmatige centrifugeren vereist minder apparatuur en minder kostbaar dan plasma filtreren of centrifugeren gebruik van apparatuur. De centrifugeertijd van onze dubbele centrifugeren methode was 6 en 5 minuten voor de respectieve centrifugations op krachten van 800 en 1400 x g, respectievelijk, zodat voor de consistente opstelling van gestandaardiseerd PRP. Echter een handmatige methode is gevoelig voor de exploitant fout en PRP batch voorbereiding is niet beschikbaar. Intra-articulaire injectie van PRP bleek te zijn een effectieve behandeling voor artrose van de knie. De hele behandeling procedure duurde minder dan 30 minuten, de concentratie van de trombocyt van PRP kon worden gestandaardiseerd en behandeling was bewezen effectief wanneer geëvalueerd door follow-up.

Inleiding

Knie artrose (KOA) is een van de vaakst gezien ziekten in de orthopedische afdeling; 30% - 50% van de mensen ouder dan 65 jaar ervaring deze ziekte¹. Op dit moment omvat het conservatieve beheer van KOA vooral orale toediening van niet-steroïdale anti-inflammatoire geneesmiddelen en kraakbeen nutriënten drugs, intra-articulaire injectie van Natrium hyaluronaat en fysiotherapie. Echter, deze methoden kunnen niet stoppen met het proces van knie gezamenlijke degeneratie². Articulair kraakbeen defecten kunnen veroorzaken articulaire oppervlak slijtage, gezamenlijke instabiliteit en metabole veranderingen, die deel van de pathogenese van KOA^{3 uitmaken}. Echter, vanwege de afwezigheid van bloedvaten, zenuwen en lymfoïde weefsel in articulair kraakbeen, herstel na beschadiging is moeilijk. Een effectieve methode voor het herstel van kraakbeen is vooral belangrijk voor de behandeling van KOA. De behandeling van osteoclasia is ook een belangrijke focus in KOA behandeling.

Platelet-rich plasma (PRP) is een autologe bioactieve stof, en de toepassing van PRP op bot en gezamenlijke problemen steeds wordt bestudeerd. De biologische reden voor het klinische gebruik van PRP omvat de gevolgen daarvan voor de lokale levering van groeifactoren en wijziging van de ontstekingsreactie en de positieve effecten op cel proliferatie en differentiatie⁴. Na activering na intra-articulaire injectie, PRP releases van α-submodule via degranulatie en diverse groeifactoren, met inbegrip van de bloedplaatjes afkomstige groei factor, de transformerende groeifactor-β, de insuline-achtige groeifactor, scheidt de epidermale groeifactor, de vasculaire endotheliale groeifactor en de fibroblast groeifactor. Deze bevorderen osteoblast en chondrocyten proliferatie, degeneratie van het kraakbeen remmen, versterking van de stabiliteit van kraakbeen en subchondrale bot, regelen van het gen expressie weefsel remmer van metalloproteinase en het evenwicht van synthese en afbraak van proteoglycans^5,6. Daarom kan PRP kraakbeen schade repareren en versnellen van bot regeneratie.

Het resultaat van PRP injectie wordt beïnvloed door diverse factoren, met inbegrip van de bemonstering site⁷, het soort centrifuge voorbereiding methode⁸en het gebruik van anticoagulantia⁹ en activators¹⁰. Er zijn grofweg 3 types centrifugaal methoden te bereiden PRP. Handmatige centrifugeren, apparatuur gebaseerde centrifugeren of plasma filtratie technieken zijn beschikbaar, hoewel handmatige en apparatuur gebaseerde methoden zijn de meest gebruikte. De handmatige methode vereist dat de minst apparatuur, is het handig, is lage kosten en is eenvoudig uit te voeren (Figuur 1). PRP wordt bereid door de prestaties van handmatige centrifugeren tweemaal. Gemengde perifeer bloed en antistollingsmiddel worden gecentrifugeerd om te scheiden van hemocytes van plasma en bloedplaatjes. Na het verwijderen van de rode bloedcellen op de onderste laag, de bovenstaande vloeistof gecentrifugeerd opnieuw scheiding, onder te verdelen in supernatant bloedplaatjes-armen plasma, middelste PRP en subnatant resterende rode bloedcellen. De middenlaag wordt gebruikt voor knie gezamenlijke holte injectie (als de hoeveelheid onvoldoende is, onderdeel van het supernatant kan worden getrokken). Evaluaties van de methode omvatten evaluaties van trombocyt concentratie en klinische resultaten.

De rapportage van PRP-protocollen van de voorbereiding in klinische studies is zeer inconsistent, en de meerderheid van de studies geven geen voldoende informatie zodat het protocol worden gereproduceerd¹¹. Hier beschrijven we een reproduceerbare methode voor te bereiden PRP en behandeling van KOA met PRP intra-articulaire injectie, met evaluatie van de resultaten. Inclusie criteria waren patiënten met artrose van de knie die arme pijnverlichting voor eenvoudige pijnstillende medicatie (zoals paracetamol) en conservatieve behandeling. Uitsluitingscriteria opgenomen patiënten met veneuze terugkeer of lymfatische drainage stoornis; patiënten met knie gemeenschappelijke infecties; patiënten met een dermatose of infectie in de injectie-gebied; patiënten met koorts; patiënten met coagulant functie abnormaliteit; patiënten met een ernstige hart-en vaatziekten. De hele behandeling procedure duurt minder dan 30 minuten, en de trombocyt concentratie van PRP is bewezen te bereiken een gestandaardiseerde meting. De doeltreffendheid ervan wordt aangetoond door de resultaten te evalueren tijdens nauwgezette follow-up.

Protocol

De beschreven methoden werden goedgekeurd door de ethische commissie van Guangdong General Hospital.

1. Verkrijg PRP door handmatige centrifugeren

1. Voorbereiding van de patiënt in een liggende positie in een steriele laminaire flow operatiekamer met een comfortabele kamer temperatuur en vochtigheid: kamer temperatuur is 22 ° C en kamer vochtigheid is 60%.
2. Gebruik een 1 mL spuit te tekenen van 0,2 mL van heparine natrium (2 mL = 12.500 U), dan Bevochtig een 50 mL spuit.
   Opmerking: 3 mL natriumcitraat is ook typisch voor deze stap ter vervanging van de heparine natrium.
3. Tuig een tourniquet, steriliseren van de elleboog 2 - 3 keer en de vochtige 50 mL-spuit kunt trekken 30 mL van perifeer bloed uit de ader van de elleboog.
4. Voer de eerste centrifugeren.
   1. Verdeel perifeer bloed even in twee 50 mL steriele centrifuge buizen.
   2. Zet twee buizen in horizontale rotoren en vervolgens in de centrifuge, onder aseptische condities.
   3. Centrifugeer gedurende 6 minuten op 800 x g.
   4. Neem de horizontale rotors uit, slijtage steriele handschoenen, en neem centrifuge buizen uit.
   5. Let op de stratifications om ervoor te zorgen dat het perifere bloed is gelaagde in twee lagen.
   6. Gebruik een schone 10 mL spuit om de bovenstaande vloeistof van deze twee centrifuge buizen in een schone centrifugebuis verzamelen.
5. Voer de tweede centrifugeren.
   1. Gebruik een schone 10 mL spuit een equivalente hoeveelheid steriel water of normale zout om in te voegen een andere schone centrifugebuis voor evenwicht. Zet de buizen in de horizontale rotors. Markeren met het supernatant laag vloeistof door zelfklevende gips.
   2. Centrifugeer gedurende 5 minuten bij 1400 x g.
   3. Doe de horizontale rotors uit, en door het observeren van de stratifications dat de vloeistof van de gemarkeerde buis is verdeeld in drie lagen.
   4. Gebruik een 10 mL spuit te trekken 4 mL vloeistof uit het middelste granulaire cellaag (leukocyte-rijk, PRP laag) en de onderste laag van de bovendrijvende substantie. Als de hoeveelheid van de middelste laag voldoende is, alleen trekken 4 mL.
   5. 0.4 mL van de vloeistof in een steriele anticoagulation buis (K₂EDTA, 3,6 mg) voor evaluatie, 3,6 mL vloeistof in de spuit blijft verlaten plaatsen
      Opmerking: Het protocol kan hier worden gepauzeerd.

2. intra-articulaire toediening van PRP

1. Laat de patiënt leugen liggende op de operatietafel en buig de knie tot 90 graden.
2. Ga naar de site van de lekke band op de lagere marge van de patella- en 1 cm van de laterale Patellaire ligament. Gebruik van een viltstift te markeren van de site.
3. Huid sterilisatie uitvoeren op de site van de punctie driemaal met anerdian III, steriele handschoenen, en bedek met een aseptische gat-handdoek.
4. Plaats de injectiespuit parallel aan het tibiale plateau, en voer de punctie onder een hoek van 45 graden. Volledig steek de naald in de huid.
5. De 3.6 mL van PRP uit de spuit te injecteren in de gezamenlijke holte van de knie.
6. Betrekking hebben op de positie van de punctie met steriel gaas en repareren met zelfklevende pleister.
7. Druk uitoefenen op de wond gedurende 10 minuten. Waarnemen voor ernstige bijwerkingen voor 30 minuten.
8. Het beheren van een totaal van drie injecties met maandelijkse intervallen.
   Opmerking: Het protocol kan hier worden gepauzeerd.

3. postoperatieve evaluatie van PRP injectie

1. Evalueren van de concentratie van bloedplaatjes in het Wachtwoordreplicatiebeleid.
   1. Gebruik de 0.4 mL van PRP uit de anticoagulation buis (K₂van EDTA, 3,6 mg).
   2. Analyseer de trombocyt concentratie van het Wachtwoordreplicatiebeleid met behulp van een automatische bloedcel analyzer.
2. Evalueren de postoperatieve uitkomst van het PRP-injectie.
   1. Met een 1 dag vóór elk van de drie behandelingen overleg voeren geduldige follow-up 1 dag na elke behandeling, 3 dagen na elke behandeling, 1 week na elke behandeling, 1 maand na de derde behandeling, 3 maanden na de derde behandeling, en 6 maanden na de derde behandeling.
   2. Gebruik een visuele analoge schaal (VAS), de Western Ontario en McMaster universiteiten osteoartritis-Index (WOMAC), knie samenleving Score (KSS) en Lysholm knie functionele schaal het postoperatieve effect te beoordelen.

Resultaten

Dientengevolge, de bloedplaatjes graaf van het Wachtwoordreplicatiebeleid een standaard concentratie bereikte niveau van 1121 x 10³/µL. We voerde de 15 follow-up onderzoeken beschreven in het protocol op een 55-jarige mannelijke patiënt met vroege KOA. Het was duidelijk dat vroege klinische resultaten bevredigend was na de intra-articulaire toediening van PRP (Figuur 2). Middellange termijn werkzaamheid was echter enigszins minderwaardig. Een sterk...

Discussie

De concentratie van bloedplaatjes in normale menselijk bloed is tussen 150.000/µL en 350.000/µL, en het wordt algemeen aangenomen dat trombocyt concentratie van PRP 1.000.000/µL tot, die is 3 tot 5 keer normale concentraties⁹. Volgens het systeem van de hiërarchie PAW, gaat men ervan uit dat PRP geen duidelijk effect heeft wanneer de trombocyt concentratie minder dan drie keer de normale concentratie, is terwijl PRP een remmende effect heeft wanneer de trombocyt concentratie meer dan zes is de nor...

Materialen

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel

Naam	Bedrijf	Catalogusnummer	Opmerkingen
Centrifuge	Eppendorf	5702
Centrifuge tube	CORNING	430828
Horizontal rotor	Eppendorf	LL080
Anerdian III	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	310173	Desinfecteer de huid
1ml Spuit	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.4*13 RWLB
10ml Spuit	KDL  Medical Equipment Co., LTD	1.2*38 TWSB
50ml Spuit	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.7*32 TWLB
Medische Tourniquet	Changzhou Jinli Latex Products Co., LTD	0087-2011
Eenmalige steriele rubberen chirurgische handschoenen	Shanghai jinxiang Latex Products Co., LTD	17060
Wegwerpspuit	KDL  Medical Equipment Co., LTD	0.55*20 L(II) RWLB
Heparine Natrium Injectie	SPH No.1 Biochemical & Pharmaceutical Co., LTD	1706101	2ml:12500U
Jifro Hand Antiseptische Rinse Free Gel	Shanghai Likang Disinfectant HiTech Co., LTD	311793
Medische katoenen staafje	Foshan Kangzheng Medical Supplies Co., LTD	KZ3-12	Desinfecteer de huid
10ml Normale Saline	Jiangxi Shuangshi Pharmecutical Co., LTD	140211458
Automatische Bloedcel Analyzer	Beckman Coulter	LH-750
Hole-towe			Steriele
Anticoagulatiebuis(Bloedopnamebuisjes, K2E 3.6mg)	Becton, Dickinson and Company	CNL17-COO56	Bewaar op een koele droge plaats binnen 4 tot 25 graden Celsius
Pincet	RWD LIFE SCIENCE	F12006-10
Steriele Gaas	Guangdong Ze Chang Trade Co., LTD	170915
Zelfklevend Pleister	3M Transpore	1527C-0
Huid Marker Pen	Guangzhou Mingjia Medical Device Manufacturing Co., LTD	10110