De roterende oefenen kwantificering (systeemvereisten) kan leiden tot oefening in Drosophila melanogaster via rotatie terwijl gelijktijdig het meten van de hoeveelheid activiteit, uitgevoerd door de dieren. Hier presenteren we een punt-voor-punt protocol detailleren hoe meet je activiteitenniveaus van dieren ervaren rotatie oefening behandelingen met behulp van de REQS.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Meten van oefening niveaus bij Drosophila melanogaster met behulp van de roterende oefening kwantificering (systeemvereisten)
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Drosophila melanogaster is een nieuwe modelorganisme voor studies in de biologie van de oefening. Tot op heden twee belangrijkste oefening systemen, zijn de Power Tower en de tredmolen beschreven. Echter, een methode voor het meten van de hoeveelheid extra dierlijke activiteit geïnduceerd door de oefening behandeling heeft ontbroken. De roterende oefenen kwantificering (systeemvereisten) vult deze behoefte, bieden een zekere mate van dierlijke activiteit voor dieren rotatie oefening ervaren. Dit protocol gebruiken de REQS om te beoordelen van dierlijke activiteit tijdens de rotatie oefening gedetailleerd en illustreert het type gegevens die kunnen worden gegenereerd. We laten hier zien hoe de REQS wordt gebruikt voor het meten van seks - en stam-specifieke verschillen in oefening geïnduceerde activiteit. De REQS kan ook worden gebruikt om te evalueren van het effect van diverse andere experimentele parameters zoals de grootte van de leeftijd, dieet, of bevolking op oefening geïnduceerde activiteit. Daarnaast kan het worden gebruikt om te vergelijken van de werkzaamheid van andere oefening training protocollen. Belangrijker, biedt het de mogelijkheid om te standaardiseren oefening behandelingen tussen stammen, waardoor de onderzoeker om gelijke hoeveelheden van de activiteit tussen groepen indien nodig. Dus de REQS is een opmerkelijke nieuwe bron voor oefening biologen werken met het systeem van Drosophila model en vormt een aanvulling op de bestaande systemen van de oefening.
Inleiding
Onderzoekers hebben onlangs begonnen met de fruitvlieg Drosophila melanogaster oefening biologie studeren. D. melanogaster is een genetische modelsysteem voor meer dan 100 jaar1,2. Echter, Drosophila onderzoek heeft bijgedragen aan niet alleen genetica, maar ook aan een verscheidenheid van andere disciplines waaronder neurobiologie, gedrags biologie en fysiologie3. In 2009, de Power Tower, was de eerste oefening machine voor Drosophila beschreven4. De Power Tower maakt gebruik van de dieren negatief geotaxis reactie. Wanneer verstoord, de Drosop....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
De REQS bestaat uit een Drosophila Activity Monitor-eenheid (, vindt u meer broninformatie Tabel of Materials) gemonteerd op een roterende arm die wordt beheerd door een motor unit (Figuur 1). De activiteitenmonitor bepaalt hoe vaak in een bepaalde periode de array van laserstralen ontrafeling van het midden van de test-buis wordt verstoord. Zie onze eerdere publicatie9voor gedetailleerde tekeningen en een diepgaande karakterisering. Terwijl onze systeem maakt gebruik van de LAM25H-eenheid, kan de REQS worden gewijzigd voor andere Drosophila Activity Monitor eenheden ook.
....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
De uitvoer van een individuele run met de REQS is een gegevenstabel geproduceerd door de software van de DAMSystem308, die zal worden met het label "Monitor1.txt" (voor een voorbeeld Zie aanvullende bestand 1) standaard. Een uittreksel uit een dergelijke tabel wordt weergegeven in tabel 1. Elke kolom bevat de gegevens van een afzonderlijke kwantitatieve analyse buis, terwijl de rijen bevatten de activiteit gemeten in elk tijdsinterval vanaf het begin van .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Als de representatieve resultaten illustreren, is de REQS geschikt voor het nauwkeurig meten van de activiteit uit te oefenen van Drosophila. De REQS is flexibel en staat van onderzoekers om aan te pakken een aantal onderzoeksvragen die betrekking heeft op oefening biologie of oefening interventies. Er zijn twee belangrijke stappen in het protocol om te markeren. Eerste plaats is het essentieel om te testen van de installatie van de REQS om ervoor te zorgen dat de overdracht van de gegevens van de REQS naar de DAMSystem3.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs hebben niets te onthullen.
Dankbetuigingen
Het werk werd gesteund door Award nummer P30DK056336 van het nationale Instituut van Diabetes en spijsvertering en nierziekten door middel van een pilot subsidie uit de voeding en obesitas Research Center van de Universiteit van Alabama in Birmingham te NCR.
....Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Drosophila Activity Monitor | Trikinetics | LAM25H | REQS-onderdeel |
| Telephone Cord Detangler | Uvital | uv20170719 | REQS-onderdeel |
| Vial closures (flugs) | Genesee Scientific | 49-102 | Drosophila-kweekbenodigdheden |
| Vials | Genesee Scientific | 32-120 | Drosophila-kweekbenodigdheden |
| Drosophila culture netting | Carolina Biological Supply | 173090 | Drosophila-kweekbenodigdheden |
| Cornmeal | Pepsico | 43375 | Drosophila-media |
| Molasses | Golden Barrel | BLA-GAL | Drosophila-media |
| Agar | Apex Bioresearch | 66-103 | Drosophila-media |
| Inactive Dry Yeast | Genesee Scientific | 62-106 | Drosophila-media |
| Tegosept | Apex Bioresearch | 20-258 | Drosophila-media |
| Propionic acid | Genesee Scientific | 20-271 | Drosophila-media |
Referenties
- Rieder, L. E., Larschan, E. N. Wisdom from the fly. Trends Genet. 30 (11), 479-481 (2014).
- Ugur, B., Chen, K., Bellen, H. J. Drosophila tools and assays for the study of human diseases. Dis Model Mech. 9 (3), 235-244 (2016).
- Hales, K. G., Korey, C. A., Larracuente, A. M., Roberts, D. M.
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
