Het snijden en drijvende methode voor paraffine-ingebedde weefsel voor het segmenteren

Summary

Hier presenteren we een protocol om paraffine segmenteren. Deze methode combineert snijden en zwevende met behulp van een eenvoudige thermostatische kamer om te voorkomen dat het proces van de overdracht vereist met de conventionele methode. Dientengevolge, waren de efficiëntie en het aantal intact paraffine secties sterk verbeterd.

Abstract

Afdelen van het weefsel van paraffine-ingebedde wordt wijd gebruikt in de histologie en pathologie. Het is echter vervelend. Ter verbetering van deze methode, hebben verschillende commerciële bedrijven bedacht complexe sectie overdracht systemen met behulp van vloeibaar water. Om deze technologie te vereenvoudigen, wij gemaakt een eenvoudige methode om met behulp van zelfgemaakte apparatuur die combineert knippen en drijvende binnen een eenvoudige thermostatische kamer; Daarom voert de secties automatisch het waterbad op het wateroppervlak. De hippocampus van volwassen muis hersenen, volwassen muis nieren, hersenen van muis embryonale en volwassen zebrafish ogen werden gesneden met behulp van zowel conventionele paraffine segmenteren en de onderhavige methode voor vergelijking. Statistische analyse toont aan dat onze verbeterde methode tijd bespaarde en hogere kwaliteit secties geproduceerd. Daarnaast is het gemakkelijk voor junior exploitanten paraffine segmenteren voor een hele specimen in een korte tijd.

Introduction

Morfologische studie is belangrijk in het biologisch onderzoek. Hoewel de nieuwe technologie heeft toegestaan onderzoekers te observeren hun doelstellingen rechtstreeks vanuit het hele weefsel of organismen^1,2,3, snijden het specimen in dunne secties, gevolgd door de kleuring, blijft de primaire methode fornot enige weefsel morfologie maar ook eiwit gericht op direct in het weefsel. De lichte microscopie van gebruikt drie typen secties: paraffine, bevroren, en semithin. Hoewel cryosectioning gemeenschappelijk is voor de bescherming van de antigenicity van het weefsel, en de v....

Protocol

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de Animal Care en gebruik Comité van Nanchang Universiteit.

1. Monteer de apparatuur en sluit de microtoom

1. Het ontwerp van de parameter per de eisen (aanvullende Figuur 1).
2. De parameter naar een plaatselijke fabriek voor de vervaardiging van de acryl planken leggen.
3. Monteren van alle onderdelen in volgorde: chloroform kunt combineren 7 commerciële acryl planken in een tank met een sectie kanaal en water bad (Figuur 1).
   Let op: Chloroform produceert giftige stoffen bijeen....

Results

De verbeterde methode steeg het aantal intact paraffine secties. We testten deze nieuwe methode op volwassen muis hippocampal weefsel, volwassen muis nieren, hersenen embryonale muis en zebrafish ogen. Water werd toegevoegd aan de tank en de temperatuur van het water werd gehandhaafd tussen 38.0 ° C tot 40.0 ° C. Ze waren na een serieel voorbereiding van de weefselmonsters, gesegmenteerd en in vergelijking met conventionele segmenteren. De nieuwe methode voorkwam sectie nederlaag en steeg.......

Discussion

Verbeteren van paraffine sectie morfologie en oplossen van het probleem van tijdverlies tijdens het conventionele paraffine afdelen, we een verbeterde paraffine afdelen methode die snijden en ontplooiing combineert gecreëerd. Deze verbeterde methode is gebaseerd op eenvoudige apparatuur die bestaat uit een sectie kanaal, een bad met water en een kachel met een temperatuur detectieschakeloptie. De sectie lint treedt het waterbad via het kanaal van de sectie en ontvouwt zich automatisch tijdens het snijden. Deze methode ve.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Incubator	Boekel Scientific	133000-2
Ethanol	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid	64-17-5
Xylene	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid	1330-20-7
Paraplast	Leica	39601006
Heated Paraffin Embedding Module	Leica
Commercial acrylic board
Trichloromethane	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid	67-66-3
Tubular electric heating element(12 V 200 W)
Temperature controller(12 V 120 W)	Mingsuo	XH-W3002
Rotary microtome	Leica
Neutral silicone sealant			Link the water channel with the microtome knife holder
Voltage transformer	Dearll	S-250-12
Disposable blade	Accu-Edge	4689
Hematoxylin	Baso Diagnostics Inc.	BA-4025
Eosin	Baso Diagnostics Inc.	BA-4025
Microslide	Sail Brand	7105
Neutral balsam	Sinopharm Chemical Reagent Co.,Lid	10004160
Coverslip	Citoglas	10212424C
Microscope	Carl Zeiss
Hydrochloric acid	Xilong Chemical	7647-01-0
Water bath for paraffin sections	Leica
HistoCore Arcadia C - Cold Plate	Leica
paraffin repellent spray	Thermo Scientific	9990420