Methodenartikel

Bepaling van reproductieve bevoegdheid door te bevestigen van pubertijd begin en uitvoeren van een test van de vruchtbaarheid in muizen en ratten

DOI:

10.3791/58352

⸱

13 oktober 2018

1Department of Animal Science, Michigan State University

In dit artikel

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Veel behandelingen en genetische mutaties van invloed op de timing van seksuele rijpheid en vruchtbaarheid. Dit protocol beschrijft een niet-invasieve methode om te evalueren van de pubertijd begin in muizen en ratten vóór het opzetten van een vruchtbaarheidsonderzoek in seksueel volwassen dieren.

Samenvatting

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Beoordeling van reproductieve vakbekwaamheid is van cruciaal belang voor het begrip van het effect van een behandeling of genetische manipulatie op de reproductieve as, ook wel de hypothalamische-hypofyse-gonadale-as genoemd. De reproductieve as is een belangrijke integrator van input van het milieu en de interne aanpassing van vruchtbaarheid naar gunstige omstandigheden voor de voortplanting. Vóór het aangaan van een vruchtbaarheidsonderzoek in muizen en ratten, seksuele looptijd wordt geëvalueerd als u wilt uitsluiten van de mogelijkheid dat de waargenomen reproductieve fenotypen zijn veroorzaakt door vertraagde of afwezige pubertijd begin. Dit protocol beschrijft een niet-invasieve aanpak om te beoordelen van de pubertijd begin bij mannen door middel van de bepaling van de preputiale scheiding, inzonderheid vrouwen door middel van de vaginale opening en eerste estrus. Na de bevestiging van de voltooiing van de puberteit en de totstandbrenging van seksuele volwassenheid, kan een vruchtbaarheidsonderzoek worden gestart. De procedure beschrijft de optimale fokken voorwaarden voor muizen en ratten, het instellen van een vruchtbaarheidsonderzoek en welke parameters te evalueren en te bepalen of de behandeling of de verwijdering van het gen een effect op de vruchtbaarheid heeft.

Inleiding

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De overgang door de puberteit is te bereiken seksuele volwassenheid en reproductieve bevoegdheid vereist. De pubertijd overgang en het behoud van de vruchtbaarheid in volwassenheid wordt geregeld door de reproductieve as, ook wel genoemd de hypothalamische-hypofyse-gonadale as (Figuur 1). De timing van pubertijd intreden en onderhoud van de vruchtbaarheid wordt strak gereguleerd door zowel interne als ecologische factoren verhogen de kans op overleving van nakomelingen en ouders1,2. Dit protocol biedt een niet-invasieve benadering om te bepalen van de begin van de pubertijd in muizen en ratten te bevestigen seksuele volwassenheid vóór het opzetten van een vruchtbaarheidsonderzoek reproductieve bekwaamheden te beoordelen.

Een vruchtbaarheidsonderzoek in seksueel volwassen dieren wordt uitgevoerd en kan worden gestart nadat de dieren zijn gegaan door de puberteit. Voorafgaand aan het begin van de pubertijd, de reproductieve as is rustig, en de belangrijkste bestuurder van seksuele rijping, gonadotropin - releasing hormone (GnRH), wordt losgelaten op de hypofyse in onvoldoende hoeveelheden tot puberteit (Figuur 1). Begin van de pubertijd is een complex proces dat in verhoogde GnRH release op de mediane eminence resulteert. GnRH bevordert luteïniserend hormoon (LH) en follikelstimulerend hormoon (FSH) afscheiding uit de hypofyse, twee hormonen essentieel voor gonadale rijping en reproductieve functie (Figuur 1)3,4,5 .

Beledigingen aan de reproductieve as leiden tot verminderde vruchtbaarheid en kunnen ook vooraf of vertraging pubertijd begin. Voorwaarden gekend om te beïnvloeden de timing van het begin van de pubertijd en reproductieve bevoegdheid omvatten de blootstelling aan hormoonontregelende chemische stoffen6,7, toegenomen/afgenomen lichaam gewicht1,8, veranderingen in dag lengte2,9 en genetische mutaties10,11,12,13,14,15.

Het begin van de seksuele volwassenheid is een cruciale stap die worden afgerond moet vóór het opzetten van een test van de vruchtbaarheid. De voordelen van het bepalen van de begin van de pubertijd door preputiale scheiding, vaginale opening en eerste estrus, zijn de niet-invasieve kenmerken van deze procedures, zoals zij vereisen geen bloedinzameling of opoffering van de dierlijke16, 17.

Nadat pubertijd begin is vastgesteld, correct instellen van een vruchtbaarheidsonderzoek zal leveren belangrijke informatie over de integriteit van de reproductieve as en meestal heeft het tweede voordeel van het genereren van proefdieren voor verdere studies (verfijning) 18. de vruchtbaarheid studie setup beschreven in dit protocol kan detecteren zowel kleine en grote tekorten in reproductieve competentie in de mannetjes en vrouwtjes. Belangrijkste parameters geëvalueerd omvatten 1) tijd om de eerste nestje, 2) aantal nesten gegenereerd in een bepaald tijdsbestek en 3) nestje grootte. Ten slotte, aanbevelingen voor het type van follow-up studies die kan worden uitgevoerd om te identificeren van de oorzaak van waardevermindering van de vruchtbaarheid zijn opgenomen.

Het beschreven protocol verwijst naar muizen en de representatieve gegevens overeen met werk in transgene muizen. Alle opgenomen protocollen zijn echter even geldig bij ratten.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alle methoden die hier worden beschreven zijn goedgekeurd door de institutionele Animal Care en gebruik Comité van Michigan State University en uitgevoerd in overeenstemming met de gids voor de zorg en het gebruik van proefdieren.

1. bepalen van de begin van de pubertijd

  1. Volg institutionele richtlijnen voor kleding, ten minste, is het noodzakelijk om een schone lab-jas en schone handschoenen te dragen. Altijd behandelen muizen schone handschoenen.
  2. Het werkgebied voor te bereiden door een pad op de tabel te plaatsen.
    1. Plaats een schoon muis kooi top met het raster naar boven zijn gericht op het pad.
    2. Instellen van een schaal in het werkgebied. Plaats een schoon 500-1000 mL-bekerglas over de omvang en de tarra.
    3. Leg een vel naast het werkgebied te registreren lichaamsgewicht en preputiale scheiding, vaginale opening of eerste estrus.
  3. Het identificeren van de muizen voor de studie. Dagelijkse inspecties voor pubertijd begin uitvoeren totdat puberteit is bereikt. Het uitvoeren van de inspectie op hetzelfde moment van de dag tijdens de studie. Begin van de pubertijd kan optreden zo spoedig postnatale dag 11-1219, echter in meest experimentele opstellingen, pubertijd begin toezicht begint bij ~ 22 dagen.
  4. Plaats de muis kooi in het werkgebied (stap 1.2). De kooi open en plaats de deksel, fles water en voedsel houder op de tafel.
  5. Het bepalen van preputiale scheiding in mannelijke muizen.
    1. Houd de muis door de staart en plaats deze op de bovenkant van de kooi schoon muis uit stap 1.2.1. Zachtjes Houd op de staart en laat de muis verkennen van het raster van de bovenkant van de kooi voor ~ 5 s.
    2. Trek voorzichtig aan de staart achteruit; Dit resulteert meestal in het vooruit terwijl het vasthouden aan het raster met zijn voorpoten dier. Aanpak van de andere hand de huid sluit door de hals en oren.
    3. Pak de losse huid tussen de schouders en de nek met de duim en wijsvinger. Het is belangrijk om een goede greep van de huid, zoals het zal voorkomen dat de muis zijn hoofd draaien om te bijten.
    4. Pak de huid op de rug met de overige vingers en houd het door te drukken tegen de hand. Houdt vast, zonder te belemmeren, ademhaling, bloed stroom of schadelijke beenderen, spieren of huid. Draai de hand om de buik van de muis, terwijl de ondersteuning van de rug van de muis in de palm van de hand bloot te stellen.
    5. Met de vrije hand, duw voorzichtig terug de huid rond de penis zonder te forceren. Bij preputiale scheiding, de preputiale huid dia's achteruit bloot de eikel (figuur 2A, pijl toont preputiale scheiding). Het opnemen van de aanwezigheid of afwezigheid van preputiale scheiding.
    6. Weeg de muis voorzichtig door deze te plaatsen in het bekerglas van 500-1000 mL vanaf stap 1.2.2 en het gewicht.
    7. De muis in de kooi huisvesting opnieuw door het bekerglas 0-2 cm te houden over de vloer van de kooi en langzaam tip over het bekerglas waardoor de muis om af te sluiten op zijn eigen. Het bekerglas met water en een mild afwasmiddel schoon en droog het af voordat het terug te keren naar de omvang en de schaal tarreren.
  6. Het bepalen van vaginale opening in vrouwelijke muizen.
    1. Plaats een katoenen bal, bekerglas en een fles steriel water in het werkgebied (stap 1.2). Giet het water in het bekerglas. Humidify van de katoenen bal met het steriel water en plaats deze naast de bovenkant van de kooi uit stap 1.2.1.
    2. Plaats de muis kooi in het werkgebied (stap 1.2) en de muis uit haar kooi overdragen naar de bovenkant van de kooi (stap 1.2.1) houdt het aan de voet van de staart. Voorzichtig terugtrekken van de staart om aan te moedigen een voorwaartse beweging van de muis.
    3. Til de staart en de ondersteuning van de heupen met de vrije vingers. Laat de hindlimbs contact te onderhouden met de bovenkant van de kooi. Als de muis teveel beweegt, houd hem in de hand, zoals beschreven in stappen 1.5.1-1.5.4.
    4. Voorzichtig schoon de vulva met de water bevochtigde katoenen bal uit stap 1.6.1. Gebruik een schone bevochtigde katoenen bal voor elke muis. Bepalen van de vaginale opening, de vulva onderzoeken en bepalen of de vagina volledig geopend is (figuur 2A, vrouwelijke vaginale opening).
    5. Record als vaginale opening heeft plaatsgevonden. Weeg de muis en terug te sturen naar de kooi zoals beschreven in stappen 1.5.6-1.5.7.
  7. Eerste estrus een indicator van de eerste eisprong.
    1. Plaats een bekerglas met steriel water, een gelabelde glasplaatje en een 200 µL Pipetteer met een schone tip in het werkgebied (stap 1.2).
    2. Houd het vrouwtje zoals beschreven in stap 1.6.2-1.6.3. Plaats het uiteinde van de pipet met ~ 50 µL van steriel water bij de vaginale opening.
    3. Spoel zachtjes door de invoering en geabsorbeerd ~ 50 µL van water 2 - 4 keer de cellen van de vaginale muur. Uitstrijkje van de inhoud van het uiteinde van de pipet op een gelabelde Microscoop glasplaatje.
    4. Zorgvuldig observeren de cellulaire morfologie op een helderveld Microscoop met behulp van een 10 X en 20 X doelstelling of laat het uitstrijkje airdry voor ~ 1 h en vervolgens counterstain met een 0,1% methyleenblauwoplossing (ontbonden in ddH2O) (figuur 2B). Als u wilt counterstain, dompel de gedroogde dia in de 0,1% methyleen blauw oplossing voor ~ 30 s. Laat de dia lucht drogen gedurende 1 uur.
    5. Let op de dia's uit stap 1.7.4 op een heldere veld microscoop op 10 X en 20 X. De fase van de oestrische cyclus (figuur 2B)20 vast door het observeren van de morfologie van de cel die het mogelijk maakt om te onderscheiden van de vier verschillende fasen van de oestrische cyclus (figuur 2B).
      Opmerking: Metestrus wordt gekenmerkt door een mengsel van cornified squamous epitheliaale cellen en leukocyten, diestrus door leukocyten, proestrus door een mengsel van leukocyten en genucleëerde epitheliale cellen en estrus door cornified epitheliale cellen (figuur 2B) 20.
    6. Opnemen van het lichaamsgewicht en de muis terug naar haar kooi zoals beschreven in stappen 1.5.6-1.5.7. Vaginale uitstrijkjes worden beëindigd op de dag wanneer de muis zijn eerste estrus (figuur 2B heeft).

2. wenselijk fokken kamer voorwaarden

  1. Zorgen dat de fok kamer een temperatuur van ~ 20-24 heeft ° C, 55 ± 10% vochtigheid, en homogene kamer licht met een intensiteit van ~ 300-400 lux ongeveer 1 m boven de vloer21. Deze lichtintensiteit kan het wenselijk mid cage lichtsterkte van 25-80 lux. Om te testen lichtintensiteit, gebruik van een lichtmeter.
  2. Gebruik van een geautomatiseerd systeem om de verlichting in de kamer fokken om de juiste timing van verlichting gedurende het gehele experiment. Optimale daglengte omstandigheden te beoordelen van de vruchtbaarheid in knaagdieren bereik vanaf een 12u-dag (12 uur licht en 12 h duisternis, LD12:12), "zomer-achtige" voorwaarden met 14 h van licht en 10 uur donker (LD14:10)21.
  3. Voorbereiding kweek kooien.
    1. Een schone muis kooi met deksel, water, voedsel, beddengoed en nesten per paar fokken voor te bereiden.
    2. Invullen van de kaarten van de kooi met alle vereiste informatie, met inbegrip van geslacht, geboortedatum, muis stam, en de datum wanneer de paring is ingesteld.

3. de vruchtbaarheidsonderzoek

  1. Het identificeren van de dieren moet worden gebruikt voor de studie van de vruchtbaarheid. Ervoor zorgen dat de dieren seksueel volwassen (stap 1). Een typisch gebruikte leeftijdscategorie instellen een vruchtbaarheidsonderzoek in muizen is 10-16 weken oud, een leeftijd waar seksuele rijping is voltooid in de meest experimentele omstandigheden.
  2. Op een schoon tafel, plaatst u de kooi van de fokkerij in stap 2.3 voorbereid.
  3. Vangen en houd de muis.
    1. Een gehandschoende hand in de kooi van de muis langzaam te introduceren. Laat de hand in de kooi voor een korte periode van tijd (~ 5-30-s), waardoor de muizen aan te passen aan de geur van de handschoen en een hand. Vermijd hectische en schokkerige bewegingen.
    2. Verlaag de holle hand dicht bij de bodem van de kooi en het langzaam benadering van de muizen. Zij zullen weglopen. Wanneer ze worden uitgevoerd over de hand, overlappen de staart van een muis tussen duim en wijsvinger.
    3. Til de muis door de staart voor 2-3 s. Als de muis langer worden gehouden moet, vasthouden aan de staart en plaatst u de muisaanwijzer in de holle hand handhaving van de greep op de staart.
  4. Pipetteer 1 mannelijke en daarna 1 vrouwelijke in de fok kooi door hen te houden door de staart (stap 3.3). Ervoor zorgen dat de vrouwtjes in de dezelfde Oestrische fase bij het opzetten van de bepaling van de vruchtbaarheid. Bepaal de oestrische fase van de vrouwtjes door een vaginaal uitstrijkje uit te voeren zoals beschreven in stap 1.7.
  5. Sluit de kooi en ervoor zorgen dat de muizen voedsel, water en nesten materiaal hebben. Bevestig de kooi-kaarthouder met de kaart van de kooi naar de kooi.
  6. Plaats de fok kooi op het rek behuizing. De fok kooi zo ongestoord mogelijk verlof voor de volledige duur van de studie van de vruchtbaarheid. Het gedrag van de studie van de vruchtbaarheid voor 30 dagen. Voor elk paar fokken, gedetailleerde registers bijhouden en noteer 1) de datum waarop die de paring is ingesteld, 2) de datum nesten zijn geboren en 3) het aantal pups geboren, met inbegrip van dode en levende pups. Nest controles dagelijks gedurende de studie uit te voeren.
  7. Verlengen van de vruchtbaarheid studie voor een extra 30-60 dagen indien geen of een zwak effect op de vruchtbaarheid is gevestigd in stap 3.6.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Resultaten

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De gepresenteerde resultaten zijn uit twee verschillende transgene muismodellen waar de transcriptie factor ventrale anterior homeobox 1 (Vax1) in het hele lichaam op één allel, aangeduid als de heterozygote muizen (HET)13of Vax1 is verwijderd voorwaardelijk is verwijderd binnen GnRH neuronen22, hier genoemd voorwaardelijke KO (cKO). Voorafgaand aan het vruchtbaarheidsonderzoek instelt, is het belangrijk om te bevestigen pu...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Discussie

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Het algemene welzijn van de muizen is essentieel voor een succesvolle vruchtbaarheid assay21. Bij het uitvoeren van een test van de vruchtbaarheid, is het belangrijk om niet fysiek controleren op de muizen elke dag omdat dit leiden stress tot kan. Verder voorkomen dat frequente kooi veranderingen, zoals deze ook stressvolle zijn. Idealiter zal de kooi wijzigingen niet meer dan 1 - 2 keer per week moet gebeuren. Blootstelling aan licht tijdens de donkere fase impact negatieve fokkerij in nachtelijk...

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Openbaarmakingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

De auteur heeft niets te onthullen.

Dankbetuigingen

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Ik dank de auteurs bij te dragen tot het eerste werk dat de basis van deze publicatie is. Dankzij Aitor Aguirre, Genevieve E. Ryan en Erica L. Schoeller voor help voorbereiden van het manuscript. Dank aan Jessica Sora Lee en Austin kin voor technische bijstand met het manuscript. H.M.H. werd gesteund door Eunice Kennedy Shriver National Institute of Child Health & Human Development van de National Institutes of Health onder Award nummer R00HD084759.

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Materialen

```html

Lijst van materialen gebruikt in dit artikel
NaamBedrijfCatalogusnummerOpmerkingen
Steriele katoenen bolletjesFisher22456885
OppervlaktebeschermerFisher1420637
LichtmeterVWR21800-014
Methyleenblauw Sigma-AldrichM9140
MicroscoopglazenGenesee Scientific29-101
Optimouse rek met kooienAnimalCare systemsC89100
Waterfles mand AnimalCare systemsC61011
Gefilterde kooitoppenAnimalCare systemsC78210
Optimice standaard voederAnimalCare systemsC40100SG
Kooi kaarthouderAnimalCare systemsC43251
Kooi kaartenAnimalCare systemsM52010
FlesassemblageAnimalCare systemsC79122P
Bed R'Nest NestingThe AndersonsBRN4WSR
1/8" Corn Cob beddengoed The Andersons8B
Standaard muisvoerTeklad7904 (7004)
SchaalVWR10205-004
Polypropyleen bekerFisher14-955-111F
```

Referenties

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Schneider, J. E. Energy balance and reproduction. Physiology and Behavior. 81 (2), 289-317 (2004).
  2. Walton, J. C., Weil, Z. M., Nelson, R. J. Influence of photoperiod on hormones, behavior, and immune function. Frontiers Neuroendocrinology. 32 (3), 303-319 (2012).
  3. Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance. Neuroscience communications. 2, (2016).
  4. Kauffman, A. S. Sexual differentiation and the Kiss1 system: Hormonal and developmental considerations. Peptides. , (2009).
  5. Bronson, F. H., Dagg, C. P., Snell, G. D. Reproduction. , Dover Publications, Inc. New York. (1966).
  6. Chehab, F. F., Mounzih, K., Lu, R., Lim, M. E. Early onset of reproductive function in normal female mice treated with leptin. Science. , (1997).
  7. Yoshimura, S., Yamaguchi, H., Konno, K., Ohsawa, N., Noguchi, S., Chisaka, A. Observation of Preputial Separation is a Useful Tool for Evaluating Endocrine Active Chemicals. J Toxicologic Pathology. 18, 141-157 (2005).
  8. Ahima, R. S., Dushay, J., Flier, S. N., Prabakaran, D., Flier, J. S. Leptin accelerates the onset of puberty in normal female mice. Journal of Clinical Investigation. 99 (3), 391-395 (1997).
  9. Bohlen, T. M., et al. A short-day photoperiod delays the timing of puberty in female mice via changes in the kisspeptin system. Frontiers in Endocrinology. 9 (FEB), 1-9 (2018).
  10. Shahab, M., Mastronardi, C., Seminara, S. B., Crowley, W. F., Ojeda, S. R., Plant, T. M. Increased hypothalamic GPR54 signaling: A potential mechanism for initiation of puberty in primates. Proceedings of the National Academy of Sciences. , (2005).
  11. Hoffmann, H. M., Mellon, P. L. A small population of hypothalamic neurons govern fertility: the critical role of VAX1 in GnRH neuron development and fertility maintenance. Neuroscience communications. 2, 5-9 (2016).
  12. Navarro, V. M., et al. Role of Neurokinin B in the Control of Female Puberty and Its Modulation by Metabolic Status. Journal of Neuroscience. 32 (7), 2388-2397 (2012).
  13. Hoffmann, H. M., Tamrazian, A., Xie, H., Pérez-Millán, M. I., Kauffman, A. S., Mellon, P. L. Heterozygous deletion of ventral anterior homeobox (Vax1) causes subfertility in mice. Endocrinology. 155 (10), 4043-4053 (2014).
  14. Kauffman, A. S., et al. The Kisspeptin Receptor GPR54 Is Required for Sexual Differentiation of the Brain and Behavior. Journal of Neuroscience. 27 (33), 8826-8835 (2007).
  15. Teles, M. G., et al. Brief report: A GPR54-activating mutation in a patient with central precocious puberty. New England Journal of Medicine. , (2008).
  16. Korenbrot, C. C., Huhtaniemi, I. T., Weiner, R. I. Preputial separation as an external sign of pubertal development in the male rat. Biology of reproduction. , (1977).
  17. Gaytan, F., et al. Development and validation of a method for precise dating of female puberty in laboratory rodents: The puberty ovarian maturation score (Pub-Score). Scientific Reports. 7 (March), 1-11 (2017).
  18. Caligioni, C. Assessing reproductive status/stages in mice. Current Protocols in Neuroscience. , 1-11 (2010).
  19. Mayer, C., et al. Timing and completion of puberty in female mice depend on estrogen receptor -signaling in kisspeptin neurons. Proceedings of the National Academy of Sciences. 107 (52), 22693-22698 (2010).
  20. McLean, A. C., Valenzuela, N., Fai, S., Bennett, S. A. L. Performing Vaginal Lavage, Crystal Violet Staining, and Vaginal Cytological Evaluation for Mouse Estrous Cycle Staging Identification. Journal of Visualized Experiments. (67), 4-9 (2012).
  21. Hedrich, H. The Laboratory Mouse. , Academic Press. (2012).
  22. Hoffmann, H. M., Trang, C., Gong, P., Kimura, I., Pandolfi, E. C., Mellon, P. L. Deletion of Vax1 from Gonadotropin-Releasing Hormone (GnRH) Neurons Abolishes GnRH Expression and Leads to Hypogonadism and Infertility. Journal of Neuroscience. 36 (12), 3506-3518 (2016).
  23. Sloboda, D. M., Howie, G. J., Pleasants, A., Gluckman, P. D., Vickers, M. H. Pre- and postnatal nutritional histories influence reproductive maturation and ovarian function in the rat. PLoS ONE. , (2009).
  24. Manual, R. Breeding Strategies for Maintaining Colonies of Laboratory Mice. Management. , (2007).
  25. Kennedy, G. C., Mitra, J. Body weight and food intake as initiating factors for puberty in the rat. The Journal of Physiology. , (1963).
  26. Sisk, C. L., Foster, D. L. The neural basis of puberty and adolescence. Nature Neuroscience. 7 (10), 1040-1047 (2004).
  27. Nelson, J. F., Karelus, K., Felicio, L. S., Johnson, T. E. Genetic influences on the timing of puberty in mice. Biology of reproduction. , (1990).
  28. Nelson, J. F., Felicio, L. S., Randall, P. K., Sims, C., Finch, C. E. A longitudinal study of estrous cyclicity in aging C57BL/6J mice: I. Cycle frequency, length and vaginal cytology. Biology of reproduction. , (1982).
  29. Falconer, D. S. Weight and age at puberty in female and male mice of strains selected for large and small body size. Genetical Research. , (1984).
  30. Rodriguez, I., Araki, K., Khatib, K., Martinou, J. C., Vassalli, P. Mouse vaginal opening is an apoptosis-dependent process which can be prevented by the overexpression of Bcl2. Developmental Biology. , (1997).
  31. Lomniczi, A., Wright, H., Ojeda, S. R. Epigenetic regulation of female puberty. Frontiers in Neuroendocrinology. 36, 90-107 (2015).
  32. Selmanoff, M. K., Goldman, B. D., Ginsburg, B. E. Developmental changes in serum luteinizing hormone, follicle stimulating hormone and androgen levels in males of two inbred mouse strains. Endocrinology. 100 (1), 122-127 (1977).
  33. Larder, R., Clark, D. D., Miller, N. L. G., Mellon, P. L. Hypothalamic Dysregulation and Infertility in Mice Lacking the Homeodomain Protein Six6. Journal of Neuroscience. 31 (2), 426-438 (2011).
  34. Knight, C. H., Maltz, E., Docherty, A. H. Milk yield and composition in mice: Effects of litter size and lactation number. Comparative Biochemistry and Physiology -- Part A: Physiology. 84 (1), 127-133 (1986).
  35. Chahoud, I., Paumgartten, F. J. R. Influence of litter size on the postnatal growth of rat pups: is there a rationale for litter-size standardization in toxicity studies. Environmental research. 109 (8), 1021-1027 (2009).
  36. Pandolfi, E. C., Hoffmann, H. M., Schoeller, E. L., Gorman, M. R., Mellon, P. L. Haploinsufficiency of SIX3 Abolishes Male Reproductive Behavior Through Disrupted Olfactory Development, and Impairs Female Fertility Through Disrupted GnRH Neuron Migration. Molecular Neurobiology. , (2018).

Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.

Herprints en machtigingen

Toestemming aanvragen om de tekst of afbeeldingen van dit JoVE-artikel te hergebruiken

Toestemming aanvragen

Trefwoorden

Preputiale scheidingvaginale openingmuizenfokkerijrattenfokkerijseksuele rijploftvestiging van de oestrusomgang met dieren

Gerelateerde artikelen