Hier presenteren we een protocol voor het verzamelen van de bloemige geur vluchtige stoffen uit bloeiende bloemen, met behulp van een niet-destructieve bemonsteringsprocedure.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
Snelle verzameling van bloemige geur volatiles met een headspace vluchtige collectie techniek voor GC-MS thermische desorptie bemonstering
In dit artikel
Samenvatting
Samenvatting
Geuren van veel bloemen families zijn bemonsterd en de vluchtige stoffen geanalyseerd. Het kennen van de verbindingen waaruit de geuren bestaan kan een belangrijke stap zijn voor het behoud van bloemen die bedreigd of bedreigd zijn. Omdat florale geur cruciaal is voor het aantrekken van bestuivers, kan deze methode worden gebruikt om de bestuiving beter te begrijpen of zelfs te verbeteren. We presenteren een protocol met behulp van een draagbare houtskool luchtfilter en vacuüm voor het verzamelen van bloemengeur volatiles, die vervolgens worden geanalyseerd door een GC-MS. Door deze methode te gebruiken, kunnen geur volatikels worden bemonsterd met behulp van een niet-destructieve methode met een machine die gemakkelijk kan worden vervoerd. Deze methodologie maakt gebruik van een snelle bemonsteringprocedure, snijden bemonstering tijd omlaag van 2-3 uur tot ongeveer 10 minuten. Met behulp van GC-MS kunnen de geurstoffen individueel worden geïdentificeerd, op basis van authentieke normen. De stappen die worden gebruikt voor het verzamelen van geur-en controlegegevens worden weergegeven, van materiaalinstellingen tot het verzamelen van de gegevensuitvoer.
Inleiding
Bloemen produceren meestal een geur die wordt gebruikt om bestuivers aan te trekken. Deze geuren bestaan uit vele chemische verbindingen die allemaal samen fungeren als een bloemige Blend1,2,3. Zonder deze geuren zouden bloemen minder snel hun genetische informatie doorgeven met bestuivers. Florale geur is gedocumenteerd in veel bloeiende plantenfamilies, met Orchidaceae als een van de meest voorkomende families bestudeerd4. Om de rol van florale geur in bestuiving te begrijpen, is het belangrijk om de chemische verbindingen die uit de bloemen....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Protocol
Opmerking: parfums of geurende lotions en producten mogen tijdens geen van deze procedures worden gedragen.
1. bloem selectie
Opmerking: bloemen die worden gebruikt, kunnen natuurlijk in het milieu groeien of onder kunstmatige omgevingsomstandigheden worden gehouden. Temperatuur, vochtigheid en lichtniveau tijdens het verzamelen kan variëren afhankelijk van de specifieke bloemsoorten die worden gebruikt, en welk type gegevens worden verzameld. Er zijn bijvoorbeeld gegevens verzameld overdag en 's nachts voor dezelfde bloem om te bepalen of de geur varieert in de tijd van de dag, en verzameld van zowel in situ als b....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Resultaten
Representatieve gegevens van de GC-MS worden weergegeven als een chromatogram in Figuur 1. Naast het chromatogram wordt ook een gegevensbestand met resultaten verstrekt (aanvullend bestand 1). Dit gegevensbestand biedt de retentietijd voor elke piek (RT) en een identificatie van welke verbinding die piek is (bibliotheek/ID). Pieken tussen 10:00 en 15:00 minuten zijn bloemen volatiles, als gevolg van het molecuulgewicht van de verbindingen10. De getall.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Discussie
Hoewel deze techniek ongelooflijk waardevol is voor de Samplingsnelheid en draagbaarheid, gebruikt een beperking het voor epifytische soorten, of die op bomen groeien en niet vanaf de grond. In de originele studie10was een van de gesamplede bloemen epifytisch. Omdat de machine te zwaar is om vrij te hangen, moet een stabiele, verhoogde basis worden gemaakt voor bemonstering. Bovendien kan de machine ofwel worden aangesloten op een stopcontact of op batterijen, dus als er een langdurige veld bemons.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Openbaarmakingen
De auteurs verklaren geen belangenconflicten.
Dankbetuigingen
USDA-ARS Research Project nummer 6036-22000-028-00D. Het gebruik van handels-, firma-of corporatie namen in deze publicatie is voor de informatie en het gemak van de lezer. Een dergelijk gebruik vormt geen officiële bekrachtiging of goedkeuring door het Amerikaanse ministerie van landbouw of de Landbouwonderzoekdienst van een product of dienst met uitsluiting van andere producten die geschikt kunnen zijn. Daarnaast financierde de Universiteit van Florida biologie Department-Lewis en Varina Vaughn Fellowship in Orchid Biology (2017), en een University of Florida Graduate Research Fellowship (2014-2018) ook financiering. We danken ook Cindy Bennington van Stetson Univer....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Materialen
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| Bulkhead Union | Cole-Palmer | UX-06390-10 | |
| FEP tubing | Cole-Palmer | UX-06407-60 | |
| Gas Chromatography | Hewlett Packard | 6890 | |
| Glass Wool, Silanized | Sigma-Aldrich | 20411 | |
| Inlet liner | Agilent | 5062-3587 | |
| Mass Spectrometer | Hewlett Packard | 5973 | |
| Reynolds oven bag | Reynolds Consumer Products | Turkey size | |
| Tenax Porous Polymer Adsorbent | Sigma-Aldrich | 11982 |
Referenties
- Knudsen, J. T., Tollsten, L., Bergstrom, L. G. Floral scents- A checklist of volatile compounds isolated by head-space techniques. Phytochemistry. 33, 253-280 (1993).
- Dudareva, N. A., Pichersky, E. Biology of floral scent. , CRC Taylor and Francis. Boca Raton, FL. (2006).
- Altenburger, R., Matile, ....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Herprints en machtigingen
